synvolux SAINT蛋白說明書

SAINT - PROTEIN

P R O T E I N D E L I V E R Y S Y S T E M

SAINT蛋白

為使用 SAINT-蛋白（目錄號：編號SP-3004-01、SP-3004-02,、SP-3004-04）。本方案中的量適用于 24 孔板的單個孔,。其他格式請參見本頁底部的表 1,。P RO TE IN DE LI VE RY SY SS TE M

一般轉(zhuǎn)染方案

1. 準(zhǔn)備細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

• 貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前 1 天,，將細(xì)胞接種于 0.5 mL 生長培養(yǎng)基中,，使細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時達(dá)到 80% 融合。轉(zhuǎn)染前,，立即用不含血清的相同培養(yǎng)基（無血清培養(yǎng)基）替換生長培養(yǎng)基,。
• 懸浮細(xì)胞：轉(zhuǎn)染當(dāng)天，在 0.5 mL 無血清培養(yǎng)基中以其大密度的約 80% 鋪板細(xì)胞,。

2. 使 SAINT-蛋白小瓶達(dá)到室溫,。

3. 充分渦旋 SAINT-蛋白約 30 秒。

4. 使用 1:10 的蛋白 (µg) 與 SAINT-蛋白 (µl) 比例制備復(fù)合物,。對于每份轉(zhuǎn)染樣品,，按照以下方法制備復(fù)合物：

a. 在 50µl PBS 中稀釋 2µg 蛋白。

b. 向蛋白/PBS 溶液中加入 20µl SAINT-蛋白,，并輕輕重懸,。

5. 在室溫下孵育混合物 5-10 min（溶液可能出現(xiàn)渾濁）。

6. 向細(xì)胞中加入復(fù)合物 (70µl),。

7. 在 CO2 培養(yǎng)箱中于 37 ℃ 下孵育 4 小時,。

8. 如果需要更長時間的孵育，加入 50µl 血清,，將血清濃度調(diào)整至 8%,。

9. 進(jìn)行檢測。