價錢： 80.00 美元 貨號： ELSP-1

ELISA 蛋白提取、分離和溶解緩沖液

60 ml,、1X,、pH 7.4 溫和的去污劑蛋白質(zhì)提取緩沖液，可保持 ELISA 樣品分離所需的抗體-抗原相互作用,。從大多數(shù)細胞隔室中提取蛋白質(zhì),，包括用于 ELISA 樣品制備的膜、細胞質(zhì)和細胞器,。  

強調(diào)

• 用于 ELISA 樣品制備的經(jīng)過驗證的配方,。

• 廣泛適用于大多數(shù)用于 ELISA 樣品制備的細胞質(zhì)、跨膜和細胞外蛋白,。

• 方便的預(yù)混合 1X 溶液,。

• 與 Bradford 等蛋白質(zhì)濃度測定兼容。

  內(nèi)容                                                                                                                                       

1. 60 ml ELISA 蛋白提取緩沖液 pH 7.4
   

ELISA 蛋白提取緩沖液含有溫和的去污劑,，能夠溶解細胞膜,、溶解大多數(shù)膜蛋白并將胞質(zhì)蛋白懸浮到緩沖液中。 

  方案概述：ELISA 蛋白提取緩沖液                                                                      

1. 為每個 10 厘米培養(yǎng)皿準備 500 µl ELISA 蛋白提取緩沖液,，或為 6 孔培養(yǎng)皿中的每個孔準備 200 µl。使溶液冰冷并加入蛋白酶抑制劑,，包括絲氨酸蛋白酶抑制劑（如 PMSF）,。如果需要，還可以添加通用磷酸酶抑制劑,。
   

2. 取出培養(yǎng)基并用 PBS 沖洗細胞 3 次,。

3. 在每個 10 厘米的培養(yǎng)皿中加入 500 µl ELISA 蛋白提取緩沖液。旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿,，用 ELISA 蛋白提取緩沖液覆蓋細胞,，并在冰床上放置 5 分鐘。

4. 從培養(yǎng)皿上刮下細胞,，然后轉(zhuǎn)移到合適的管中,。旋轉(zhuǎn)并輕敲試管數(shù)次以溶解膜。您應(yīng)該觀察與基因組 DNA 相對應(yīng)的纖維材料,，這是細胞裂解的指標,。如果纖維材料不明顯，加入 20 µl ELISA 蛋白提取緩沖液等分試樣,，旋轉(zhuǎn)并輕敲直到觀察到纖維材料,。將管子在冰上再放置 15 分鐘,。 

5. 4 ^o C離心15 分鐘，收集上清液,，用于 ELISA 檢測,。蛋白質(zhì)濃度測定，例如 Bradford 測定,，可用于量化總蛋白質(zhì)濃度,。將上清液也可以被存儲在-80 ^? C長術(shù)語