Elastase - Manual

歷史

Eijkman被認(rèn)為是第一個(gè)研究彈性蛋白酶作為細(xì)菌產(chǎn)物的人（Eijkman 1904）,。然而,，直到1949年Baló和Banga發(fā)表,，它才被證明與胰腺的其他蛋白水解成分（如胰蛋白酶和糜蛋白酶）不同,。

1968年,，肖頓和哈特利是第一個(gè)獲得結(jié)晶豬彈性蛋白酶的人,。在1960年代末和1970年代初,，研究了彈性蛋白酶在肺氣腫，動(dòng)脈粥樣硬化和急性出血性胰腺炎中的參與（Janoff和Sherer 1968,，Janoff和Basch 1971,，Talamo等人1971，Kaplan等人1973年和Bieth等人1974）,。1974年,，Ardelt發(fā)現(xiàn)了第二種彈性分解蛋白酶，將其命名為胰腺“彈性蛋白酶II"和原始的“彈性蛋白酶I",。

在20世紀(jì)80年代,，研究了彈性蛋白酶的催化性質(zhì)（Ascenzi等人，1983年）,，并鑒定了抑制劑（Largman等人,，1980年，Lestienne等人,，1981年,，凱特納和申維1984年，Poncz等人1984年,，帝國和阿貝爾斯1986年）,。1990年代對(duì)彈性蛋白酶I和II遺傳信息進(jìn)行了研究（Ornitz等人，1985年,，史蒂文森等人1986年,，斯威夫特等人1984年，塔尼等人1987年和蓋斯汀等人1997年）,。

彈性蛋白酶最近已用于研究細(xì)胞外基質(zhì)分解中的機(jī)械力和酶活性（Jesudason等人,，2010）。它還研究了它在人工器官發(fā)育中的應(yīng)用（Tedder等人,，2010）,，并被用作研究絲氨酸蛋白酶催化活性的模型（Tamada等人，2009）,。

概述

國際單位： 3.4.21.36

豬胰彈性蛋白酶的分子量為25.9 kDa,，pH值為8.5。雖然彈性蛋白酶將水解各種蛋白質(zhì)底物,，但它在蛋白酶中的特別之處在于其水解天然彈性蛋白的能力,，彈性蛋白酶是一種不受胰蛋白酶，糜蛋白酶或胃蛋白酶攻擊的底物。大豆胰蛋白酶抑制劑和激肽釋放酶抑制劑抑制蛋白水解物,，但不抑制彈性水解活性,。彈性蛋白酶是使用改編自范斯坦等人生物化學(xué)的方法測定的。生物物理學(xué),。Res. Comm.,， 50， 1020 （1973） 和使用 Bieth 等人的更可溶性底物,， 生物化學(xué)醫(yī)學(xué),， 11,， 350 （1974）.

穩(wěn)定性/儲(chǔ)存性：彈性蛋白酶在pH≤3.5時(shí)不穩(wěn)定,。當(dāng)作為干粉儲(chǔ)存時(shí)，酶在2-8°C下穩(wěn)定6-12個(gè)月,。 彈性蛋白酶產(chǎn)品代碼：ES和ESL在中性pH和濃度大于0.25%時(shí)溶解度較差,。在稀釋到反應(yīng)混合物或介質(zhì)中之前，在KCl或堿性緩沖液中制備初級(jí)溶液是有幫助的,，以補(bǔ)償離子強(qiáng)度或pH值的變化,。在pH 4.0-10.4下穩(wěn)定。

技術(shù)說明：1個(gè)SucAla3NA單位大約相當(dāng)于6個(gè)彈性蛋白消化單位,。水性液體懸浮液應(yīng)無菌處理,，以避免細(xì)菌污染。由于水懸浮液（代碼：ES）的粘性,，應(yīng)沖洗小瓶以回收內(nèi)容物,。

特異性

豬彈性蛋白酶I對(duì)Ala-Ala和Ala-Gly鍵具有特異性，而彈性蛋白酶II對(duì)P1位置的中到大型疏水性氨基酸的底物具有廣泛的特異性（Gertler等人,，1977年,，Del Mar等人，1980年和Gestin等人,，1997年）,。豬彈性蛋白酶是有效的彈性蛋白酶，其速率比人類白細(xì)胞彈性蛋白酶高20倍（Bieth 1978,，Bieth 1986和Largman 1983）,。

水解分幾個(gè)步驟發(fā)生。彈性蛋白酶與其底物之間形成吸附復(fù)合物,，隨后形成親核攻擊（S214）以形成?；o酶中間體，并釋放出第一產(chǎn)物（底物的C端）,。中間體在脫?；襟E中水解，再生活性酶并釋放第二種產(chǎn)物（Bieth 1986）。

組成

催化三元組由三個(gè)氫鍵氨基酸殘基（H71,，D119和S214）形成。多肽鏈由兩個(gè)反平行的β-桶結(jié)構(gòu)域組成,，它們形成含有催化三元組的裂縫和一小部分α-螺旋（Bieth 2004）,。

分子特性

豬胰彈性蛋白酶由240個(gè)氨基酸的單肽鏈組成，并含有4個(gè)二硫橋（Sawyer等人,，1973）,。它與來自其他物種的胰腺彈性蛋白酶具有高度的序列同一性，例如與它共享86%身份的大鼠（MacDonald等人,，1982）,。彈性蛋白酶I和II基因共享序列相似性，特別是在5'近端側(cè)翼區(qū)域,，其中包括TATA盒和推定的組織特異性增強(qiáng)子序列（Ornitz等人1985年,，史蒂文森等人1986年，Swift等人1984年,，塔尼等人1987年和Gestin等人1997年）,。

應(yīng)用

組織解離：由于彈性蛋白在結(jié)締組織的彈性纖維中含量高，因此彈性蛋白酶經(jīng)常用于解離含有廣泛細(xì)胞間纖維網(wǎng)絡(luò)的組織,。為此,，它通常與其他酶一起使用，例如膠原酶,，胰蛋白酶和糜蛋白酶,。

膜蛋白增溶

蛋白質(zhì)序列研究

產(chǎn)品詳情

名稱    Elastase - Manual

編號(hào)    LS002292

品牌    Worthington