scarabgenomics CRM197說明書

• 以經(jīng)濟的價格高純度CRM197 -金龜子的rCRM197是在我們的基因組清潔表達^® 大腸桿菌,，通過刪除基因組> 20％，可實現(xiàn)完整的超潔凈的蛋白質(zhì)通過生物工程,。由于幾乎所有Scarab的CRM197都完好無損,，因此您的半抗原不會浪費,。
• 生物仿制藥天然CRM197 -的氨基酸序列，質(zhì)譜法,，圓二色性,，分析所有指示金龜子在我們的基因組清潔制成重組CRM197 ^®大腸桿菌相當于CRM197。
• 共軛準備 - Scarab的CRM197結(jié)合能力已通過定量功能測定證實
• 超低內(nèi)毒素 - Scarab的工程化清潔基因組^® 大腸桿菌具有簡化的內(nèi)毒素,，比標準表達菌株更容易去除,。

背景

交叉反應材料197（CRM197）是一種基因無毒形式的白喉毒素（DT）。CRM197中的單堿基變化（位置52處的谷氨酸至甘氨酸）使A鏈的ADP-核糖基化活性失效,，減弱毒性^1,2,。盡管CRM197是無毒的，但它在免疫學上與白喉毒素無法區(qū)分,。CRM197作為多糖和半抗原的載體起作用,，使其在許多結(jié)合疫苗中具有免疫原性。

圣甲蟲基因組學CRM197是重組形式的清潔基因表達^® 大腸桿菌,，我們的專有平臺,。

SOURCE
清潔基因組^® 大腸桿菌中表達的重組CRM197

產(chǎn)品分子量： 58.4 kDa

數(shù)據(jù)

圖1：Scarab Genomics的CRM197非常純凈，并且在批次之間保持一致,。每批Scarab的CRM197的五個重復在Bis-Tris 4-12％梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上運行并用GelCode TM Blue染色,，然后通過凝膠掃描評估純度。計算每批的平均純度并如下分配：圖A純度98.3％,，圖B純度95.5％,。

圖2：Scarab Genomics的CRM197純度高于其他商業(yè)來源。將來自每種來源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12％梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上電泳并用GelCode TM Blue染色,。Scarab產(chǎn)品中幾乎不存在分解產(chǎn)物（表示為A和B帶）,。一些泳道中的被涂污的背景是由于蛋白質(zhì)降解和宿主蛋白質(zhì)的，兩者在Scarab產(chǎn)品中都是小的,。泳道1大小標記,，泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197，SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197,，SG2,，Lane 5供應商F，泳道6供應商M和泳道7供應商L.

圖3：Scarab CRM197的LC MS肽圖譜證實它與原生CRM197具有生物學相似性,。在Scarab的高純度CRM197上進行氨基酸測序和質(zhì)譜（MS）,。MS材料的廣泛生物信息學分析顯示沒有翻譯后修飾。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后接著納米液相色譜-MS / MS鑒定出非常高的蛋白質(zhì)覆蓋率（~97-98％）,。Scarab CRM197上的電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）證實了預期的肽序列。沒有觀察到與報道的氨基酸組成和側(cè)鏈修飾的差異,。

圖4：圣甲蟲的CRM197結(jié)合有效,。并非CRM197中的所有賴氨酸都暴露在蛋白質(zhì)表面上以進行潛在的綴合,。采用Solulink的ChromaLink™生物素結(jié)合測定（San Diego，CA）,，利用NHS酯反應方案將生物素與伯胺結(jié)合,，我們證實Scarab的CRM197上至少有10個位點可用于結(jié)合。這種光學定量（在354nm處的吸光度）功能測試證實,，Scarab的CRM197上的賴氨酸可與半抗原結(jié)合,，如天然CRM197。

產(chǎn)品規(guī)格

質(zhì)量控制

等級： CRM197僅供研究使用,，不適用于人類或診斷代理。

儲藏條件：

• CRM197是0.2μm過濾的4mg / mL CRM197,150mM NaCl,，25mM HEPES,，pH7.4的冷凍溶液。收到后儲存在-70°C,。
• 為了使聚集小化,，將CRM197在37°C水浴中解凍1小時。
• 重復的凍融循環(huán)會降解材料,。為了大限度地減少凍融循環(huán),，將CRM197等分以匹配所需的用途。
• 輕輕處理產(chǎn)品,，不要VORTEX,。

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