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swant 7697說明書
產(chǎn)品名稱: 鈣網(wǎng)膜蛋白兔多抗 CR 7697
英文名稱 : Rabbit anti-calretinin
貨號 : 7697
批號: 1893-0114
外觀: 凍干粉
溶解:每管用200 µl雙蒸水溶解
規(guī)格:200UL
兔抗calretinin抗血清是用N末端含有6-his標(biāo)記的重組人calretinin蛋白免疫家兔制備的。
該抗體為兔抗calretinin多克隆抗體[1],,與鈣結(jié)合蛋白D-28k和鈣調(diào)素[2]都屬于EF-手性家族的鈣結(jié)合蛋白,。7697鈣網(wǎng)膜蛋白特異表達(dá)于包括人,、猴子,、大鼠,、小鼠、豚鼠,,雞和魚的組織中(圖1)與鈣結(jié)合蛋白D-28k或其他已知的鈣結(jié)合蛋白不產(chǎn)生交叉反應(yīng),此特異性取決于改抗原在腦組織中的分布位置,。
1,、生物素-親和素標(biāo)記免疫組化檢測4%多聚甲醛(或10%福爾馬林緩沖液)固定的腦組織冷凍/石蠟切片;
2,、免疫酶標(biāo)記/免疫印跡驗(yàn)證,;
WB: 免疫印跡,; IHC :免疫組織化學(xué),; ELISA:酶聯(lián)免疫,。
免疫組化(IHC): 1:2'000 - 1:5'000,4%多聚甲醛/福爾馬林固定組織的冰凍或石蠟切片,。
免疫印跡(WB): 1:1'000 - 1:2'000
本說明書IHC及WB采用的是生物素標(biāo)記法,建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法及內(nèi)容選擇合適的抗體稀釋比例,。
解凍后分裝(如每管1ul或5ul等)保存于- 80°C冰箱,。短期保存-20°C,。近期頻繁使用保存于 4°C(增加
0.01% 疊氮鈉)。 避免反復(fù)凍融,。建議分裝小份儲存。
Calretinin可能屬于“觸發(fā)”鈣結(jié)合蛋白的一類,。它主要出現(xiàn)在神經(jīng)細(xì)胞亞群中,是間皮瘤的良好標(biāo)志物[3,4]。
圖1:不同種屬全腦組織蛋白抽提液用于SDS-PAGE Western blot檢測,,結(jié)果表明所有種屬均可特異性檢測到分子量為29-30k Da的條帶,。
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圖. 1 7697鈣網(wǎng)膜蛋白對不同種屬腦組織勻漿液的WB檢測結(jié)果。上樣順序依次為:1 小鼠,;2 大鼠,;3 豚鼠,;4 兔子,;5 食蟹猴,;6 斑馬魚,;7雞,8重組calretinin蛋白,。WB結(jié)果表明,在所有物種中都能檢測到29kDa的條帶,。
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Calretinin高表達(dá)于正常小鼠腦組織神經(jīng)元(圖2a),,calretinin基因敲除小鼠腦組織區(qū)域未見陽性表達(dá)(圖2b)
圖 2a:正常小鼠腦組織7697鈣網(wǎng)膜蛋白免疫組化結(jié)果:陽性染色分散于大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞,。100 X鏡下 | 圖2b: calretini基因敲除小鼠大腦7697鈣網(wǎng)膜免疫組化染色結(jié)果:未見大腦皮層神經(jīng)元陽性染色,。100 X鏡下 |
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