檢測IGFBP的非放射性西配體印跡試劑盒

在應(yīng)用筆記IGF004中可以看到一些帶有人IGF-I，IGF-II和類似物的西方配體印跡的例子：

可以看到以IGFBP-3為例的西方配體印跡和免疫印跡的比較

應(yīng)用筆記IGF0018：

人類Western-ligand印跡試劑盒

檢測人類來源樣品中的IGFBP和IGF受體,。用來自牛,，豬，兔,，豚鼠,，綿羊，驢和山羊血清的樣品獲得相似的模式,。用大鼠和小鼠血清在硝酸纖維素膜上只能獲得弱條帶（請參閱：小鼠/大鼠western-ligand印跡試劑盒）,。

該試劑盒適用于定量分析,。這是Ligandis GbR提供的服務(wù)

套件內(nèi)容：

該試劑盒的試劑足以在每個步驟中制備250 ml的每種試劑。這對于500平方厘米的吸墨膜就足夠了,。試劑盒中的每種試劑也可以單獨購買,。

我們提供的套件不含基材,，您可以使用常規(guī)基材

我們已經(jīng)成功測試了其他基材，例如KPL,，Pierce,，GE Healthcare，Seramun,，Kem-en-tec,。

可以在化學(xué)發(fā)光底物之后使用比色底物以給記錄。簡單地將膜洗滌1分鐘,，并與比色底物一起孵育,。比色底物的靈敏度與化學(xué)發(fā)光底物相似，但是孵育時間更長,。

使用自己的緩沖劑的注意事項

我們開發(fā)了一種緩沖系統(tǒng),，即使在室溫下,，也能使手中的硝酸纖維素膜具有佳的靈敏度,，并具有延長的穩(wěn)定性。可以適當?shù)厥褂闷渌彌_區(qū),，但有一些限制：

1. 如果將其用于封閉和/或稀釋,，請注意牛血清白蛋白（BSA）的質(zhì)量。許多BSA制劑均含有痕量的IGFBP,，這可能會影響WLB的質(zhì)量（背景/信號比）,。

1. 在文獻中描述了牛奶中含有生物素化的蛋白質(zhì)，這可能會影響WLB的質(zhì)量（背景/信號比）,。我們已經(jīng)測試了來自不同供應(yīng)商和當?shù)爻械拿撝谭?，沒有發(fā)現(xiàn)生物素化的蛋白質(zhì)。

參考：

Pircher等人：一種純化生物活性胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3的新方法,。蛋白質(zhì)表達與純化71（2010）160-167,。