genaxxon M3009.0250說明書

產(chǎn)品信息“SNP Pol DNA Polymerase”

SNP Pol DNA聚合酶，用于簡便,，可靠和快速的等位基因特異性鑒別，例如,。CRISPR / Cas9點(diǎn)突變,，用于檢測錯(cuò)誤的CRISPR / Cas9產(chǎn)物，或驗(yàn)證測序結(jié)果,。SNP Pol DNA聚合酶區(qū)分高度特異性,，是否存在引物 - 模板復(fù)合物的錯(cuò)配。錯(cuò)配（點(diǎn)突變）必須位于引物的3'末端,。因此,，突變等位基因可以與野生型等位基因*區(qū)分 - 無需測序，因?yàn)榫酆厦冈阱e(cuò)配的情況下不會放大,。

只需將您的引物置于假定的點(diǎn)突變上（重要：點(diǎn)突變必須位于3'末端）,，聚合酶將檢測到該區(qū)域的錯(cuò)配，幾乎100％準(zhǔn)確：如果模板堿基與3'末端互補(bǔ)引物顯示突變而引物不顯示,，不會發(fā)生擴(kuò)增 - 在短時(shí)間內(nèi)100％確定,！
因此,，SNP Pol DNA聚合酶可以容易地，時(shí)間和成本有效地用于點(diǎn)突變的篩選,。

變體SNP PolTaq DNA聚合酶具有5'-3'核酸酶活性,，因此可用于特定的水解探針，例如Taqman探針或分子信標(biāo),。

測試樣品以*出售,！德國境內(nèi)沒有運(yùn)輸費(fèi)用。測試樣品價(jià)格將在產(chǎn)品的個(gè)正式訂單中退還,。

描述
SNP Pol DNA聚合酶>（Hi gh Di鑒定單核苷酸）是一種高選擇性的DNA聚合酶,。它專門針對需要高鑒別率的等位基因特異性鑒別而開發(fā)：例如等位基因特異性PCR（ASA; AS-PCR），等位基因特異性引物延伸（AS-PEX）,，SNP分析,，基因分型或甲基化特異性PCR（MSP）。許多其他DNA聚合酶耐受錯(cuò)配的引物 - 模板復(fù)合物,，因此不適合,。另一方面,，SNP Pol DNA聚合酶特異性地區(qū)分這些（高鑒別度）并僅提供具有*匹配的引物對的PCR產(chǎn)物,！通過兩個(gè)等位基因之間的等位基因特異性PCR，Genaxxon SNP Pol和SNP PolTaq DNA聚合酶的差異高達(dá)100％,，并且在簡單的qPCR之后,，給出關(guān)于哪個(gè)等位基因存在的清楚結(jié)果。從而,，

等位基因特異性PCR可用于量化野生型序列的庫或背景中的突變率,。由NGS確定的突變頻率的驗(yàn)證   也可以通過等位基因特異性PCR和SNP Pol DNA聚合酶來驗(yàn)證。SNP PolTaq DNA聚合酶非常適合分析  液體活檢  樣品,。使用SNP PolTaq,，可以很好地分析和量化癌癥突變的存在和頻率。

圖片如下：應(yīng)用說明SNP Pol DNA Polymerase

我們建議設(shè)計(jì)具有短擴(kuò)增子長度（約60-200 bp）的引物以獲得良結(jié)果,，但也可以使用更長的擴(kuò)增子長度,。如果擴(kuò)增子長> 500 bp，可能需要添加額外的鎂（+0.5-1.5mM）,。

SNP Pol DNA聚合酶（M3009>  或  M3061>）可與非特異性熒光染料（例如Genaxxon的  Green DNA Dye>  或SybrGreen®）一起用于實(shí)時(shí)PCR,。當(dāng)使用特異性PCR探針時(shí)，可以僅使用SNP PolTaq DNA聚合酶,，因?yàn)橹挥羞@些具有5'-3'外切核酸酶活性,。

我們的高質(zhì)量dNTP如Set（M3015.4100）>  或  Mix（M3016.1010）>  或我們的  DNA Ladders> 和我們有利的  標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖（M3044）>  我們可以為您的PCR提供其他產(chǎn)品。

SNP Pol DNA和SNP Pol DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域
- 點(diǎn)突變的監(jiān)測,，驗(yàn)證和檢測
- 正確或錯(cuò)誤的CRISPR / Cas9產(chǎn)物
的鑒定
- 測序結(jié)果的驗(yàn)證/驗(yàn)證- 突變的定量（例如NGS結(jié)果）
- SNP檢測等位基因特異性擴(kuò)增（ASA）/等位基因特異性PCR 
- 亞硫酸氫鹽處理DNA后的甲基化特異性PCR（MSP）（CpG甲基化側(cè)）
- HLA基因分型
- 微量測序
- 水解探針實(shí)時(shí)PCR 
- 實(shí)時(shí)多重PCR

