IUB:3.1.21.1
牛胰腺脫氧核糖核酸酶是一種核酸內(nèi)切酶,,它分裂磷酸二酯鍵,優(yōu)先與嘧啶核苷酸相鄰,,產(chǎn)生在 3' 位置具有游離羥基和在 5' 位置具有磷酸基團的多核苷酸,。限制消化的平均鏈長是四核苷酸。
用途:Worthington 為不同的應(yīng)用提供不同純度水平的 DNase,。產(chǎn)品代碼:DPRF 和 DPRFS 均專為分子生物學(xué)應(yīng)用而設(shè)計,,并且含有低水平的 RNase 和蛋白酶活性。它們都適用于需要消化 DNA 以回收完整 RNA 或必須保持結(jié)構(gòu)蛋白或酶完整性的技術(shù),。應(yīng)用包括切口平移,、DNA 作圖、核 RNA 和蛋白質(zhì)的分離,、質(zhì)粒構(gòu)建以及 RNA 探針和 RT-PCR 的 RNA 聚合酶合成,。DNase 還用于組織培養(yǎng)工作以消化受損細胞中的 DNA,從而降低粘度并去除膜結(jié)合的 DNA 片段,。沃辛頓代碼:DP 和 DCLS 適用于這些應(yīng)用,。
穩(wěn)定性/存儲:如果儲存得當,所有等級的 Worthington 脫氧核糖核酸酶都可以穩(wěn)定保存 2-3 年,。所有等級的 Worthington DNA 酶的推薦儲存溫度為 2-8°C,。產(chǎn)品代碼 DPRFS 可在 -20°C 下儲存。為了長期保存在溶液中,,產(chǎn)品代碼 D 和 DPFF 可以溶解在 5mM 醋酸鹽,、1mM 鈣、pH 4.5 中,,并以一次性等分試樣在 -20°C 或 -70°C 下保存長達一年,。只凍融一次;解凍的等分試樣可穩(wěn)定冷藏至少數(shù)周,。添加 50% 甘油將在 -20°C 下保持液態(tài)而不影響穩(wěn)定性,,并且可以將 50% 甘油中的材料去除并重復(fù)返回到 -20°C。由于不存在蛋白酶,,DPRF異常穩(wěn)定,。對于重組后的 DPRF 的長期儲存,使用水或任何 pH 值 4.0 至 9.0 的緩沖液(磷酸鹽除外),;避免鈣螯合劑,;添加 50% 甘油,在 -20°C 下以液體形式儲存,;分裝在一次性容器中,;只凍融一次,;解凍的等分試樣可穩(wěn)定冷藏至少數(shù)周。
單位定義:當作用于 pH 5.0 的高度聚合的 DNA 時,,1 個單位在 25°C 下導(dǎo)致 260nm 吸光度每分鐘每毫升增加 0.001。 注意:其他供應(yīng)商報告的 Kunitz 單位可能比在 Worthington 測量的 Kunitz 單位高 2 到 4 倍,。在 Worthington 測得,,一個 Kunitz 裝置在 37°C 的 50mM Tris、1mM Mg 2+,、1mM Ca 2+,、pH 7.8 的 50µl 反應(yīng)體系中在 10 分鐘內(nèi)消化 1µg 的 λ DNA。對于其他 DNA 和緩沖系統(tǒng),,消化單位與 Kunitz 單位的相關(guān)性是不同的,。
技術(shù)說明: 產(chǎn)品代碼 DPRF:每瓶每 10,000 單位 DNase I 含有大約 2mg 甘氨酸和 2µmoles 鈣。將整個小瓶溶解在 5ml 中相當于 1mg/ml 溶液,。
相關(guān)產(chǎn)品:
白蛋白,,無核酸酶 (BSANF)
脫氧核糖核酸酶 II (HDA/HDAC/HDACS)
E•RASE RNase A/T1 Blend (RCT)
組蛋白 (H, NHL)
溶菌酶 (LY/LYSF)
核酸酶,微球菌 (NFCP)
核酸酶,,S1 ( SINUC/SINUCL)
核酸,、DNA、大腸桿菌,、λ/片段,、RNA
磷酸酶、堿性 (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)
磷酸二酯酶 I (VPH)
磷酸二酯酶 II (SPH)
蛋白酶 K (PROK/PROKS)
反向轉(zhuǎn)錄酶,,重組 HIV (RTHIV)
核糖核酸酶 A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)
核糖核酸酶 T1,,無動物源 (RT1S)