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Lucerna, Inc. 是一家生物技術工具公司,專注于開發(fā)和商業(yè)化熒光適體 (Spinach™) 技術,其目的是:1.) 提供即插即用的 RNA 成像和檢測系統(tǒng)作為研究試劑,2.) 開發(fā)高- 通量篩選平臺,,以實現(xiàn)以前難以處理的目標的新藥物發(fā)現(xiàn),以及 3.) 開發(fā)用于工業(yè)生產(chǎn)應用的熒光傳感器,。
Lucerna 由康奈爾大學科學家創(chuàng)立,,他們是 Spinach™ 技術的發(fā)明者,并已發(fā)表了 20 多篇關于該技術的文章,。創(chuàng)始團隊在 RNA 生物學,、適體開發(fā)、化學生物學和熒光成像領域展示了專業(yè)知識,。此外,,Lucerna 科學家在 RNA 生物學,、熒光成像、高通量篩選和檢測開發(fā)方面擁有豐富的經(jīng)驗,。
Lucerna BI說明書
(Z)-3-((1H-benzo[d]imadazol-4-yl)methyl)-5-(3,5-difluoro-4-hydroxybenzlidene)-2-methyl-3,5-dihydro-4H-imidazol -4-一 (BI)
分子式:
C 19 H 14 F 2 N 4 O 2
分子量:
368.3
CAS 名稱/編號:
Broccoli TM /BI 在 pH 7.4 緩沖液中的吸收和熒光發(fā)射光譜,。
演示: 凍干染料
質(zhì)量保證:產(chǎn)品通過1 H NMR 和 LC-MS進行分析,, 并通過 HPLC 提供純度 >98%,。
使用聲明:本產(chǎn)品僅供研究使用,不得用于任何其他目的,,包括但不限于未經(jīng)授權的商業(yè)用途,、體外診斷用途、離體或體內(nèi)治療用途或任何類型的食用或應用于人類或動物,。由于熒光團和適體的高度特異性,,我們無法預測 Lucerna TM 產(chǎn)品在其客戶系統(tǒng)中的表現(xiàn),也無法對其負責,。使用 Lucerna TM 產(chǎn)品的研究人員應進行優(yōu)化研究,,以實現(xiàn)其預期應用的最佳結果。
圖 1.表達 β-肌動蛋白 mRNA 轉錄物的 COS7 細胞的活細胞成像,,在 3'UTR 中標記有 24 個 Broccoli TM拷貝,。將細胞與 0.5 µg/ml Hoechst 33342 染色劑(藍色)和 10 µM BI(綠色)一起孵育,并使用 500 毫秒曝光和 GFP 過濾器組獲取圖像,。僅當用 BI 處理表達西蘭花的細胞時才觀察到移動熒光點,。
圖 2.對于單分子成像,COS7 細胞用表達 mCherry-24xBroccoli TM轉錄物的構建體轉染,,并在 10 µM BI 存在下成像,。使用 TRITC 和 GFP 過濾器組獲取相同細胞的圖像以捕獲 mCherry 熒光(紅色)和 Broccoli TM(綠色)信號。在表達 mCherry 的細胞的細胞核和細胞質(zhì)中均檢測到移動熒光點,。
圖 3.使用表達A. MS2-GFP 系統(tǒng)和B. Broccoli TM -BI 系統(tǒng)的COS7 細胞對活的熒光 mRNA 點進行成像,。Broccoil 標記的 mRNA 的點大小與 MS 標記的 mRNA 的點大小相似。此外,,從兩個系統(tǒng)標記的 mRNA 的點強度表現(xiàn)出單一的高斯分布,,與這些點中的大多數(shù)反映單個 mRNA 轉錄本一致。比例尺均為 5 µm,。
熒光團促進的 RNA 折疊和光穩(wěn)定性使活哺乳動物細胞中單個西蘭花標記的 mRNA 成像成為可能,。Li X、Kim HY,、Litke JL、Wu JH,、Jaffrey SR,。 Angew Chem Int Ed . 2020 年 3 月 9 日,;59(11):4511-4518。
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