omegabiotek M3298-01說(shuō)明書(shū)

Mag-Bind®cfDNA試劑盒

使用磁珠從血漿或血清中分離循環(huán)的無(wú)細(xì)胞DNA。

SKU：M3298-01

類別：循環(huán)DNA

標(biāo)簽：cfDNA,，M3298-00，M3298-01,，M3298-02,，NIPT

概觀

Mag-Bind®cfDNA試劑盒專為從500-8,000μL血漿或血清樣品中快速可靠地分離循環(huán)DNA而設(shè)計(jì)。Mag-Bind®cfDNA試劑盒可以手動(dòng)或在自動(dòng)化平臺(tái)上進(jìn)行處理,。該程序消除了對(duì)漏斗和真空步驟的需要,，在自動(dòng)化協(xié)議中提供免提操作。

*配方的結(jié)合緩沖液允許以自動(dòng)化形式處理大量樣品,，允許在24孔板形式的單個(gè)孔中處理4mL血清或血漿,。Mag-Bind®顆粒CH的磁響應(yīng)允許在需要大體積的步驟中快速磁化，并且高結(jié)合容量允許減少所需的磁性顆粒量,，從而將4mL血清或血漿樣品的洗脫體積降低至50μL ,。

Mag-Bind®cfDNA試劑盒也已自動(dòng)化，可在Hamilton平臺(tái)上處理8 mL樣品,。請(qǐng)聯(lián)系我們獲取自動(dòng)化支持,。

協(xié)議適用于以下自動(dòng)化平臺(tái)：

• HamiltonMicrolab®STAR
• HamiltonMicrolab®NIMBUS
• KingFisher™，BioSprint®和MagMAX®96

產(chǎn)品規(guī)格

僅供研究使用,。不用于診斷過(guò)程,。

套件組件

Mag-Bind®顆粒CH

DS緩沖區(qū)

JSB緩沖區(qū)

GT7緩沖區(qū)

SPW緩沖區(qū)

洗脫緩沖液

蛋白酶K溶液

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化的無(wú)細(xì)胞DNA幾乎沒(méi)有基因組DNA物

圖1. 來(lái)自4 mL血清的純化DNA的電泳圖重疊,。使用來(lái)自O(shè)mega Bio-tek和Company Q的試劑盒按照制造商推薦的方案純化4mL未加標(biāo)血清。在Agilent的TapeStation®2200上分析純化的DNA,。

使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®fCRDNA試劑盒純化的無(wú)細(xì)胞DNA的高質(zhì)量和高產(chǎn)量Mag-Bind®cfDNA試劑盒

圖2. 來(lái)自1 mL血清的純化DNA的電泳圖覆蓋圖  ,。將剪切的細(xì)菌DNA摻入血清樣品中并使用Omega Bio-tek的Mag-Bind cfDNA試劑盒和來(lái)自Company Q的基于柱的試劑盒進(jìn)行分離。使用16s細(xì)菌特異性引物以1X和10X稀釋度進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR,。在Agilent的TapeStation®2200上分析純化的DNA .Omega Bio-tek試劑盒能夠捕獲沒(méi)有基因組DNA污染的循環(huán)無(wú)細(xì)胞DNA,。相反，Company Q的洗脫液含有高分子量片段,，表明在循環(huán)DNA分離中存在基因組DNA,。

使用Omega Bio-tek的cfDNA試劑盒純化的cfDNA不含PCR抑制劑

表1.  對(duì)從純化的樣品中分離的未稀釋和10倍稀釋的DNA一式三份進(jìn)行具有16S細(xì)菌特異性引物的實(shí)時(shí)PCR [圖2]。數(shù)據(jù)顯示純化的DNA不含PCR抑制劑,，并且特定的cfDNA濃度高于公司Q.

使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒可以回收小至50 bp的循環(huán)無(wú)細(xì)胞DNA

圖3.  使用修改的方案可以回收小至50bp的DNA片段,。加入50bp DNA梯度的血清用Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化。通過(guò)使用修改的協(xié)議,，回收了較小的片段,。

使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒分析從8 mL血漿中純化的cfDNA

圖4.1。 使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化血漿樣品,。將純化的DNA樣品加載到TapeStation 2200上的D100高靈敏帶上,。

圖4.2,。 使用TapeStation軟件分析圖4.1中的凝膠圖像。峰值和濃度數(shù)據(jù)顯示8 mL自動(dòng)化過(guò)程是成功的,。

圖4.3,。 使用TapeStation軟件分析圖4.1中的凝膠圖像。疊加顯示純化的DNA含有更多的cfDNA和小的基因組DNA污染,。

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