CompTech MCAR 說明書

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上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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上海起發(fā)為complementtech一級經(jīng)銷商,，Complement Technology,，Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research Technologies。Complement Technology繼續(xù)為世界各地的科學家提供高質(zhì)量的試劑,，并在我們的清單中增加了許多新試劑,。我們盡力為您的應用提供宜試劑和使用我們補充試劑的適建議。

CompTech MCAR 說明書

名稱： MCAR（Mouse Complement Assay Reagent）

目錄編號： B250

可用尺寸： 1.0 mL

濃度： > 0.4 mg / mL

形式： 冷凍溶液

緩沖區(qū)： VBS

防腐劑： 0.025％sodium azide

存儲： -70 ^Ò C或以下,。

來源： 兔子

產(chǎn)地： 在美國制造,。

一般描述

小鼠補體很難分析。小鼠血清迅速喪失其活性，小鼠血清的典型滴度遠低于人血清中發(fā)現(xiàn)的150-200 CH50單位/ mL,。小鼠品系的補體CH50滴度差異很大（參考文獻1,2和3）,，許多常見的小鼠品系在遺傳上缺乏C5（參考文獻4和5），這意味著它們即使具有*功能性的補體也不能溶解細胞,。系統(tǒng),。 C5足夠菌株中低滴度的確切原因尚不*清楚，并且它們對于不同的小鼠品系可能是不同的,。然而,，常見的原因是小鼠經(jīng)典途徑組分未被與EA結(jié)合的標準抗體有效激活。在Complement Technology,，Inc,。，我們開發(fā)了一種*的溶血試劑（MCAR =小鼠補體分析試劑）,，可以使綿羊紅細胞敏感,，從而提供改善的小鼠CH50滴度。例如,，市售的小鼠補體在下述測定系統(tǒng)中表現(xiàn)出僅約12單位/ mL的CH50,，然而，在MCAR存在的情況下,，CH50是217.這是MCAR補體效價的18倍,。這在數(shù)值上與正常人血清CH50相當，但是測定是不同的,。目前我們不能說這種試劑可以使用多少小鼠品系，但是我們已經(jīng)使用了3個MCAR,，并且它對所有人都起到了同樣的作用,。

小鼠血清在小鼠體外也極不穩(wěn)定。我們已經(jīng)（如果在4左100％的損失解凍后觀察到活性的快速損失^ö ℃過夜）,。因此,，我們建議快速解凍NMS并立即在分析中使用它，或者是否需要等分和冷凍NMS,。應在水浴中快速解凍,，解凍后立即移至濕冰中，等分并盡快重新冷凍,。使用時,，僅在實驗裝置準備好NMS樣品時解凍，并在解凍后將其保持在濕冰上,。

測定

在補體測定中,，即使來自相同的小鼠品系，每批小鼠補體也將具有不同的滴度,。需要進行初步測定以確定要使用的正確NMS量,。如果MCAR增強裂解,，正常致敏綿羊細胞（EA）效果很好,。大多數(shù)NMS樣品通常含有大量血紅蛋白,，因此使用的血清越多，背景越高,。樣品測定方案顯示在下表中,，其中總測定體積在100uL /測定下保持小,。通常，管應在室溫下設置緩沖液和MCAR,。然后加入EA,，混合并在室溫下溫育5分鐘。在室溫下將MCAR與EA細胞孵育5分鐘或更長時間后,，加入NMS以開始測定,。管應該被混合，并轉(zhuǎn)移到一個37 ^ö ℃水浴用于與通過偶爾（每5-10分鐘）再懸浮30分鐘渦旋,。

需要注意的一點是,，在將EA與MCAR混合后不要將EA離心，并且不要制備EA和MCAR的主混合物,，然后移液到管中,。這些程序?qū)е虏灰恢碌慕Y(jié)果。

在37 30分鐘后^Ó C中,，測定法是用200稀釋微升冷GVBE,，通過混合，渦旋,，離心以沉淀未裂解的細胞和200 微升的上清液應轉(zhuǎn)移到一個平底微量和吸光度在415nm讀,。或者，可以使用微量比色皿和分光光度計,。

