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當(dāng)前位置:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>aatbio AAT-21055說明書
Fura-8™, AM
產(chǎn)品概述
分子量 951.90 | 解離常數(shù)(Kd, nM) 260 | 激發(fā)(納米) 354 | 發(fā)射(納米) 524 |
盡管Fura-2已成為shou選的激發(fā)比鈣指示劑,,但它具有一定的局限性(例如,靈敏度低于單波長鈣指示劑,,如Fluo-8®和Cal-520®),。為了解決這些問題,亞洲空運(yùn)中心Bioquest投入了大量精力開發(fā)Fura™ 8,,這是一種高親和力比例鈣指示劑,,具有更高的靈敏度和更高的信噪比。Fura 8的熒光發(fā)射紅移到更長的可見光波長,,便于通過普通濾光片組檢測Fura™™ 8,。Fura™ 8,AM是膜通透性的,,在355nm和415nm處激發(fā),,在530nm處發(fā)射。
熒光顯微鏡
興奮 呋喃 2 過濾器套件
排放 呋喃 2 過濾器套件
推薦板 黑色墻壁/透明底部
熒光酶標(biāo)儀
興奮 355, 415
排放 530
近路 475
推薦板 黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格 底部讀取模式/可編程液體處理
儲備溶液的制備
除非另有說明,,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán),。
呋喃-8™ AM 儲備液
在高質(zhì)量無水DMSO中制備2至5 mM的Fura-8™ AM儲備溶液,。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南,,應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改,。在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞過夜。
第二天,,將1X Fura-8™ AM工作溶液添加到細(xì)胞板中,。
注意如果您的化合物干擾血清,,請?jiān)谏蠘尤玖现坝眯迈r的 HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基。
將裝載染料的板在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30至60分鐘,。
注意孵育染料超過 1 小時(shí)可以改善某些細(xì)胞系的信號強(qiáng)度,。
用您選擇的HHBS或緩沖液(含有陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑,如1 mM丙磺舒,,如果適用)替換染料工作溶液,,以去除任何多余的探針。
根據(jù)需要添加興奮ji,,并使用配備Fura 2濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)(如FlexStation)的熒光板讀數(shù)器在Ex/Em下同時(shí)測量熒光1= 355/530 nm 截止值 475 nm 和防爆/電磁2= 415/530 nm 截止值 475 nm,。
產(chǎn)品詳情
名稱 Fura-8™, AM
編號 AAT-21055
品牌 aatbio
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請輸驗(yàn)證碼
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