Reddot Biotech Inc.位于加拿大不列顛哥倫比亞省基洛納，由一支在醫(yī)療器械行業(yè)擁有超過(guò)35年經(jīng)驗(yàn)的執(zhí)行團(tuán)隊(duì)于2015年成立,。我們專注于為市場(chǎng)的客戶提供及時(shí)的客戶服務(wù),，可靠的供應(yīng)和具有性能的產(chǎn)品。我們依靠競(jìng)爭(zhēng),，創(chuàng)新和快速資源分配來(lái)滿足客戶需求,。

Reddot Biotech Inc.目前專注于銷售用于制藥，實(shí)驗(yàn)室,，醫(yī)學(xué)和科研用途的試劑和相關(guān)產(chǎn)品,。我們致力于研究和開(kāi)發(fā)，為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品,，為任何研究提供準(zhǔn)確,，可靠和快速的結(jié)果,。憑借與各大洲公司和研究機(jī)構(gòu)合作的豐富經(jīng)驗(yàn)，我們?yōu)槲覀兲峁┑漠a(chǎn)品和服務(wù)提供了巨大的價(jià)值,。

RD-OT-Ge一般催產(chǎn)素（OT）ELISA試劑盒

RD-OT-GeGeneral Oxytocin (OT) ELISA Kit

傳統(tǒng)的ELISA試劑盒與即用型ELISA試劑盒

我們新的“即用型”ELISA試劑盒具有以下特點(diǎn)：

• 縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間
• 預(yù)稀釋檢測(cè)試劑
• 增強(qiáng)穩(wěn)定性,，允許在4 o C下儲(chǔ)存整個(gè)試劑盒

這些試劑盒仍然保持我們高水平的質(zhì)量和靈敏度，以及我們12個(gè)月的保質(zhì)期,。

與傳統(tǒng)的ELISA試劑盒相比,，我們的即用型試劑盒使用起來(lái)更容易，更快捷,。

提供的試劑和材料

所需材料但未提供套件

• 微孔板讀數(shù)器，450±10nm濾光片,。
• 精密單通道或多通道移液器和一次性吸頭,。
• 微量離心管用于稀釋。
• 去離子水或蒸餾水,。
• 用于印跡微量滴定板的吸水紙,。
• 稀釋洗滌緩沖液的容器。

存放套件

對(duì)于未開(kāi)封的套件

傳統(tǒng)的ELISA試劑盒：所有試劑應(yīng)根據(jù)樣品瓶上的標(biāo)簽保存,。的TMB底物,，洗滌緩沖液（30X濃縮物）和終止溶液應(yīng)在被存儲(chǔ)4 ö Ç 在接收而其他人應(yīng)在-20 Ô Ç 。

即用型ELISA試劑盒：所有試劑應(yīng)在收到后于4 o C儲(chǔ)存,。

打開(kāi)套件

打開(kāi)試劑盒后,，仍需要根據(jù)上述儲(chǔ)存條件儲(chǔ)存剩余的試劑。此外,，將未使用的孔返回到含有干燥劑包的鋁箔袋中,，并沿著拉鏈密封的整個(gè)邊緣重新密封。

注意：

有關(guān)套件的失效日期,，請(qǐng)參閱套件盒上的標(biāo)簽,。在此日期之前，所有組件都是穩(wěn)定的

強(qiáng)烈建議在開(kāi)封后1個(gè)月內(nèi)使用剩余的試劑,。

樣品采集和存儲(chǔ)

請(qǐng)注意您感興趣的套件推薦哪些樣品類型,。如果您有任何疑問(wèn)或想知道我們是否可以根據(jù)您的需求定制套件，請(qǐng)咨詢我們,。

血清

使用血清分離管,，讓樣品在室溫下凝固2小時(shí)或在4℃下過(guò)夜，然后以約1000×g離心20分鐘。立即測(cè)定新鮮制備的血清,，或?qū)悠贩盅b在-20℃或-80℃下備用,。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

等離子體

使用EDTA或肝素作為抗凝血?jiǎng)┦占獫{,。在收集后30分鐘內(nèi),，在2-8℃下以1000×g離心樣品15分鐘。立即去除血漿并進(jìn)行檢測(cè),，或?qū)悠繁４嬖?20℃或-80℃的等分試樣中以備后用,。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

組織勻漿

組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化,。通常,，組織應(yīng)在冰冷的PBS（0.02mol / L，pH 7.0-7.2）中*沖洗以除去過(guò)量的血液并在均質(zhì)化前稱重,。將組織切成小塊并在冰上用玻璃勻漿器在5-10mL PBS中均化（Micro Tissue Grinders也起作用）,。應(yīng)使用超聲波細(xì)胞破碎器對(duì)所得懸浮液進(jìn)行超聲處理，或進(jìn)行兩次凍融循環(huán)以進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜,。之后,，勻漿應(yīng)以5000×g離心5分鐘。立即取出上清液并進(jìn)行分析,，或等分試樣并在≤-20℃下儲(chǔ)存,。