EA 在GVB ++中以5×10 ⁸ / ml使用,，所有稀釋在GVB ++緩沖液中進行。

Protocol for Titering Normal Mouser Serum and MCAR

Mix &

Spin

5 min

Mouse

30 min

Cold

A415

Lysis

GVB++

H2O

GVBE

MCAR

21oC

Serum

Mix

@ 37

GVBE

70 uL

10 uL

10uL

10 uL

200 uL

70 uL

10 uL

10uL

10 uL

200 uL

90 uL

10uL

200 uL

90 uL

10uL

200 uL

80 uL

10uL

10 uL

200 uL

80 uL

10uL

10 uL

200 uL

85 uL

0 uL

10uL

5 uL

200 uL

80 uL

0 uL

10uL

10 uL

200 uL

70 uL

0 uL

10uL

20 uL

200 uL

60 uL

0 uL

10uL

30 uL

200 uL

80 uL

5 uL

10uL

5 uL

200 uL

75 uL

5 uL

10uL

10 uL

200 uL

65 uL

5 uL

10uL

20 uL

200 uL

55 uL

5 uL

10uL

30 uL

200 uL

75 uL

10 uL

10uL

5 uL

200 uL

70 uL

10 uL

10uL

10 uL

200 uL

60 uL

10 uL

10uL

20 uL

200 uL

50 uL

10 uL

10uL

30 uL

200 uL

70 uL

15 uL

10uL

5 uL

200 uL

65 uL

15 uL

10uL

10 uL

200 uL

55 uL

15 uL

10uL

20 uL

200 uL

45 uL

15 uL

10uL

30 uL

200 uL

80 uL

10 uL

10uL

200 uL

80 uL

10 uL

10uL

200 uL

通過從每個實驗測定的A415值（例如＃7-22）中減去背景A415值（＃1和2的平均值）并除以大裂解（＃5和6的平均值）減去％Lysis,。背景,，然后乘以100。

參考

1. 具有典型哺乳動物補體活性水平的Ong GL和Mattes MJ小鼠品系,。J Immunol Methods 125：147-158,1989,。

2. van Dijk，H,。等人,。利用致敏兔紅細胞估計小鼠補體活性的經(jīng)典途徑。J Immunol Methods 39：257-268,1980。

