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Haematologic HCXI-0150說明書

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Haematologic HCXI-0150說明書

HTI HCXI-0150

 

Haematologic Technologies,,Inc,。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商,。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),,以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),,包括酶原,,酶,輔因子和抑制劑,,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,,用于臨床研究,。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),,合同制造和合同研究,。

 

Haematologic HCXI-0150說明書

Human Coagulation Factor XI

人凝血因子XI

HCXI-0150 Human Factor XI

 

 

因子XI
的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)表示因子XI單體的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)。鑒定為R1至R4的區(qū)域?qū)?yīng)于四個串聯(lián)氨基酸序列重復(fù),,其終包含因子XIa的重鏈,。在因子XIIa的蛋白水解活化期間,包含因子XIa的輕鏈的“催化結(jié)構(gòu)域”從重鏈區(qū)域切割下來,。因子XIa的重鏈和輕鏈通過二硫鍵保持相關(guān),。成熟因子XI分子是由兩個明顯相同的單體組成的同型二聚體,其通過二硫鍵保持締合,。

 

  •  

HCXI-0150 人因XI 

  •  

尺寸

50微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗(yàn)

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  

 

因子XI是血漿糖蛋白,,其在與高分子量激肽原的非共價(jià)復(fù)合物中循環(huán)(1)。成熟分子在肝臟中合成,,是雙鏈同源二聚體,,分子量約為160,000(2,3)。據(jù)估計(jì),,總質(zhì)量的5%可歸因于碳水化合物(2),。兩種相同的單體具有80,000的分子量,并通過二硫鍵連接在一起,。因此,,通過SDS-PAGE分析,因子XI表現(xiàn)為單一條帶,,非還原(Mr = 160,000)和還原(Mr = 80,000),。

因子XI作為酶原循環(huán)并且需要蛋白水解活化以獲得絲氨酸蛋白酶活性。因子XI向因子XIa的轉(zhuǎn)化由因子XIIa催化,,并導(dǎo)致每個單體(3)中Arg369-Ile370鍵的裂解,。因子XIa由兩個NH2-末端衍生的重鏈和兩個COOH-末端衍生的輕鏈組成,所有這些輕鏈通過二硫鍵保持在一起,。因子XIa通過催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化而參與凝血的內(nèi)在途徑,。一種稱為血漿促凝血酶原激酶前因缺陷的出血性疾病是由缺乏因子XI促凝血活性引起的(4,5)。在因子XI缺陷患者中觀察到的可變的出血傾向與因子XI活性或抗原水平無關(guān),。

從歷*看,,因子XI由于其相對較低的血漿濃度及其對蛋白水解的敏感性而難以純化(6)。因子XI從新鮮冷凍血漿中純化,,其通過添加的抑制劑穩(wěn)定,。首先用BaCl 2處理血漿以除去維生素K依賴性蛋白質(zhì),然后通過親和層析分離因子XI,。在肝素瓊脂糖凝膠上的終色譜步驟產(chǎn)生完整因子XI的均勻制備,。成品以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應(yīng),,應(yīng)儲存在-20oC。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子XI,,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),,磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),,谷氨酸脫氫酶(51 kDa),,酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),,肌紅蛋白紅(19 kDa),,溶菌酶(14 kDa的)

特別說明

由于存在高達(dá)50%的β形式,重鏈?zhǔn)请p重鏈,。α-Xa向β-Xa的轉(zhuǎn)化通過α-Xa對α-Xa的自動切割發(fā)生,,導(dǎo)致COOH末端肽的喪失。

 

 

本土化

等離子體; 與高分子量激肽原相關(guān)

血漿濃度

2-7μg/ ml(2,3,7,8)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子XIa的前體

分子量

160,000(人類)(2,3)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,,280納米

 

= 13.4(人類)(2)

 

等電點(diǎn)

8.9-9.1

結(jié)構(gòu)體

同二聚體由兩個明顯相同的亞基(Mr~80,000)組成,,由二硫鍵連接在一起。單體含有四個串聯(lián)氨基酸重復(fù)序列,,與血漿前激肽釋放酶具有同源性(9),。

碳水化合物百分比

5%(人)(2)

  1. Thompson,RE,,et al,。,J.Clin,。Invest,。,60,1376(1977),。
  2. Kurachi,,K。和Davie,,EW,,Biochemistry,16,5831(1977),。
  3. Bouma,,BN和Griffen,JH,,J.Biol,。Chem。,,252,6432(1977),。
  4. Rosenthal,,RL,et al,。,Proc,。SOC,。進(jìn)出口。生物學(xué),。Med,。,82,171(1953),。
  5. Forbes,,CD和Ratnoff,J.,,J,。Lab。臨床,。Med,。,79,113(1972),。
  6. Kurachi,,K。和Davie,,EV,,Methods Enzymol。,,80,211(1981),。
  7. Wuepper,KD,,美聯(lián)儲,。Proc。,,31,624(1972),。
  8. Saito,H,。和Goldsmith,,G.,Blood,,50,377(1977),。
  9. Fujikawa,,K。等,,Biochemistry,,25,2417(1986)。

 

 

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