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「表達載體,、生產(chǎn)疫苗」:釀酒酵母的新可能
閱讀:837 發(fā)布時間:2022-1-18宮頸癌是常見的女性惡化腫瘤,,其發(fā)生率在女性群體中僅次于乳腺癌。世衛(wèi)組織統(tǒng)計顯示,,2020年全球?qū)m頸癌新發(fā)病例超過60.4萬例,,其中近11萬例在中國。目前關于宮頸癌發(fā)生機制尚未*明確,,主要與人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染有關,,其中HPV16、18,、31,、45型是宮頸癌的高危型。
為了對抗這一癌癥,,人類研發(fā)出了HPV疫苗,。HPV疫苗分為治療性疫苗和預防性疫苗,目前國家所提倡接種的HPV疫苗是預防性疫苗,,主要使用基因工程技術進行生產(chǎn),,通過誘導特異性中和抗體,阻斷病毒的早期感染來預防病毒相關疾病的發(fā)生,。
當我們在接種HPV疫苗時,,能看見疫苗包裝盒上有“釀酒酵母"的字眼。
釀酒酵母是什么,?難道HPV疫苗的制作過程跟釀酒有關系嗎,?
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又稱面包酵母或者出芽酵母,,細胞為球形或者卵形,,直徑5-10μm,是第一個完成基因組測序的真核生物,,測序工作于1996年完成,。
作為一種單細胞真核生物,釀酒酵母具有一切真核細胞生命活動最基本特征,,又有實驗所需微生物應具備的代謝周期快,、生長迅速、操作方便等許多優(yōu)點,,一直是基礎及應用研究的主要對象,,在2000年被NIH選為標準微生物模型系統(tǒng),,在食品、醫(yī)藥等領域應用廣泛,。
重組全釀酒酵母疫苗是一種新型的基因工程疫苗,,以釀酒酵母菌作為抗原表達載體構(gòu)建的重組全酵母疫苗,既能攜帶特異性目的抗原,,又能揮發(fā)出免疫佐劑作用,,能有效地誘導出抗原特異性的免疫應答,該類疫苗已在抗腫瘤及抗病毒感染的防治研究中,,顯示出了很好的研究價值和應用前景,。
1981年開始用釀酒酵母表達外源基因,目前利用釀酒酵母為宿主系統(tǒng)表達了許多外源基因產(chǎn)物,,如乙型肝炎疫苗,、人胰島素、人粒細胞集落刺激因子,、人血管抑制素等,。
釀酒酵母在自然界中分布較廣,屬于兼性厭氧微生物,,主要是從冰葡萄汁或柑橘果中利用酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基和麥芽汁瓊脂平皿培養(yǎng)基分離純化而來,。
1、富集培養(yǎng):取適量樣品加入富集培養(yǎng)基,,進行目標菌株富集,;
2、梯度稀釋:將富集培養(yǎng)液按10倍梯度進行稀釋,;
DW-9系列微生物試劑分液器
DW-9系列微生物試劑分液器是一款精密輸送液體的電子蠕動泵分液系統(tǒng),,適用于培養(yǎng)基、緩沖液和稀釋液的自動批量分裝,,廣泛應用于各種食品,、藥品企業(yè)、政府檢測機構(gòu)和科研單位的專業(yè)微生物實驗室,。
3,、分離純化:取梯度稀釋液均勻涂布于分離培養(yǎng)基,放置培養(yǎng)箱進行培養(yǎng),,然后再進行目標菌株的初篩及復篩,;
DW-16型自動細菌涂布接種儀
DW-16型自動細菌涂布接種儀由放置培養(yǎng)皿的可旋轉(zhuǎn)平臺(自動)和可變速驅(qū)動電機組成,是杭州大微專為“經(jīng)典培養(yǎng)法"微生物實驗中的“細菌涂布接種"環(huán)節(jié)而設計制造,,塑料平皿適用,。
4、菌種鑒定:通過形態(tài)學特征并結(jié)合生理生化實驗進行菌株鑒定,。
杭州大微DW-M80型自動微生物生化鑒定系統(tǒng)通過生化反應原理(包括酶底物反應/糖利用反應/同化反應/氨基酸實驗等)捕獲細菌的生化表型特征,,對微生物進行鑒定;結(jié)合微生物激光透射比色法,,對抗菌藥敏試驗進行分析,。
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