3. 特里WD等人,。近交系小鼠血清補體活性的差異,。 J Immunol。92：576-578,1964,。

4. Nilsson UR和Muller-Eberhard,，HJ缺乏繼承補體缺陷的小鼠的第五組分。J Exp,。醫(yī)學,。124：1-16,1967。

5. Wetsel,，RA等人,。小鼠第五補體成分（C5）的缺乏。5'-外顯子中的2堿基對基因缺失,。J. Biol,。化學,。265：2435-2440,1990,。

僅供研究使用。

不適合人類或藥物使用,。

complementtech產(chǎn)品目錄：

貨號	品名	規(guī)格	目錄價	品牌
A098	C1	200µg	3400	complementtech
A099	C1q	1000µg	3162	complementtech
A100	C1q (40% Glycerol)	1000µg	3162	complementtech
A102	C1r Enzyme	250µg	3417	complementtech
A103	C1s Proenzyme	250µg	3366	complementtech
A104	C1s Enzyme	250µg	3281	complementtech
A140	C1 Esterase Inhibitor	1000µg	3468	complementtech
A112	C2	50µg	3298	complementtech
A113	C3	250µg	2482	complementtech
A113c	C3 (concentrated)	1000µg	7327	complementtech
A118	C3a	50µg	3162	complementtech
A119	C3a desArg	50µg	3043	complementtech
A114	C3b	250µg	3094	complementtech
A115	iC3b	250µg	3417	complementtech
A116	C3c	250µg	3706	complementtech
A117	C3d	100µg	3825	complementtech
A105	C4	250µg	3468	complementtech
A105c	C4 (concentrated)	1000µg	8245	complementtech
A106	C4a	50µg	4114	complementtech
A107	C4a desArg	50µg	4114	complementtech
A108	C4b	250µg	2992	complementtech
A109	C4b Binding Protein	250µg	4131	complementtech
A120	C5	250µg	3570	complementtech
A144	C	30µg	6188	complementtech
A144(300)	C	300µg	詢價	complementtech
A145	C desArg	50µg	4301	complementtech
A122	C5b,6	50µg	3468	complementtech
A123	C6	250µg	3366	complementtech
A124	C7	250µg	3366	complementtech
A125	C8	250µg	3536	complementtech
A126	C9	250µg	3366	complementtech
A127	SC5b-9 Complex	100µg	2992	complementtech
A135	Factor B	250µg	3213	complementtech
A136	Factor D	25µg	3417	complementtech
A137	Factor H	250µg	2958	complementtech
A137c	Factor H (conc.)	10000µg	詢價	complementtech
A138	Factor I	100µg	3366	complementtech
A139	Factor P	100µg	3468	complementtech
A150	Cobra Venom Factor (USA ONLY)	1000µg	3298	complementtech
A154	Factor Ba	100µg	3298	complementtech
A155	Factor Bb	250µg	6188	complementtech
A118	C3a	50µg	3162	complementtech
A119	C3a desArg	50µg	3043	complementtech
A106	C4a	50µg	4114	complementtech
A107	C4a desArg	50µg	4114	complementtech
A144	C	30µg	6188	complementtech
A144(300)	C	300µg	詢價	complementtech
A145	C desArg	50µg	4301	complementtech
A300	C1q-Dpl	1ml	2074	complementtech
A312	C2-Dpl	1ml	2074	complementtech
A314	C3-Dpl	1ml	2482	complementtech
A305	C4-Deficient Guinea Pig	1ml	2448	complementtech
A308	C4-Dpl	1ml	2482	complementtech
A320	C5-Dpl	1ml	2125	complementtech
A323	C6-Dpl	1ml	2040	complementtech
A324	C7-Dpl	1ml	2074	complementtech
A325	C8-Dpl	1ml	2074	complementtech
A326	C9-Dpl	1ml	2074	complementtech
A335	Factor B-Dpl	1ml	2074	complementtech
A336	Factor D-Dpl	1ml	2074	complementtech
A337	Factor H-Dpl	1ml	2686	complementtech
A338	Factor I-Dpl	1ml	2482	complementtech
A339	Factor P-Dpl	1ml	2482	complementtech
A340	C3/C4 Inactivated Serum	1ml	2074	complementtech
A399	C1q/Factor D-Dpl	1ml	2856	complementtech
A200	Goat Anti-Human C1q	1ml	1054	complementtech
A212	Goat Anti-Human C2	1ml	2329	complementtech
A213	Goat Anti-Human C3	1ml	1054	complementtech
A218	Rabbit Anti-Human C3a	1ml	2550	complementtech
A205	Goat Anti-Human C4	1ml	1054	complementtech
A206	Rabbit Anti-Human C4a	1ml	2550	complementtech
A220	Goat Anti-Human C5	1ml	1275	complementtech
A221	Rabbit Anti-Human rC	1ml	2550	complementtech
A223	Goat Anti-Human C6	1ml	1275	complementtech
A224	Goat Anti-Human C7	1ml	1275	complementtech
A225	Goat Anti-Human C8	1ml	1275	complementtech
A226	Goat Anti-Human C9	1ml	1275	complementtech
A227	Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)	0.2ml	2584	complementtech
A235	Goat Anti-Human Factor B	1ml	1275	complementtech
A236	Goat Anti-Human Factor D	1ml	2499	complementtech
A237	Goat Anti-Human Factor H	1ml	1275	complementtech
A238	Goat Anti-Human Factor I	1ml	1309	complementtech
A239	Goat Anti-Human Factor P	1ml	1462	complementtech
A240	Goat Anti-Human C1-INH	1ml	1173	complementtech
A260	Rabbit Anti-Human Vitronectin	1ml	1445	complementtech
NHS	Human Serum	1ml	578	complementtech
GPS	Guinea Pig Serum	1ml	714	complementtech
NRS	Rat Serum	1ml	901	complementtech
NMS	Mouse Serum	1ml	1309	complementtech
B102	GVB++ (with Ca and Mg)	250ml	1224	complementtech
B100	GVB++ (with Ca and Mg)	1 Liter	3264	complementtech
B103	GVB° (without Ca and Mg)	250ml	1224	complementtech
B101	GVB° (without Ca and Mg)	1 Liter	3264	complementtech
B104	GVBE (with EDTA)	250ml	1224	complementtech
B105	GVBE (with EDTA)	1 Liter	3264	complementtech
B110	SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)	250ml	1870	complementtech
B111	SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)	1 Liter	5066	complementtech
B112	VBS++ (with Ca and Mg)	250ml	1224	complementtech
B113	VBS++ (with Ca and Mg)	1 Liter	3264	complementtech
B200	EA (Ab-sensitized sheep E)	5ml @ 5x10⁸/ml	3043	complementtech
B201	EA (Ab-sensitized sheep E)	10ml @ 5x10⁸/ml	4556	complementtech
B202	EA (Ab-sensitized sheep E)	20ml @ 5x10⁸/ml	6324	complementtech
B210	Es (sheep E)	20ml @ 5x10⁸/ml	2652	complementtech
B300	Er (rabbit E)	5ml @ 5x10⁸/ml	1649	complementtech
B301	Er (rabbit E)	10ml @ 5x10⁸/ml	2652	complementtech
B302	Er (rabbit E)	20ml @ 5x10⁸/ml	3893	complementtech
B400	Zymosan (preactivated)	10ml @ 1x10⁹/ml	2261	complementtech
B106	MgEGTA	10ml @ 0.1M	1139	complementtech
B250	MCAR	1.0 ml	2482	complementtech
Hemolysin	Hemolysin NEW	2.0 ml	2040	complementtech

上海起發(fā)實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

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