myPOLS Biotec正在開發(fā)新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的應用,，例如個性化醫(yī)療，病原體檢測,，DNA和RNA診斷,，法醫(yī)學等等。

我們的研發(fā)活動包括：

• 改進的DNA聚合酶用于SNP檢測和甲基化特異性PCR,。
• 病原體檢測分析,，例如用于流感和諾如病毒診斷。
• 具有逆轉錄酶活性的熱穩(wěn)定DNA聚合酶,。
• 抑制劑抗性聚合酶,，用于從樣品中直接PCR，如全血,，唾液,，細菌，細胞 - 顆粒,，植物等,。 

后但并非不重要：我們所有的酶和混合物都是在康斯坦茨內部生產(chǎn)的，并經(jīng)過常規(guī)測試,，符合高質量標準,。

myPOLS Biotec是一家來自康斯坦茨大學的生物技術公司，來自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們在高通量DNA聚合酶設計方面的專業(yè)知識,，我們?yōu)槟膽枚ㄖ泼浮?/span>

RRNA / RT-PCR

Volcano2G DNA聚合酶

是原始Volcano DNA聚合酶的下一代,，具有進一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種工程化的,，極其熱穩(wěn)定的逆轉錄酶和組合的DNA聚合酶,，通過定向的人工進化獲得。
Volcano2G DNA聚合酶直接從RNA模板促進“零步驟”RT-PCR（沒有等溫逆轉錄步驟）,，因為在循環(huán)PCR延伸步驟期間逆轉錄與DNA擴增同時發(fā)生,。這也允許在高溫下進行逆轉錄反應，從而小化在高溫下熔化的RNA中的強二級結構遇到的問題,。

更簡單，更快捷：0步RT-PCR協(xié)議：

跳過逆轉錄步驟,。不需要等溫反轉錄步驟,。 

Volcano2G是一種PCR活性逆轉錄酶，具有*的熱穩(wěn)定性,，在95°C的半衰期> 40 min,。

當添加實時PCR染料時，Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR,。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結構域,，因此也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,，通過使用基于探針的qPCR測定和零步驟RT-PCR方案,，使用10倍稀釋系列的總RNA檢測NONO mRNA：

詳細的產(chǎn)品說明

Volcano2G 5x反應緩沖液針對擴增子大小在60-300bp之間進行了優(yōu)化。

當添加合適的實時PCR染料或熒光探針時,，Volcano2G逆轉錄酶也可用于實時PCR,。
這種*的酶能夠進行基于PCR的RNA檢測，無需單獨的逆轉錄步驟,。
Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地檢測≥1ng總RNA輸入的RNA靶標。

Volcano2G DNA聚合酶不需要Mn 2+  以獲得宜活性,。然而,，通過向反應中添加Mn 2+可以進一步優(yōu)化一些測定（建議的范圍是0.5-1mM，未提供Mn 2+）,。

質量控制

RT-PCR活性：測試Volcano2G DNA聚合酶活性的成功RT-PCR性能,。在PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物擴增151bp片段（HPRT1 mRNA），并將其顯示為單一擴增產(chǎn)物,。
DNA聚合酶活性：已經(jīng)使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測Volcano2G聚合酶活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性,。
通過蛋白質特異性染色確定酶濃度,。有關批次特定濃度，請通過[email protected]查詢更多信息,。

存儲

本產(chǎn)品采用冷藏包裝,。請在抵達-20°C時存放產(chǎn)品。

應用

• 快速檢測和鑒定RNA靶標
• 逆轉錄PCR（RT-PCR）
• 實時RT-PCR
• SELEX
• 入門擴展

反應設置

將所有組件保存在冰上,。
在使用前仔細旋轉并混合所有溶液,。

*推薦的終模板濃度在5-50 ng /μl之間。 

典型的0步RT-PCR方案（不需要等溫逆轉錄步驟）

可以使用兩步法和三步法PCR方案,。
*通過運行溫度梯度來理想地建立新的PCR,，以便找到每個引物對的宜退火/延伸溫度。引物的退火溫度受其核酸序列和反應緩沖液組成（鹽和pH）的強烈影響,。Volcano2G DNA聚合酶在50-95°C之間活躍,。

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