nanohelix 直接 qPCR 試劑盒說明書

直接 qPCR 試劑盒 [綠色]

產(chǎn)品

Direct qPCR Kit [Green] 設(shè)計用于直接從動物組織,、植物組織和各種臨床樣本（包括全血,、血清、尿液,、頭發(fā)和拭子收集物）中進行基于嵌入染料的 qPCR 擴增,，無需任何 DNA 純化過程。2x Direct qPCR Premix [Green]包含抗體抑制的Taq DNA 聚合酶,、dNTP,、MgCl ₂、SYBR Green,、穩(wěn)定劑和*的緩沖系統(tǒng),，可抵抗組織樣本中的各種 PCR 抑制劑,。

應(yīng)用 

• 直接和定量實時 PCR 

^{圖 1. 使用 RealHelix TM}  Direct qPCR Kit [綠色] 從血液樣本中進行實時 PCR 。按照該試劑盒的方案制備全血裂解物,，并在該反應(yīng)中使用 1 μl 裂解物作為模板,，其中含有嵌入染料 SYBR Green l。十 (10) ng 人類基因組 DNA 用于實時 PCR 儀器 Bio-Rad CFX96 上的對照反應(yīng),。顯示了擴增曲線（上圖）和熔解分析結(jié)果（下圖）,。NTC，無模板控制,。每個反應(yīng)重復(fù),。

^{圖 2. 使用 RealHelix TM}  Direct qPCR Kit [綠色] 對 lambda DNA 加標(biāo)血清樣本進行實時 PCR 。按照該試劑盒的方案制備來自 λ DNA 加標(biāo)血清的裂解物,。在實時 PCR 儀器 Bio-Rad CFX96 上用 λ DNA 特異性引物組和嵌入染料 SYBR Green I 分析 1 μl 制備的裂解物（測試樣品）和 1 pg λ DNA（陽性對照）,。顯示了擴增曲線（上圖）和熔解分析結(jié)果（下圖）。NTC,，無模板控制,。每個反應(yīng)重復(fù)。  

圖 3. 使用 Direct qPCR Kit [綠色] 從尿液樣本中進行實時 PCR,。按照該試劑盒的方案,，通過離心和 PBS 洗滌從 1 ml 尿液中獲得細(xì)胞沉淀用于制備裂解物。用人 β-珠蛋白基因特異性引物組和嵌入染料 SYBR Green l 分析 1 μl 制備的裂解物（測試樣品）和 10 ng 人基因組 DNA（陽性對照）,。直接 qPCR 在實時 PCR 儀器 Bio-Rad CFX96 上進行,。顯示了擴增曲線（上圖）和熔解分析結(jié)果（下圖）。NTC,，無模板控制,。每個反應(yīng)重復(fù)。

^{圖 4. 使用 RealHelix TM}  Direct qPCR Kit [綠色] 從口腔拭子樣本中進行實時 PCR ,。裂解物是按照該試劑盒的方案從通過口腔拭子收集的組織樣本制備的,。1 μl 制備的裂解物（測試樣品）和 10 ng 人基因組 DNA（陽性對照）在實時 PCR 儀器 Bio -Rad CFX96。顯示了擴增曲線（上圖）和熔解分析結(jié)果（下圖）,。NTC,，無模板控制。每個反應(yīng)重復(fù),。 

^{圖 5. 使用 RealHelix TM}  Direct qPCR Kit [綠色] 對小鼠尾部樣本進行實時 PCR ,。按照該試劑盒的方案，使用 1 mm 大小的小鼠尾部切口制備裂解物,。使用小鼠sox21 基因特異性引物組和嵌入染料 SYBR Green l 在實時 PCR 儀器 Bio-Rad 上分析 1 μl 制備的裂解物（測試樣品）和 10 ng 小鼠基因組 DNA（陽性對照）CFX96,。顯示了擴增曲線（上圖）和熔解分析結(jié)果（下圖）。每個反應(yīng)重復(fù),。