NFK GreenScreen™ Assays

NFK GreenScreen™檢測(cè)

色氨酸代謝在免疫調(diào)節(jié)和神經(jīng)退行性疾病中起重要作用,。色氨酸代謝酶是癌癥免疫療法和神經(jīng)退行性疾病的重要藥物靶標(biāo)。為了高通量篩選色氨酸代謝酶,，我們開(kāi)發(fā)了NFK GreenScreen™檢測(cè)方法來(lái)篩選吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO1）和色氨酸雙加氧酶（TDO）,。

NFK Green™測(cè)定法可在溫和條件下工作，適用于高通量篩選,。NFK GreenScreen™試劑盒包含所有進(jìn)行測(cè)定的成分,，包括參考抑制劑。下面顯示了用NFK GreenScreen™測(cè)量的IDO1和TDO參考抑制劑的劑量反應(yīng)曲線,。

該套件有五種格式：
1. hIDO GreenScreen™；包括純化的人吲哚胺2,，3-二加氧酶（IDO1）
2,。包括純化的人色氨酸雙加氧酶（TDO）
3。
mTDO GreenScreen™; 包括純化的小鼠吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO1）4,。包括純化的小鼠色氨酸雙加氧酶（TDO）
5,。NFKGreen™用于基于細(xì)胞的篩選；用于基于細(xì)胞的測(cè)定 不含酶

與當(dāng)前用于IDO和TDO測(cè)試的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)相比,，NFK GreenScreen™檢測(cè)條件溫和（環(huán)境溫度和中性pH）,，避免了加熱和添加酸性,，堿性或劇毒試劑的情況。熒光測(cè)定法基于NTRC開(kāi)發(fā)的名為NFK Green™的高度特異性和*標(biāo)記,。該協(xié)議可以快速實(shí)施測(cè)定以進(jìn)行高通量篩選或常規(guī)化合物測(cè)試,。

通過(guò)分別篩選IDO1和TDO的384孔或1536孔格式的約90.000種化合物，證明了其高通量篩選的適用性,。篩選所有化合物的濃度為10 µM,。

根據(jù)您的需求，我們可以提供1,000或10,000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的套件,。對(duì)于高通量的屏幕（> 100.000數(shù)據(jù)點(diǎn)）,，我們可以為您提供針對(duì)屏幕定制的蛋白質(zhì)，試劑和緩沖液,。

我們已經(jīng)證明,，該試劑可用于IDO1和TDO的生化測(cè)定中檢測(cè)NFK。此外,，該測(cè)定法可用于測(cè)量細(xì)胞代謝色氨酸的能力,，從而確定IDO1和TDO抑制劑的細(xì)胞效力。

IDO1和TDO的生化測(cè)定已開(kāi)發(fā)為“僅加法”,。首先,，將化合物和酶結(jié)合。接下來(lái),，通過(guò)添加L-色氨酸開(kāi)始反應(yīng),。10或30分鐘后，通過(guò)添加NFK Green終止反應(yīng),，并通過(guò)在37°C下孵育4小時(shí)進(jìn)行反應(yīng)。

NFK Green™與NFK反應(yīng)形成綠色熒光分子,，激發(fā)波長(zhǎng)為400 nm,，發(fā)射波長(zhǎng)為510 nm，其中庫(kù)化合物的熒光干擾小,。該測(cè)定法可以在所有常用的熒光或多模式閱讀器上讀取,，并且適用于生化以及基于細(xì)胞的測(cè)定法來(lái)測(cè)量色氨酸代謝酶。

有關(guān)更多信息和報(bào)價(jià)請(qǐng)求,，請(qǐng)發(fā)送電子郵件至[email protected],。