使用直接檢測核苷酸和均質(zhì)熒光讀數(shù)的酶的通用,、高通量篩選分析,。

TRANSCREENER ADP 2檢測

TRANSCREENER AMP 2 /GMP 2檢測

TRANSCREENER GDP 分析

TRANSCREENER UDP 2檢測

透光機(jī) CGAMP 檢測

TRANSCREENER ADO CD73 檢測

對數(shù)以千計(jì)的目標(biāo)進(jìn)行分析。

Transcreener：它是如何工作的

Transcreener 是一種通用檢測方法,，可用于整個(gè)核苷酸依賴性酶家族,。與其對大量特定反應(yīng)產(chǎn)物（例如磷酸化蛋白質(zhì)或脂質(zhì)）使用單獨(dú)的測定法，不如對產(chǎn)生共同核苷酸產(chǎn)物的所有酶使用單核苷酸檢測測定法。例如,，ADP 檢測可用作任何蛋白質(zhì),、脂質(zhì)或碳水化合物激酶的通用激酶測定方法。

Transcreener 檢測依賴于使用能夠根據(jù)單個(gè)磷酸基團(tuán)區(qū)分核苷酸的抗體對核苷酸的直接,、高度特異性檢測,。產(chǎn)物核苷酸與底物（例如，ADP 與 ATP 用于激酶測定）的選擇性范圍從 150 倍到 1000 倍以上,。這種精確的選擇性允許在存在過量底物核苷酸的情況下檢測核苷酸酶產(chǎn)物（例如,，在存在過量 ATP 的情況下檢測 ADP 用于激酶測定），這是測量酶初始速度的必要條件,。

為了產(chǎn)生信號,，Transcreener Assays 使用同質(zhì)、競爭性免疫分析形式,，其中抗體與高親和力熒光示蹤劑配對,。被檢測的核苷酸取代示蹤劑會(huì)導(dǎo)致其熒光特性發(fā)生變化。FP 檢測是簡單的,；它只需要示蹤劑和未修飾的抗體,；極化的變化是由示蹤劑在移動(dòng)時(shí)增加的旋轉(zhuǎn)遷移率引起的,。對于 TR-FRET 和 FI 格式,，抗體與一種分子偶聯(lián)，該分子在結(jié)合時(shí)會(huì)改變示蹤熒光的強(qiáng)度,，而當(dāng)示蹤劑被置換時(shí),，這種效果就會(huì)消失。

Transcreener：為什么直接檢測更適合 HTS

與任何其他核苷酸檢測分析相比,，Transcreener 分析具有更少的試劑和更簡單的機(jī)制,，這通常需要偶聯(lián)酶將核苷酸轉(zhuǎn)化為可以與報(bào)告酶產(chǎn)生信號的產(chǎn)物。每個(gè)偶聯(lián)酶和報(bào)告酶都是被篩選化合物的潛在靶標(biāo),，這會(huì)增加假陽性或錯(cuò)過命中的風(fēng)險(xiǎn),，并且需要額外的孔進(jìn)行反篩選。（一些 ADP 檢測分析甚至使用激酶作為偶聯(lián)酶,，進(jìn)一步使它們用于激酶抑制劑篩選復(fù)雜化,。）

直接檢測還意味著該協(xié)議是簡單、最靈活的可用方案：運(yùn)行酶反應(yīng),，添加具有終止混合物的 Transcreener 試劑,，并讀取板?；蛘呖梢栽诿阜磻?yīng)開始時(shí)加入Transcreener檢測試劑,，持續(xù)監(jiān)測酶活性；例如，用于使用“跳躍稀釋"激酶測定測量抑制劑停留時(shí)間,。一些耦合方法需要額外的液體添加和孵育步驟,，這使化驗(yàn)自動(dòng)化變得復(fù)雜并妨礙它們以連續(xù)模式運(yùn)行。

使用生化分析測量藥物-靶標(biāo)停留時(shí)間的指南