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Prozyme內(nèi)切糖苷酶列表:
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
PNGaseF
| N-Glycanase® | GKE-5006A | 1 ea (100mU※ in 40 µl) |
N-Glycanase® | GKE-5006B | 1 ea (200mU in 80 µl) | |
N-Glycanase® | GKE-5006D | 1 ea (1U in 400µl) | |
N-Glycanase®-Ultra | GKE-5020B | 1 ea (400mU in 40µl) | |
N-Glycanase®-Ultra | GKE-5020D | 1 ea (1U in 100µl) | |
Glyko® N-Glycanase-PLUS | GKE-5010B | 1 ea (400mU in 40µl) | |
Glyko® N-Glycanase-PLUS | GKE-5010D | 1 ea (1U in 100µl) | |
Glyko® PNGase F (Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum) | GKE-5003 | 1 ea (100 mU (50 µl)) | |
Endo-H | Glyko® Endoglycosidase H (recombinant gene from Streptomyces plicatus, expressed in E. coli) | GKE-5002 | 1 ea (30 mU (200 µl)) |
Endo F2 | Glyko® Endo F2 (recomb Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum expressed in E. coli) | GKE-5008 | 1 ea (6 mU (60 µl)) |
PNGaseA | Glyko® PNGase A (almond) | GKE-5011A | 1 ea (2mU) |
Glyko® PNGase A (almond) | GKE-5011B | 1 ea (10mU) | |
O-Glycanase | Glyko® O-Glycanase (recombinant gene from Streptococcus pneumoniae, expressed in E.coli) | GK80090 | 1 ea (50 mU (40 µl)) |
※ 1 Prozyme Unit=1 IUB Unit
糖苷酶亦稱糖苷水解酶(glycoside hydrolase),。是用于各種糖苷或寡糖使糖苷鍵水解酶的總稱,。根據(jù)切割的糖的種類可分為內(nèi)切糖苷酶(Endoglycosidase)和外切糖苷酶(Exoglycosidases),。內(nèi)切糖苷酶是催化水解寡糖及多糖的內(nèi)部糖苷鍵的酶,,用于從糖蛋白上切割多糖的酶,。其中內(nèi)切糖苷酶F和內(nèi)切糖苷酶H,,可用于鑒別N-糖苷鏈的類型。內(nèi)切糖苷酶F可斷裂糖蛋白的天冬酰胺和甘露聚糖的糖苷鍵,,內(nèi)切糖苷酶H專一性水解兩個(gè)N-乙酰氨基葡糖之間的 β(1,,4)糖苷鍵,,其底物主要是高甘露糖型和雜合型糖鏈。
Prozyme提供了包括PNGaseF,、Endo-H,、Endo F2、PNGaseA,、O-Glycanase等的內(nèi)切糖苷酶,。
肽N- 糖苷酶 F,即 PNGase F,,是一種酰氨酶,,能夠在N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復(fù)合寡糖部分內(nèi)側(cè)的N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間進(jìn)行切割,。
糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是從Streptomyces plicatus中克隆,,在大腸桿菌中表達(dá)得到的重組糖苷酶。Endo H能夠?qū)?/span>N-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心進(jìn)行切割,,而不切割復(fù)雜多糖,。酶切反應(yīng)切割寡糖二乙酰殼二糖核心的兩個(gè)N-乙酰基葡糖胺殘基,,切割后保留天冬酰胺的一個(gè)N-乙酰葡糖胺殘基,。該特性與PNGase F(肽-N-糖苷酶 F)不同,,它切割所有的天冬酰胺連接的寡糖,。
重組內(nèi)切糖苷酶F2(Endo F2)適于切除天然狀態(tài)下蛋白質(zhì)的N連接寡糖,特別是復(fù)雜型的寡糖,,核心巖藻糖對(duì)酶切效果影響不大,。Endo F2酶切位點(diǎn)位于無(wú)糖核心的兩個(gè)N乙酰氨基葡萄糖間的糖苷鍵,酶切后,,釋放出截短的游離寡糖,,蛋白質(zhì)天冬酰胺殘基上仍保留一個(gè)N乙酰氨基葡萄糖。某些寡糖鏈,,由于其所處位置受蛋白空間結(jié)構(gòu)的影響,,使用經(jīng)典的PNGaseF無(wú)法在天然狀態(tài)下將寡糖切除,須將蛋白進(jìn)行變性處理,。Endo F2與PNGaseF相比,,對(duì)蛋白的空間結(jié)構(gòu)的影響不敏感,因此更適合酶切天然狀態(tài)下蛋白質(zhì)的N連接寡糖,。
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