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來自生物發(fā)光生物的三類蛋白質(zhì)具有*的性質(zhì),可用作細胞研究的報告基因,,定義代謝途徑,,并且對高通量篩選(HTS)非常有用。
熒光素酶催化熒光素底物(特別是Coelenterazine)的酶促氧化,,并產(chǎn)生光作為該反應的副產(chǎn)物,。與代螢火蟲熒光素酶系統(tǒng)不同,這些基于Coelenterazine的熒光素酶(NanoLight™)不需要輔助高能量分子,,如ATP或輔酶A,,這極大地簡化了它們在許多報告應用中的應用。
一種特別小,,小和亮的Coelenterazine熒光素酶被稱為Gaussia princeps熒光素酶,。它是從許多海上旅行中發(fā)現(xiàn)的,以獲得這些5毫米長的橈足類,,這些橈足類生活在700-900米深的稀疏分布中,。在原始條件下獲得足夠的這些橈足類以制備用于表達克隆的功能文庫非常費力且昂貴。
高斯熒光素酶的一種應用是例如單個神經(jīng)元囊泡釋放的觀察,,因此可以用于直接和以定量方式對去極化和胰島素和其他融合蛋白的釋放進行成像,。
光蛋白(水母發(fā)光蛋白,螅蛋白)是“預充電”與腔腸素,,并且當氧化是通過鈣觸發(fā)分子含氧,,發(fā)生閃光。光蛋白通常需要還原環(huán)境和極低水平的鈣,,否則它們在鈣存??在下表現(xiàn)為差的螢光素酶,。
綠色熒光蛋白(NanoFluor™)由于*的肽衍生的發(fā)色團在翻譯后自組裝而具有內(nèi)在熒光。GFPs將熒光素酶或發(fā)光蛋白的波長從藍色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色的能力允許,除了其他用途之外,,基因表達的全細胞研究和藥物 - 靶標相互作用隨時間和可變劑量的可視化,。
我們*的GFP和熒光素酶特性使公司科學家能夠獲得階段SBIR,以評估BRET(生物發(fā)光能量轉(zhuǎn)移)用作新型生物傳感器的可行性,。BRET可能是HTS,,醫(yī)學診斷和基礎研究的廣泛適用的支持技術(shù)。其*的優(yōu)點是,,當發(fā)生綁定或接近事件時,,它提供空間和方向信息。
一種值得注意的海筆GFP,,Ptilosarcus,,被發(fā)現(xiàn)具有所有熒光蛋白的高天然量子效率。Ptilosarcus和Renilla GFP經(jīng)過密碼子優(yōu)化,,用于Cellomics的高含量篩選,,并由Molecular Devices和Rigel Pharmaceuticals使用。
NanoLight Technology認為,,基礎研究人員,,藥物發(fā)現(xiàn)者和農(nóng)業(yè)化學行業(yè)才開始在研究,篩選和發(fā)現(xiàn)工作中利用天然生物發(fā)光的力量,。
大多數(shù)可通過標準發(fā)光計測量的可見光譜仍可用于開發(fā),,NanoLights™可以很好地開發(fā)生物發(fā)光報告系統(tǒng),并可輕松整合到ELISA檢測系統(tǒng),,直接體內(nèi)成像,,細胞追蹤和DNA-DNA中,DNA- RNA和核苷酸 - 肽檢測使用各種策略,,并分裂熒光素酶技術(shù),。由于使用NanoLight技術(shù)的生物發(fā)光技術(shù)的知識產(chǎn)權(quán)是堅實的并且不受現(xiàn)有技術(shù)的影響,生命科學公司可以確保他們的發(fā)現(xiàn)是安全的,,并且基于NanoLight技術(shù)的后續(xù)專有技術(shù)位置是安全的,。
NanoLight 319說明書
新!NanoFuel® FLASH測定為Gaussia螢光素酶,,目錄號319
也可用,, GLuc GLOW Assay,Cat,。#320 & NLuc GLOW Assay,,Cat。#325
用于體內(nèi)和 體外用途的水溶性Coelenterazines :
腔腸 | H-腔腸素 | Prolume紫色 | |
體內(nèi) 應用 | 貨號3031 | 貨號3011 | 無法使用 |
體外 應用 | 貨號3032 | 貨號3012 | 貨號3692? |
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