產(chǎn)品描述

PNGase F，肽N糖苷酶F,，N-糖苷酶,，N-糖苷酶

從含有Elizabethkingia miricola基因克隆的大腸桿菌菌株中分離重組PNGaseF,。與天然酶（E-PNG01）相比,，重組酶的活性或比活性沒有可檢測的差異,。

PNGase F從糖蛋白上裂解天冬酰胺連接的（N連接的）寡糖。PNGase F將天冬酰胺脫氨為天冬氨酸,，使寡糖保持完整,。變性可將裂解速率提高至100倍,。大多數(shù)天然蛋白質(zhì)仍然可以*被N-去糖基化,，但是必須增加孵育時間。PNGase F在孵育條件下將保持活性至少72小時,。PNGase F不會去除通常在植物糖蛋白上發(fā)現(xiàn)的含有Alpha-（1,3）連接的核心巖藻糖的寡糖,；為此，請使用肽N-糖苷酶A,。

PNGase F在大腸桿菌中來自伊麗莎白的源重組PNGase F基因

EC 3.5.1.52

內(nèi)容
60的重組PNG酶F（0.3 U）在20mM的Tris-HCl微升等分試樣,，pH 7.5中
包含用20μL和60μL包尺寸
5倍PNG酶?F反應(yīng)緩沖液7.5 PNG酶的F - 250 mM磷酸鈉，pH 7.5中
PNG酶?F變性解決方案– 2％SDS,，1 M Beta-巰基乙醇
PNGase F Triton X-100 – 15％解決方案

比活度> 25 U / mg

活性5 U / ml

分子量35,000道爾頓

PNGase F 6-10的pH范圍,，最佳7.5

PNGase F建議用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體積調(diào)整為35 µl,。
2.加入10 µl 5x PNGase F反應(yīng)緩沖液7.5和2.5 µl PNGase F變性溶液,。在100°C加熱5分鐘。
3.酷,。加入2.5 µl PNGase F Triton X-100并混合,。
4.在反應(yīng)中加入2.0 µl PNGaseF。在37°C下孵育3小時,。

特異性PNGase F從糖蛋白上裂解天冬酰胺連接的（N連接的）寡糖,。PNGase F將天冬酰胺脫氨為天冬氨酸，使寡糖保持完整,。變性可將裂解速率提高至100倍,。大多數(shù)天然蛋白質(zhì)仍然可以*被N-去糖基化，但是必須增加孵育時間,。PNGase F在孵育條件下將保持活性至少72小時,。PNGase F不會去除通常在植物糖蛋白上發(fā)現(xiàn)的含有Alpha-（1,3）連接的核心巖藻糖的寡糖,；為此，請使用肽N-糖苷酶A,。

比活性定義為在37°C,，pH 7.5的情況下，在1分鐘內(nèi)催化從1微摩爾RNase B釋放N-連接的寡糖所需的酶量,。通過SDS-PAGE監(jiān)測切割（切割的RNase B遷移更快）,。

儲存將酶保存在4?C下??。