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Worthington組織消化指南

引言

組織消化酶主要用于組織培養(yǎng)和細(xì)胞生物學(xué)研究的原代細(xì)胞的分離和收集,。盡管這些消化酶已經(jīng)普遍應(yīng)用多年，但是對(duì)其組織消化和細(xì)胞收集的作用機(jī)制卻沒(méi)有全面的理解,。  由此導(dǎo)致的結(jié)果便是選擇一種消化方法大多是隨機(jī)選擇或基于過(guò)去的經(jīng)驗(yàn),，而不是在*理解消化原理的基礎(chǔ)上選擇的消化方案，以及如何根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康男拚桨敢垣@得更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。

細(xì)胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個(gè)細(xì)胞,，而影響結(jié)果的原因有很多，包括（不限于）以下：

1,、組織類型

2,、物種來(lái)源

3、動(dòng)物年齡

4,、遺傳改造情況（如knockouts）

5,、所用的消化培養(yǎng)液

6、所用的酶

7,、消化酶中的雜質(zhì)

8,、所用消化酶的工作濃度

9、溫度

10,、孵育時(shí)間

通常前四個(gè)原因沒(méi)辦法選擇,，而剩下的原因一般由經(jīng)驗(yàn)決定以獲取zui適實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

通過(guò)查閱文獻(xiàn)來(lái)選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)搞得一頭霧水,。這些巨大差異來(lái)源于組織胞外基質(zhì)的復(fù)雜而動(dòng)態(tài)的特性,，以及過(guò)去常用的粗制,、未提純的組織分離酶。另外,，組織胞外基質(zhì)由各種蛋白,、糖蛋白、脂類和糖脂組成,，這些成分的組成比例在不同物種,、不同組織、甚至不同發(fā)育（年齡）之間存在明顯的差異,，這些因素都極大的影響了消化方案的制定,。目前通常使用的粗制酶，如鏈霉蛋白酶,、NF1:250,、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶,、核酶和脂酶,。

本指南總結(jié)了目前常用組織消化酶的zui適消化和細(xì)胞收集知識(shí)和方法，描述了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)步驟,， 以便于制定一個(gè)*的細(xì)胞分離方案,，同時(shí)列舉了一些相關(guān)的參考文獻(xiàn)。

下表列出多種組織的適宜消化酶（含參考文獻(xiàn),，以組織類型和物種分類,，詳見鏈接）

注：使用Worthington公司消化酶的文獻(xiàn)不限于上表鏈接中所列，一般而言,，Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類型的消化,。

其他組織消化手冊(cè)

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