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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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haemtech HCATIII-0120說明書

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haemtech Haematologic Technologies,,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商,。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié),。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),,包括酶原,酶,,輔因子和抑制劑,,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列,。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究,。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),,合同制造和合同研究,。

haemtech HCATIII-0120說明書

人類抗凝血酶III

 


凝血酶III的結(jié)構(gòu)域抗凝血酶III含有三個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵(-SS-),富含碳水化合物的結(jié)構(gòu)域(CHO),,NH2-末端肝素結(jié)合結(jié)構(gòu)域和COOH-末端絲氨酸蛋白酶結(jié)合結(jié)構(gòu)域,。

 

HCATIII-0120 Human Antithrombin III 

Size

1mg

Formulation

50% (vol/vol) Glycerol/H2O

Molecular Weight

 

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

Compound

 

 

Assay

Thrombin inhibition

Shelf Life (properly stored)

12 months

Chemical Formula

 

 

 

MCATIII-5120 Mouse Antithrombin III

Size

100µg

Formulation

50% (vol/vol) Glycerol/H2O

Molecular Weight

 

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

Compound

 

 

Assay

Thrombin inhibition

Shelf Life (properly stored)

12 months

Chemical Formula

 

 

抗凝血酶III(ATIII)是單鏈糖蛋白,分子量為58,000,。它是serpin(絲氨酸蛋白酶抑制劑)超家族的成員,,被認(rèn)為是凝血級聯(lián)中重要的抑制劑(1,2)。ATIII抑制廣譜的絲氨酸蛋白酶,,包括凝血酶,,因子IXa,Xa和XIa,,激肽釋放酶,,纖溶酶,尿激酶,,C1-酯酶和胰蛋白酶,。抑制機(jī)制涉及在蛋白酶的活性位點(diǎn)和ATIII的易斷裂鍵(Arg 385-Ser 386)之間形成穩(wěn)定的1:1復(fù)合物。已顯示凝血酶的活性位點(diǎn)絲氨酸與ATIII的P1氨基酸(Arg 385)形成共價(jià)中間體,。ATIII對絲氨酸蛋白酶的抑制率由肝素不同程度地增加,。在是凝血酶抑制劑或Xa因子抑制劑的情況下,在肝素存在下,,與ATIII的相互作用增強(qiáng)了3個(gè)數(shù)量級,。ATIII和肝素之間的相互作用涉及肝素上的硫酸化和非硫酸化單糖單元的*序列,以及ATIII上的關(guān)鍵賴氨酸殘基,。已經(jīng)證明ATIII與血管內(nèi)皮上的類肝素結(jié)構(gòu)的結(jié)合并顯示出增強(qiáng)因子IXa,,Xa和凝血酶的抑制。

ATIII也可以在補(bǔ)體級聯(lián)中起作用,。已證實(shí)ATIII與血清中的液相補(bǔ)體攻擊復(fù)合物的結(jié)合,。此外,補(bǔ)體的S蛋白(膜攻擊復(fù)合物的抑制劑)干擾ATIII /凝血酶相互作用,。

通過肝素 - 瓊脂糖親和層析從新鮮冷凍血漿制備ATIII(3),。純化的蛋白質(zhì)以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應(yīng),應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度,。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人ATIII,,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),,BSA(64 kDa),,谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),,碳酸酐酶(28 kDa),,肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

本土化

等離子體

血漿濃度

為150μg/ ml的

行動(dòng)方式

絲氨酸蛋白酶抑制劑

分子量

58,000(3)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,,280納米

 

= 6.2(4)

 

等電點(diǎn)

4.9-5.3(5)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,,三個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵(Cys 8-Cys 128,Cys 21-Cys95,,Cys 239-Cys 422)(4),,10%α-螺旋,30-40%b-結(jié)構(gòu),,50%無規(guī)卷曲(5) ),,易裂變債券(Arg 385-Ser 386)

碳水化合物百分比

9%(5,7)

 

參考

  1. Griffith,MJ,,In Blood Coagulation,,ed。RFP Zwaal,,HC Hemker,,pp.259-283,Amersterdam:Elsevier,,1986,。
  2. Rosenberg,RD,,et al,。,J.Clin,。Invest。,,74,1(1984),。
  3. Damus,PS和Rosenberg,,RD,,Methods Enzymol。,,45,653-69(1976),。
  4. Petersen,,TE等人,In The Physiological Inhibitors of Coagulation and Fibrinolysis,,ed,。D. Collen,M,。Verstrate,,pp.43-54,5。Amsterdam:Elsevier,,1979,。
  5. Nordenman,B.,,et al,。,J.Biochem,。,,78,195(1977)。
  6. Conrad,,J.,,et al。,,Hemostasis,,13,363(1983)。
  7. Kurachi,,W.,,et al。,,Biochemistry,,15,368(1976)。

 

 

 

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