complementtech R137說明書

 名稱：因子H蛋白（大鼠）
目錄號：R137
可用規(guī)格：100µg/瓶
濃度：1.0 mg/mL（準(zhǔn)確濃度見檢驗(yàn)報(bào)告）
形態(tài)：液體
純度：> 90%（SDS-PAGE法）
緩沖液：10 mM磷酸鈉,，145 mM NaCl，pH 7.3
消光系數(shù)A280 nm = 1.682(1.0 mg/mL)
分子量：155000 Da（單鏈）
豁免前：無,，0.22µm過濾
儲存：-70 ℃
C或以下,。避免凍融。
來源：來自健康動物的正常大鼠血清
預(yù)防措施：使用常規(guī)預(yù)防措施處理動物血液制品,。
來源：美國生產(chǎn),。

Rat Factor H

產(chǎn)品描述

從正常大鼠血清中純化大鼠（Rattus Norvegicus）補(bǔ)體因子H（fH）。H因子是補(bǔ)體替代途徑的重要調(diào)控成分,。這對于防止宿主細(xì)胞和組織（尤其是腎臟）的補(bǔ)體激活至關(guān)重要,。它具有兩個(gè)功能活性：1）控制替代途徑C3 / C5轉(zhuǎn)化酶的形成和衰減（衰減加速活性）； 2）作為I因子的輔因子,，當(dāng)C3b與H因子結(jié)合時(shí),，它通過蛋白水解作用使C3b失活（輔助因子活性）。據(jù)報(bào)道,，C3b結(jié)合蛋白類似于從大鼠血漿中分離出的H因子,，它是由大鼠血小板產(chǎn)生的，并起著免疫粘附受體的作用,，可清除嚙齒動物中的免疫復(fù)合物（Alexander JJ等人（2001年））,。

一般描述

大鼠（褐家鼠）補(bǔ)體因子H(fH)從正常大鼠血清中純化而來。因子H是補(bǔ)體替代途徑的重要調(diào)節(jié)成分,。它對于預(yù)防宿主細(xì)胞和組織（尤其是腎臟）上的補(bǔ)體激活至關(guān)重要,。它具有兩種功能活性：1）控制旁路途徑C3/C5轉(zhuǎn)化酶的形成和衰變（衰變加速活性）,，和2）作為因子I的輔因子,，當(dāng)C3b與因子H結(jié)合時(shí)，其蛋白水解使C3b失活（輔因子活性）,。據(jù)報(bào)道,，C3b結(jié)合蛋白與從大鼠血漿中分離的因子H相似，由大鼠血小板產(chǎn)生，并作為免疫粘附受體在嚙齒類動物中清除免疫復(fù)合物（Alexander J.J. et al.(2001))..(2001)).

因子H是由20個(gè)同源結(jié)構(gòu)域組成的155000 Da蛋白,，在半柔性串上像微珠一樣排列,。N端5個(gè)結(jié)構(gòu)域與C3b結(jié)合并抑制因子b的結(jié)合，從而減少C3/C5轉(zhuǎn)化酶的形成,。因子H還與預(yù)形成的C3/C5轉(zhuǎn)化酶（C3b,、Bb和C3b、Bb,、C3b）結(jié)合,，并引起催化亞基Bb的快速釋放（衰變加速）。這些活性對于控制血漿中替代途徑擴(kuò)增過程的自發(fā)激活至關(guān)重要,。此外,，當(dāng)C3b附著在顆粒表面時(shí)，因子H控制這些酶的形成和衰變,。對宿主細(xì)胞有效,，對外來顆粒效果較差，原因如下,。補(bǔ)體的替代途徑是通過產(chǎn)生液相C3b樣C3(H2O)和C3b的“蜱”不斷激活,。因子H可與這些蛋白結(jié)合并作為輔因子，使因子I（一種以活性形式循環(huán)的絲氨酸蛋白酶）可裂解其產(chǎn)生無活性蛋白（iC3b或iC3(H2O)）的α鏈,。如果C3b不以這種方式失活,，它繼續(xù)形成C3轉(zhuǎn)化酶，消耗因子b和C3,。如果C3b附著在表面,，則通過因子H和i以相似的方式轉(zhuǎn)化為iC3b。當(dāng)C3b駐留在宿主細(xì)胞上時(shí),，由于因子H識別的宿主標(biāo)記物的存在,，因子H更有效。由于因子H識別的宿主特異性識別,，補(bǔ)體介導(dǎo)的宿主損傷小化,。

