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209次Haematologic HCXII-0155
HTI HCXII-0155說明書
Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商,。HTI的重點是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節(jié),。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,,包括酶原,酶,,輔因子和抑制劑,,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,,用于臨床研究,。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,,化驗開發(fā),,合同制造和合同研究。
Haematologic HCXII-0155說明書
Human Factor XII
Human Factor XII 因子XII
的結構域表示基于序列同源性的因子XII結構域的組織,,其中:EGF =表皮生長因子,,I型和II型=與纖連蛋白中發(fā)現(xiàn)的結構域同源的結構域,實心箭頭=形成激肽釋放酶的切割位點α-和β-因子XIIa,,虛線箭頭=裂解導致中間形式的因子XIIa。
HCXII-0155 人因XII
尺寸 | 100微克 |
公式 | 50%甘油/ 4mM乙酸鈉,,0.15M NaCl,,pH 5.3(v / v) |
存儲 | -20℃下 |
純度 | 通過SDS-PAGE> 95% |
活動決定 | 凝血試驗 |
保質期(妥善保存) | 12個月 |
因子XII(XII)(Hageman因子)是單鏈(Mr = 78,000)糖蛋白酶原,其在血漿中以40μg/ ml(1-5)的濃度循環(huán),。激肽釋放酶對XII向活性絲氨酸蛋白酶因子XIIa(XIIa)的相互激活是引發(fā)內(nèi)源性凝血途徑的關鍵,。表面結合的α-XIIa依次激活因子XI至XIa,。激肽釋放酶對α-XIIa的二次切割產(chǎn)生β-XIIa,其催化激肽釋放酶,,因子VII和經(jīng)典補體級聯(lián)的溶液相活化,。
生理和非生理學的各種帶負電的物質促進XII活化并因此引發(fā)內(nèi)在途徑的能力導致了pssentonym“接觸激活”。與陰離子表面結合會誘導構象變化,,使XII酶原更容易被各種蛋白酶切割(6,7),。單獨與帶負電荷的表面結合不太可能足以激活XII,因為缺乏前激肽釋放酶和高分子量激肽原的XII和血漿的高度純化制劑不經(jīng)歷這種“自催化”(8-11),。
激肽釋放酶在XII的R353-Val354處的單次切割產(chǎn)生α-XIIa,,即通過二硫鍵保持在一起的2鏈蛋白酶(Mr = 80,000)。COOH末端輕鏈(Mr = 28,000)含有催化三聯(lián)體(His-40,,Asp-89,,Ser-191),而NH2-末端重鏈(Mr = 52,000)含有分子的陰離子表面結合部分,。 ,。二硫鍵外的激肽釋放酶對α-XIIa的二次切割產(chǎn)生β-XIIa(XIIf,BHFa,,HFf,,hageman因子片段)(Mr = 28,000),其不再結合陰離子表面(12),。β-XIIa可以激活前激肽釋放酶,,但幾乎沒有促凝血活性(13,14)。XIIa的其他幾種次要中間形式如上圖所示,。
XIIa的抑制劑包括C1-INH,,α2-抗纖溶酶,α2-巨球蛋白和抗凝血酶III,。在生理濃度下,,這些抑制劑的相對有效性分別為91:4.5:3:1.5(10,16-19)。C1-INH與XII的比例與因子VII的“冷激活”和血漿儲存時腎素對腎素的轉化有關(20,21),。
通過免疫親和層析從新鮮冷凍血漿制備人因子XII,,并在50%甘油/ 4mM乙酸鈉,0.15M NaCl,,pH 5.3中提供,,在-20℃下儲存。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
加載 | 人因子XII,,每泳道1μg |
緩沖 | MOPS |
標準 | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),,磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),,酒精脫氫酶(39 kDa),,碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),,溶菌酶(14 kDa的) |
特別說明 | 由于存在高達50%的β形式,,重鏈是雙重鏈。α-Xa向β-Xa的轉化通過α-Xa對α-Xa的自動切割發(fā)生,,導致COOH末端肽的喪失,。 |
本土化 | 等離子體 | |||||
血漿濃度 | 40μg/ ml(3) | |||||
行動方式 | 酶原; 絲氨酸蛋白酶XIIa的前體; 由激肽釋放酶/ HMWK /陰離子表面復合物激活以引發(fā)內(nèi)在途徑 | |||||
分子量 | 80,000(2) | |||||
消光系數(shù) |
| |||||
等電點 | 6.8 | |||||
結構體 | 單鏈(mr = 80,000),,基于序列同源性組織成6個結構域(5),。 | |||||
碳水化合物百分比 | 17% |
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