上海起發(fā)haemtech活化蛋白C現(xiàn)貨
Activated Protein C
活化蛋白C(APC)使因子Va失活
代表了APC對因子Va的蛋白水解失活,,其中:PS =蛋白S,PCPS =磷脂囊泡(或細胞表面),,Ca ++ =鈣離子,。因子Va失活形成因子Vai的原因是APC在三個特定位點對因子Va重鏈(94K)進行了蛋白水解(實心箭頭)(1,2),。這些切割位點在因子Va重鏈中的位置如下:(人:R306,R506和R679)和(牛:R306,,R505和R662),。輔因子分子的*滅活需要在精氨酸306位裂解?;罨鞍證在精氨酸306上的切割僅在存在膜的情況下發(fā)生,,并且需要事先在精氨酸505上重鏈的切割。APC對因子Va輕鏈進行的蛋白水解僅在牛分子中發(fā)生,,并且對于滅活不是必需的(虛線箭頭),。
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2 O |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 顯色測定 |
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保質期(正確存放) | 12個月 |
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 20 mM Tris,,150 mM NaCl,,pH 7.4 |
存儲 | -80°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 顯色測定 |
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保質期(正確存放) | 12個月 |
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2 O |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,,> 95% |
活性測定 | 顯色測定 |
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保質期(正確存放) | 12個月 |
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 20 mM Hepes,150 mM NaCl,,pH 7.4 |
存儲 | -80°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,,> 95% |
活性測定 | 顯色測定 |
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保質期(正確存放) | 12個月 |
活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲氨酸蛋白酶,來源于兩條鏈,,依賴于維生素K的酶原,,蛋白C(3-7)。α-凝血酶和血栓調節(jié)蛋白之間的復合物催化蛋白C重鏈中Arg-12(牛中的Arg-14)的單裂,,從而生成活化的C蛋白,。幾種非生理相關的蛋白酶,例如RVV-X激活劑,,胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活C蛋白,。
APC用作抗凝血劑,可催化輔因子Va和VIIIa因子的蛋白水解失活,,從而導致凝血酶原酶和Xase因子復合物的抑制,。因子Va和VIIIa的失活都是Ca2 +和磷脂依賴性的。維生素K依賴的輔因子蛋白S通過與APC形成1:1的復合物(Kd = 6x10-9M)適度提高了失活率(8),。
有幾個因素減弱了APC的抗凝活性,。Xa因子通過競爭因子Va上相似的結合位點來保護因子Va免受APC的蛋白水解作用。凝血酶也已被提出通過蛋白S的蛋白水解失活作為APC的調節(jié)劑,。此外,,APC還受循環(huán)肝素依賴性蛋白的調節(jié)C抑制劑(PAI-3),肝素非依賴性循環(huán)蛋白C抑制劑,血小板衍生的蛋白C抑制劑和PAI-1,。據(jù)報道,,在APC和兩種PAI類型之間形成的復合物可說明在輸注APC或體內產生APC時觀察到的纖維蛋白溶解增加。
除了我們的標準APC制劑外,,還可以使用含有Dansyl-EGR-氯甲基甲酮的活性位點封閉形式,。
活化的蛋白C是由純化的蛋白C通過凝血酶激活,然后進行離子交換色譜法制得的(4),。APC以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,,應儲存在-20oC下。通過SDS-PAGE分析確定純度,,并使用生色底物測定法測量活性,。還按照APC耐藥性分析的要求測試了所有生產批次的APC延長正常人血漿aPTT的能力(10,11),。該測試的結果以aPTT(+/- APC)比(10nM APC)的形式提供給每個批次,。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人類aPC,每泳道1 µg |
緩沖 | 拖把 |
標準 | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),,磷酸化酶B(97 kDa),,BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),,酒精脫氫酶(39 kDa),,碳酸酐酶(28 kDa),,肌紅蛋白紅(19 kDa),,溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 等離子體 | ||||||||
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行動方式 | 抗凝血劑,可滅活因子Va和VIIIa | ||||||||
分子量 | 56,200(人類)(5) 52,650(牛)(5) | ||||||||
消光系數(shù) |
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等電點 | 4.4-4.8(人)(9) 4.2-4.5(牛)(9) | ||||||||
結構體 | 兩條鏈,,Mr = 35,000和21,000,二硫鍵連接,,NH2-末端gla結構域,,兩個EGF結構域 | ||||||||
碳水化合物百分比 | 23%(人類)(5) 14%(牛)(5) | ||||||||
翻譯后修改 | 11個gla殘基(牛),9個gla殘基(人),,1個β-羥基天冬氨酸 |
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