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當前位置:上海起發(fā)實驗試劑有限公司>>技術文章>>Fluoro-Gold
Fluoro-Gold™是世界上使用廣泛,有效的神經(jīng)元逆行示蹤劑。氟金,,商品名Fluoro-Gold,,也稱為羥基二苯乙烯am。
我們的氟金抗體是迄今為止有效的氟金抗體,。自從Fluorochrome在1998年*推出以來,,它已取得了*的成就記錄,并已成為行業(yè)標準,。
Fluoro-Ruby是一種快速,,靈敏,可靠且技術簡單的熒光順行示蹤劑和標記物,。氟紅寶石的使用與氟金基本相同,。Fluoro-Ruby已經(jīng)使用了很多年,被認為是領跑的順行示蹤劑,。
DAPI染色的縱截面的顯微照片,,通過小鼠右頸脊髓,顯示了熒光金標記的運動神經(jīng)元的典型列,。該圖發(fā)布于Tosolini AP,,Mohan R,Morris R(2013),。靶向小鼠前肢中運動終板區(qū)域的全長可增加氟金對相應脊髓運動神經(jīng)元的吸收,。面前,。神經(jīng)元,。4:58、1-10,、4
大鼠前肢中強烈的熒光金標記的運動神經(jīng)元陽性,。該圖發(fā)表于Tosolini AP,Mohan R(2012),。供應大鼠前肢的運動神經(jīng)元柱的空間表征,。神經(jīng)科學200:19-30,22,。
成年小鼠腰脊髓的顯微照片,,顯示了用DAPI復染色的典型的熒光金標記柱。該圖發(fā)表于Mohan R,,Tosolini AP,,Morris,R.(2014),。神經(jīng)科學274:318-330,,323
氟金使用指南和協(xié)議
主協(xié)議
1.背景
熒光金的使用與其他熒光示蹤劑基本相同。氟金在注射后的存活時間,濃度范圍,,組織治療以及與其他組織化學技術的相容性方面更具靈活性,。
2.儲存和保質(zhì)期
干氟金應保存在4攝氏度的密閉容器中。妥善存放,,氟金的保質(zhì)期應超過一年,。溶液中的染料也應保存在4攝氏度的密閉容器中,并應保持穩(wěn)定至少六個月,。
3.車用
氟金可以溶于蒸餾水或0.9%的鹽水中,。氟金在堿性pH下不溶。但是,,它也可以用作 0.2M中性磷酸鹽緩沖液的懸浮液,。
4.染料濃度
氟金已成功使用,濃度范圍為1-10%,。建議濃度為4%,。如果在注射部位發(fā)生不良壞死,或標記太強烈,,請將濃度降低至2%溶液,。如果您需要使用更精確的測量值,則Fluoro-Gold的分子量為532.6道爾頓,。
5.染料管理
6.術后0生存期
已觀察到良好的逆行標記,,周期從兩天到兩個月不等,。生存期通常為三到五天。較長的生存期可增強遠端過程的填充,,而不會使染料從細胞中擴散出來,。
7.固定
劑幾乎可以使用任何固定劑,也可以不使用固定劑,,含有4%甲醛的磷酸鹽中性緩沖鹽水經(jīng)常使用,。含有高濃度重金屬(例如,汞)的固定劑會猝滅熒光,,而高濃度(超過1%)的戊二醛可能會增加背景熒光,。
8.
含有氟金的組織化學處理組織實際上可以根據(jù)任何常見的組織學技術進行處理。其中包括未固定組織的低溫恒溫器切片(10 µm),,固定組織的冷凍切片(20 µm)和從嵌入塑料(.2-4 µm)或石蠟(3-10 µm)中的組織切下的薄切片,。常使用固定組織的冷凍切片。
9.組合方法
在處理的這一點上,可以對切片進行進一步處理,,以用于第二標記物,,例如放射自顯影,HRP組織化學,,免疫細胞化學,,第二熒光示蹤劑,熒光復染色等,。
10.安裝,,清理和蓋玻片
部分通常安裝在涂明膠的載玻片上,風干,,浸入二甲苯中,,并用非熒光DPX塑料固定介質(zhì)蓋玻片。切片可能會用分級酒精脫水,,除非這與第二種示蹤劑不兼容,。如果將Fluoro-Gold與熒光免疫細胞化學結合使用,則將切片風干并直接用中性緩沖甘油(1:2)蓋上蓋子,。
11.考試與攝影
熒光金可以使用寬帶紫外激發(fā)濾光片在熒光顯微鏡下觀察,。當用中性pH緩沖液處理組織時,發(fā)出金色,,而當用酸性(例如pH 3.3)pH緩沖液處理組織時,,發(fā)出藍色。它可以用數(shù)碼照片或膠片照相(對于彩色照片,,請使用Ektachrome 200-400 ASA膠片,;對于黑白照片,請使用相當?shù)乃俣饶z片,,例如Tri-X),。根據(jù)物鏡的放大倍數(shù)和標簽的強度,,大多數(shù)曝光時間為10-60秒,。三十(30)秒鐘的暴露約為平均水平??梢岳枚啻纹毓鈦硗瑫r可視化熒光金和另一種示蹤劑,。從而,紫外線將與明場照明相結合,,以在放射自顯影中同時定位具有HRP或銀顆粒的氟金,。類似地,可以組合使用藍光激發(fā)以可視化FITC的綠色發(fā)射顏色,,而可以使用綠色激發(fā)光同時觀察碘化丙啶或溴化乙錠(熒光復染)的紅色發(fā)射顏色,。
$ 300.00
氟金(Fluorogold)是Fluorochrome,LLC的產(chǎn)品。自1985年以來,,它已由Fluorochrome出售并得到廣泛使用,。其他公司正在銷售他們聲稱與Fluoro-Gold相同或等同的產(chǎn)品。實際上,,這些化合物的化學結構似乎不同于氟金,。化合物的某些物理性質(zhì)可能會非常不同,。
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