haemtech Haematologic Technologies,，Inc,。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊(cè)公司，是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商,。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),，以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),，包括酶原,，酶，輔因子和抑制劑,，以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列,。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究,。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,，蛋白質(zhì)修飾,，化驗(yàn)開發(fā)，合同制造和合同研究,。

haemtech HCVWF-0190說明書

von Willebrand因子（和VIII免費(fèi)）

血管性血友病因子
的多聚體結(jié)構(gòu)說明了具有結(jié)合因子VIII的1.8MDa von Willebrand因子（vWF）多聚體的形成,。每個(gè)vWF單體（Mr = 260,000）在分子的NH2末端附近含有因子VIII結(jié)合位點(diǎn)。單體通過二硫鍵端對(duì)端地連接（NH 2至NH 2和COOH至COOH）以形成大的多聚體,。成熟的多聚體可以每個(gè)單體亞基結(jié)合一個(gè)因子VIII分子,。

HCVWF-0190 Human von Willebrand Factor

HCVWF-0191 Human von Willebrand Factor - VIII "Free"

血管性血友病因子（vWF）是一種多聚體血漿糖蛋白，是正常止血血小板栓塞形成所需的（1-8）,。成熟的血漿蛋白由明顯相同的亞基（Mr = 260,000）組成,，它們通過二硫鍵結(jié)合在一起。循環(huán)的vWF分子的大小范圍從二聚體（Mr = 520,000）到極大的多聚體（Mr> 10,000,000）,。在正常止血期間,，較大的vWF多聚體負(fù)責(zé)通過在血小板內(nèi)糖蛋白IB和內(nèi)皮下的暴露膠原之間形成橋接來促進(jìn)血小板栓的形成（9-14）。缺乏vWF蛋白或存在導(dǎo)致聚合減少的異?？赡軐?dǎo)致生物活性喪失,，這是馮維勒布蘭德氏病的特征。

除了其在血小板栓塞形成中的作用外,，vWF還負(fù)責(zé)血漿中因子VIII（抗血友病因子）的結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)（15）,。似乎后一事件是功能性因子VIII的穩(wěn)定性和有效遞送的原因。研究表明,，因子VIII與成熟vWF亞基的NH2末端部分結(jié)合,，每個(gè)vWF單體具有一個(gè)因子VIII分子的化學(xué)計(jì)量（16,17）。

單鏈vWF單體在NH 2 - 末端和COOH - 末端都含有大量半胱氨酸殘基,，其參與多聚體形成,。碳水化合物分析表明，近15％的vWF質(zhì)量是由碳水化合物貢獻(xiàn)的（18）,。似乎碳水化合物用于保護(hù)vWF免于蛋白水解,，但對(duì)于功能活性或多聚體形成不是必需的。

使用Thorell（19）和Lollar（20）描述的方法的組合,，從檸檬酸鹽人血漿制備vWF,。還可獲得因子VIII“游離”vWF制劑，其進(jìn)一步純化以確保去除因子VIII促凝血活性（仍存在抗原）,。通過在還原條件下的SDS-PAGE判斷,，制劑純度> 95％，并且通過SDS /瓊脂糖凝膠中的電泳測(cè)定由大的多聚體組成,。將蛋白質(zhì)在0.025M檸檬酸鈉,，0.1M甘氨酸，0.1M NaCl,，pH6.8中冷凍運(yùn)輸,，在-70℃下儲(chǔ)存,。

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