詳細(xì)資料

Fabricator（IdeS）是一種*的酶，可在鉸鏈區(qū)下方的特定位點(diǎn)消化IgG,，從而生成F（ab'）2和Fc / 2片段的均質(zhì)庫,。除IgG外，沒有其他已知的底物,。IgG會(huì)在30分鐘內(nèi)被消化,，如果延長(zhǎng)孵育時(shí)間，則不會(huì)存在消化過度的風(fēng)險(xiǎn),。由于FabRICATOR在生理反應(yīng)條件下消化IgG,，因此可以保留免疫反應(yīng)性。在37°C時(shí)可獲得佳活性,，但也可在室溫下使用延長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行消化,。

Fabricator消化人類的所有亞類，以及猴子,，兔子和綿羊IgG的某些類,。它對(duì)小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-對(duì)于這些抗體種類的消化，我們建議使用FabRICATORZ,。

使用FabRICATOR消化IgG,，然后還原，可產(chǎn)生三個(gè)25 kDa大小的片段（Fd',，F(xiàn)c和LC）,，可以使用LC-MS儀器輕松對(duì)其進(jìn)行分析。高精度質(zhì)量概況能夠檢測(cè)抗體微變體,，例如糖基化,，C端賴氨酸鉗制，氧化和脫酰胺等,。

FabRICATOR從化膿性鏈球菌克隆  并在大腸桿菌中表達(dá),。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為37 725 Da,。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,，由Genovis AB開發(fā)，用于要求高標(biāo)準(zhǔn)和一致性的生物技術(shù)應(yīng)用,。 

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

將FabRICATOR酶凍干并通過添加水進(jìn)行重構(gòu),。重構(gòu)后，F(xiàn)abricator在+ 4-8°C穩(wěn)定1個(gè)月,。該產(chǎn)品在室溫下運(yùn)輸,，到達(dá)時(shí)應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C下,。

緩沖液

已測(cè)試以下緩沖液與FabRICATOR消化在不同pH值下的相容性。注意,，在pH 5.0以下,，F(xiàn)abricator酶不可逆地失活。pH 8.0以上的消化需要延長(zhǎng)/優(yōu)化的條件,。

• 磷酸鹽緩沖液（PBS）6.0 – 8.0
• Tris緩沖區(qū)7.0 – 8.0
• MES緩沖區(qū)5.5 – 6.5
• HEPES緩沖區(qū)7.0 – 8.0
• 碳酸氫銨緩沖液6.0 – 7.0
• 醋酸鈉緩沖液6.0

單位定義

在10 mM磷酸鈉,，137 mM NaCl，2.7mM KCl pH 7.4中于37°C孵育30分鐘后,，一個(gè)單位可消化≥95％的1µg人IgG,。