 因子H似乎通過識別宿主標(biāo)志物來調(diào)節(jié)潛在病原體與宿主細(xì)胞和組織之間的區(qū)分。連接到表面的C3b可以啟動替代途徑的擴(kuò)增級聯(lián),。因子H在宿主細(xì)胞上阻止了這一點(diǎn),，并使其發(fā)生在不帶有宿主樣標(biāo)記的表面。這些宿主特異性結(jié)構(gòu)被認(rèn)為是聚陰離子簇,，如唾液酸和硫酸化糖胺聚糖,。通過位于因子H結(jié)構(gòu)域6-20的多個(gè)多陰離子結(jié)合位點(diǎn)識別宿主標(biāo)志物。一個(gè)位點(diǎn)位于結(jié)構(gòu)域7,，該結(jié)構(gòu)域的突變(Y402H)與年齡相關(guān)性黃斑變性中的補(bǔ)體激活和組織破壞密切相關(guān)（Zipfel,P.F. et al.(2006)).一個(gè)暫定位點(diǎn)位于結(jié)構(gòu)域12-14區(qū)域,，一個(gè)非常重要的位點(diǎn)位于結(jié)構(gòu)域19-20的C-末端,。該C-末端位點(diǎn)似乎是幫助結(jié)合宿主表面的主要位點(diǎn)。在遺傳性溶血性尿毒癥綜合征中,，影響或位于這些結(jié)構(gòu)域的突變導(dǎo)致補(bǔ)體替代途徑的激活（Zipfel,P.F. et al.(2006)).該位點(diǎn)似乎是參與聚陰離子依賴性二聚體和因子H四聚體形成的位點(diǎn)（Pangburn,M.K. et al.
(2009)).

 物理特性和結(jié)構(gòu)據(jù)報(bào)道,，大鼠因子H的分子量約為150,000至155,000道爾頓(Daha MR et al.(1982)；Demberg Tet al.(2002),；Alexander JJ et al.,，2001)。大鼠因子H的糖基化水平為9.5%（Demberg Tet al.,(2002),。在非還原和還原條件下通過SDS/聚丙烯酰胺凝膠電泳(Invitrogen)對純化的大鼠因子H（目錄號R137）進(jìn)行分析,，結(jié)果顯示有一條條帶略微早于人因子H（155,000道爾頓）遷移。使用ProtParam,，根據(jù)其氨基酸序列計(jì)算大鼠因子H的消光系數(shù)(E1%/280 nm = 16.82),，并假設(shè)所有Cys殘基對均形成胱氨酸（即一對半胱氨酸分子通過二硫鍵連接）。根據(jù)其氨基酸序列計(jì)算的pI為6.29,。Demberg Tet al.(2002)報(bào)告因子H大鼠血清的正常血漿濃度為238 + 21 μg/mL,，而Daha MR et al(1982)報(bào)告為244 + 21 μg/mL。

 功能參見上述一般描述,。
分析H因子的功能試驗(yàn)測量其衰變加速活性或I因子輔因子活性(Morgan,B.P.(2000)),。已報(bào)告了連續(xù)監(jiān)測的熒光測定法(Pangburn,M.K. et al.(1983))，該方法利用存在C3b時(shí)ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）的熒光下降約8倍（當(dāng)C3b轉(zhuǎn)化為iC3b時(shí)）,。因子H的其他功能試驗(yàn)見人因子H的含量測定章節(jié)（目錄號A137）,。
使用方便的輔因子測定法（通過SDS凝膠測定純化C3b的裂解）測定純化大鼠因子H（目錄號R137）的輔因子活性。
在存在1µg人因子I（目錄號A138）的情況下,，將4 μg(4 μg)大鼠C3b（目錄號R114）與不同量的大鼠因子H（目錄號R137,，范圍為0.1至1µg，總體積為12µL）共同孵育,。將試驗(yàn)置于濕冰上,，然后在37 ℃下孵育15 min，此時(shí)向試管中加入含還原劑的SDS樣品緩沖液,，并將樣品加熱5 min,。SDS凝膠分析顯示，在 > 0.02 μg大鼠因子H和1 μg人因子I存在的情況下,，大鼠C3b的α鏈裂解 > 90%,。

 功能在上述一般描述章節(jié)中描述了因子H的生物學(xué)功能。
遺傳學(xué)大鼠因子H染色體位置13,。大鼠因子H的NCBI基因ID編號為155012,，UniProt登錄號為Q91YB6。
預(yù)防措施/毒性/危害：該蛋白從動物血漿/血清中提純,，因此必須采用適用于處理任何動物血源性產(chǎn)品的預(yù)防措施,。
危害代碼：B WGK Germany 3MSDS可根據(jù)要求提供,。
CAS登記號：80295-65-4