zymoresearch D4004說明書

DNA Clean & Concentrator-5

亮點(diǎn)

清潔并濃縮高達(dá)5微克的DNA≥ 用0µl洗滌殘渣在2分鐘內(nèi)洗脫6µl,。

柱設(shè)計允許DNA以高濃度洗脫到最小體積的水或TE緩沖液中。

洗脫DNA非常適合用于PCR,、DNA測序、DNA連接,、核酸內(nèi)切酶消化,、RNA轉(zhuǎn)錄、放射性標(biāo)記,、陣列等,。

描述

DNA Clean&Concentrator-5是一種PCR純化試劑盒，可從PCR、核酸內(nèi)切酶消化,、DNA修飾反應(yīng),、同位素/熒光標(biāo)記反應(yīng)等中純化高達(dá)5µg的DNA。該產(chǎn)品有助于去除DNA聚合酶,、修飾酶,、RNA聚合酶、連接酶,、激酶,、核酸酶、磷酸酶,、,，和限制性內(nèi)切酶，以及游離dNTPs及其類似物,，包括放射性標(biāo)記和熒光衍生物,。洗脫DNA適用于PCR、陣列,、連接,、測序等。

耐洗滌劑性≤5%Triton X-100,，≤5%吐溫-20,，≤5%沙可西，≤0.1%十二烷基硫酸鈉

洗脫體積≥ 6微升

設(shè)備微量離心機(jī)

純度A260/A280>1.8

來自PCR,、核酸內(nèi)切酶消化,、DNA修飾反應(yīng)、同位素/熒光標(biāo)記反應(yīng)等的樣本源DNA,。

大小范圍為50 bp至23 kb

產(chǎn)量≤ 可回收5微克總DNA,。對于50bp至10kb的DNA，回收率為70-95%,。對于11kb到23kb的DNA,，回收率為50-70%。

問題1：有上限和無上限有什么區(qū)別,？

區(qū)別是帽子,。列之間的所有其他內(nèi)容（最大容量、列矩陣等）都是相同的,。不確定使用哪一個,？這主要取決于偏好。有些人喜歡有蓋的色譜柱,，以便于標(biāo)記或增加安全性,，而另一些人喜歡無蓋色譜柱,，以加快樣品處理。

問題2：DNA樣本的最小輸入量是多少,？

使用低于50µl的體積可能會導(dǎo)致回收率降低,。Zymo研究建議用水將起始體積提高到100µl，以確保最佳結(jié)合條件,。

問題3：可以重新加載多少次列,？

Zymo Research建議重新加載色譜柱不超過5次，因為綁定效率可能會降低,。

問題4：如果柱上裝載的DNA超過規(guī)定的最大結(jié)合容量,，會發(fā)生什么情況？

由于硅膠基質(zhì)堵塞,，色譜柱過飽和可能導(dǎo)致DNA總損失,。

問題5：如何處理儲存在DNA/RNA的裸DNA？

向樣品中加入等量的乙醇（95-100%）,，并充分混合,。樣品已準(zhǔn)備好結(jié)合，不需要DNA結(jié)合緩沖液,。繼續(xù)執(zhí)行步驟2,。

問題6：可以回收的DNA的下限和最小量是多少？

皮克級的DNA可以恢復(fù),。該限制基于檢測方法的靈敏度,。

問題7：如果在開始之前沒有向DNA清洗緩沖液中添加乙醇，我該怎么辦,？

在清洗步驟中,，DNA將從柱上洗脫。使用適當(dāng)量的DNA結(jié)合緩沖液重新綁定樣本,，并使用適當(dāng)制備的洗滌緩沖液清洗柱,。