- 秀麗隱桿線蟲中的DamID-seq數(shù)據(jù),。

作為ChIP的替代方案,，近顯示通過測序（DamID-seq）鑒定DNA腺嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶能夠表征單個(gè)哺乳動物細(xì)胞中的結(jié)合位點(diǎn)。另外,，通過以受控方式在組織特異性啟動子下表達(dá)Dam融合蛋白,，可以實(shí)現(xiàn)DamID用于細(xì)胞類型特異性分析。在本報(bào)告中,，我們提供了一個(gè)用戶友好的管道來分析秀麗隱桿線蟲中的DamID-seq數(shù)據(jù),。

技術(shù)數(shù)據(jù)：

規(guī)格：
SNP Pol DNA聚合酶以5 U /μL溶液形式提供。它配有優(yōu)化的10倍反應(yīng)緩沖液,。
SNP Pol DNA聚合酶不顯示5'-3'外切核酸酶活性,！不適用于與例如TaqMan TM探針的水解探針一起使用。

申請：

- 點(diǎn)突變的監(jiān)測,，驗(yàn)證和檢測 - 正確或錯(cuò)誤的CRISPR / Cas9產(chǎn)物的鑒定 - 測序結(jié)果的驗(yàn)證/驗(yàn)證 - 突變的定量（例如NGS結(jié)果） - 通過等位基因特異性擴(kuò)增（ASA）/等位基因的SNP檢測 - 特異性PCR - 亞硫酸氫鹽處理DNA后的甲基化特異性PCR（MSP） - HLA基因分型 - 微量測序 - 實(shí)時(shí)PCR（無水解探針;使用SNP PolTaq） - 實(shí)時(shí)多重PCR

資源

REC,。來自大腸桿菌

SNP聚合酶是一種高選擇性的DNA聚合酶變異體。它已被選定用于鑒別程度較高的檢測,。 例如在等位基因特異性PCRS或甲基化特異性PCRS中,。許多dna聚合酶能耐受不匹配的引物-模板復(fù)合物，而snp pol dna聚合酶則能有效地鑒別Th,。 OSE只在*匹配引物對的情況下產(chǎn)生特定的擴(kuò)增,。這使得SnPol DNA聚合酶在SNP檢測、HLA基因分型或單個(gè)CpG分析中非常有用,。 加注地點(diǎn),。

SNP Pol DNA聚合酶能有效地區(qū)分3‘端不匹配的引物.3‘位錯(cuò)配引物是識別SNPs的要求. 如果突變/錯(cuò)配位于引物的另一個(gè)位置，SNP POL和SNP PolTaq聚合酶將像“正常”Taq聚合酶一樣工作,。

該工程聚合酶也可作為SNP PolTaq DNA聚合酶版本,，具有5‘-3’-核酸酶活性，因此可用于基于水解探針的檢測(Taqman探針,，molec)

商品概述

濃度：5單位/升

底物類似物：dNTP,，ddNTP，熒光dNTP/ddNTP

延伸率：1 kb/min,。在72°C

半衰期：20分鐘,。95°C，60 min,。在94°C

5‘-3’外核酶活性：SNP POL聚合酶NO/SNP PolTaq聚合酶YES)

3‘-5’外核酶活性：NO

核酸酶污染：否

蛋白酶污染：否

單位定義

SNP POL/SNP Poltaq dna-Polymerase的一個(gè)單位定義為在72℃下,，在72℃下，將10 nmol的dntp酶在30分鐘內(nèi)加入到酸不溶性組分中的酶量,。 .

質(zhì)量管理

PCR活性：SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶PCR檢測HeLa基因組DNA中的基因組SNP(Rs 72921001),。PCR產(chǎn)物隨后在 2.5%瓊脂糖凝膠。用etSNP溴化Polum染色法在匹配引物的正確擴(kuò)增長度為109 bp的條件下,，觀察到一種特異的產(chǎn)物,。在不匹配引物的情況下,，不生成產(chǎn)物。 在50個(gè)周期后可見,。

DNA聚合酶活性：用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶活性,，并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。

適用,，應(yīng)用,，運(yùn)用

·SNP-等位基因特異性擴(kuò)增(ASA)/等位基因特異性PCR檢測

甲基化特異性PCR(MSP)

·HLA基因分型

·多重PCR

穩(wěn)定（性），穩(wěn)固

Genaxxon生物科學(xué)SNP POL和SNP PolTaq DNA-聚合酶在濕冰上運(yùn)輸,，但在RT(15°C~25°C)下保持活性至少2周,。

SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶(包括緩沖器和試劑)應(yīng)在收到-20°C時(shí)立即儲存，在這些條件下儲存并正確處理,，這些產(chǎn)品可以 保持至少到有效期(見管標(biāo)簽),，而不顯示任何性能下降。Genaxxon生物科學(xué)SNP POL和SNP Poltaq DNA聚合酶也可在2°C-8保存,。 c多3個(gè)月,。