eaglebio 14D39-K01 0說明書

14,15 DHET ELISA Assay Kit

SKU: 14D39-K01 0

Eagle Biosciences 14,15 DHET ELISA分析試劑盒旨在通過酶聯(lián)免疫法（ELISA）定量測定生物樣品中的14,15 DHET,。Eagle Biosciences 14,15 DHET ELISA分析試劑盒僅供研究使用,，不得用于診斷程序,。

14,15 DHET ELISA分析試劑盒

僅供研究使用

大小：1×96 
孔靈敏度：0.01 ng / ml 
動態(tài)范圍：0.01 – 1000 ng / ml 
孵育時間：2.5小時
樣品類型：血清，血漿,，組織,，生物液體
樣品量：100 µl

在美國制造的產(chǎn)品

分析背景

這種競爭性的14,15 DHET ELISA分析試劑盒用于測定生物樣品中的14,15-DHET水平。14,15 DHET ELISA分析試劑盒的特異性已發(fā)表,。14,15-DHET水平與嚙齒類動物的高血壓,，腦損傷和中風(fēng)表現(xiàn)出強烈的正相關(guān)性。14,15-DHET是可溶性環(huán)氧化物水解酶介導(dǎo)的EET代謝的代表代謝物,，它是由細胞色素P450的花生四烯酸環(huán)氧酶活性產(chǎn)生的,。使用14,15-DHET ELISA試劑盒測量了人類血液中的14,15-DHET水平。通過14,15-DHET ELISA檢測到的人細胞14,15-DHET水平升高表明癌細胞具有腫瘤性和轉(zhuǎn)移性表型,。此14,15 DHET ELISA分析試劑盒可用于測定血清,，血漿，細胞,，和組織經(jīng)過適當(dāng)?shù)姆蛛x和純化,。以下頁面提供了有關(guān)正確分離和純化的說明。 

該競爭性ELISA試劑盒基于14,15-DHET表位與14,15-DHET-HRP共軛物之間的競爭,，可從抗14,15-DHET抗體中獲得有限數(shù)量的結(jié)合位點,，并將其包被到96孔ELISA板。每個樣品中的結(jié)合物濃度保持恒定,，而14,15-DHET的濃度則根據(jù)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的濃度而變化,。因此，能夠與每個孔結(jié)合的14,15-DHET綴合物的量與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中14,15-DHET的濃度成反比,。然后,，通過添加TMB時獲得的顏色量確定結(jié)合至每個孔的綴合物的量。TMB與井中可用的HRP反應(yīng),。加上硫酸,，

測定步驟

1. 將200微升樣品稀釋緩沖液裝入空白（BL）孔中，并將100微升樣品稀釋緩沖液裝入大結(jié)合（BO）孔中,。
2. 將每種標(biāo)準(zhǔn)品的100微升裝入適當(dāng)?shù)目字小?/li>
3. 將每個樣品100微升裝入適當(dāng)?shù)目字小?/li>
4. 將100微升稀釋的14,15-DHET-HRP共軛物裝載到BO孔,，標(biāo)準(zhǔn)孔和樣品孔中。不要在BL孔中添加HRP共軛物,。
5. 將板在室溫下孵育兩個小時,。
6. 每孔用400微升稀釋的洗滌緩沖液洗滌板3次,。
7. 在三個洗滌循環(huán)中的后一個循環(huán)之后，將板拍干在一些紙巾上,。
8. 將200微升的TMB底物添加到所有孔（包括BL孔）中,。
9. 在室溫下將平板孵育15-30分鐘。
10. 向所有孔中添加50微升2 N硫酸,。
11. 在450 nm處讀取板,。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線