細(xì)胞裂解物

根據(jù)以下說(shuō)明，在測(cè)定前必須裂解細(xì)胞：

1. 應(yīng)用胰蛋白酶分離貼壁細(xì)胞,，然后通過(guò)離心收集（懸浮細(xì)胞可通過(guò)直接離心收集）。
2. 在冷PBS中洗滌細(xì)胞三次,。
3. 在1X PBS中重懸細(xì)胞并進(jìn)行4次超聲波處理（或在≤-20℃下冷凍細(xì)胞,。輕輕混合解凍細(xì)胞。重復(fù)凍融循環(huán)3次,。）
4. 在2 - 8℃下以1500×g離心10分鐘以除去細(xì)胞碎片,。細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體 - 以1000×g離心20分鐘。立即去除顆粒物并進(jìn)行分析,，或?qū)悠贩盅b在-20℃或-80℃的等分試樣中,。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

唾液

使用收集裝置或等同物收集唾液,。在2-8在1000×g下離心15分鐘樣品ö C.在≤-20刪除在等分試樣的微粒,，并立即檢測(cè)，或?qū)?/span>ö C.避免反復(fù)冷凍/解凍循環(huán),。

尿

無(wú)菌收集當(dāng)天的批尿液（中游）,，直接收集到無(wú)菌容器中。離心機(jī)以除去顆粒物質(zhì)，測(cè)定立即或等分試樣并儲(chǔ)存在≤-20 ö C.避免反復(fù)凍融,。

牛奶

用于以2 10,000×G下離心15分鐘的樣品- 8 ø C.收集總共3個(gè)周期的水性餾分和離心機(jī)兩次以上,。立即測(cè)定或?qū)悠贩盅b在-20 o C或-80 o C以備后用。避免反復(fù)凍/融循環(huán),。

淚液,，細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體

以1000×g離心樣品20分鐘。立即去除顆粒物并進(jìn)行檢測(cè),，或?qū)悠繁４嬖?20 o C或-80 o C的等分試樣中,。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

注意：                                               

1. 樣品在5天內(nèi)可以被存儲(chǔ)在4使用Ô C,，否則樣品必須儲(chǔ)存在-20 Ô C（≤1月）或-80 Ô C（≤2個(gè)月）,，以避免生物活性和/或污染的損失。
2. 樣品溶血會(huì)影響結(jié)果; 不會(huì)檢測(cè)到用作樣本的溶血標(biāo)本,。
3. 進(jìn)行測(cè)定時(shí),，將樣品置于室溫下。

試劑準(zhǔn)備

*使用前將所有試劑盒組分和樣品置于室溫（18-25 o C）,。

標(biāo)準(zhǔn) 

用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑重新配制標(biāo)準(zhǔn)品,，在室溫下保持10分鐘，輕輕搖動(dòng)（不要起泡）,。有關(guān)儲(chǔ)備溶液中標(biāo)準(zhǔn)濃度的信息,，請(qǐng)參閱手冊(cè)。準(zhǔn)備7管含有0.5mL標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑的試管,，并使用稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品生產(chǎn)雙稀釋系列,。在下次轉(zhuǎn)移之前*混合每個(gè)管。

檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B.

傳統(tǒng)的ELISA試劑盒：使用前短暫旋轉(zhuǎn)或離心檢測(cè)A和檢測(cè)B溶液,。分別用Assay Diluent A和B稀釋至工作濃度（1：100）,。

即用型ELISA試劑盒：檢測(cè)溶液A和B的濃度已經(jīng)正確，無(wú)需進(jìn)一步稀釋,。

洗液 

用580mL去離子水或蒸餾水稀釋20mL洗滌液濃縮物（30×）,，制備600mL洗滌液（1×）。

TMB底物 

用滅菌的吸頭吸取所需劑量的溶液,。不要將殘留的溶液倒回到小瓶中,。

注意：

1. 不要直接在孔中進(jìn)行連續(xù)稀釋。
2. 在進(jìn)行測(cè)定后15分鐘內(nèi)準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品,。不要直接在37 o C 溶解試劑,。
3. 檢測(cè)試劑A和B是粘性溶液，因此慢慢移液它們以減少體積誤差,。
4. 傳統(tǒng)的ELISA試劑盒：根據(jù)說(shuō)明小心地重新構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品或使用檢測(cè)試劑A和B,，避免起泡并輕輕混合直至晶體*溶解,。為了大限度地減少移液造成的不性，請(qǐng)使用小體積并確保移液器已校準(zhǔn),。建議一次移液10μL以上以確保準(zhǔn)確性,。                 
5. 即用型ELISA試劑盒：重組標(biāo)準(zhǔn)品只能使用一次。
6. 重構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)品,，檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B只能使用一次,。
7. 如果在洗滌液濃縮物（30×）中形成晶體，則溫?zé)嶂潦覝夭⑤p輕混合直至晶體*溶解,。
8. 試劑制備過(guò)程中使用的任何污染水或容器都會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果,。

樣品制備

• Reddot Biotech僅對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，而不是對(duì)試驗(yàn)過(guò)程中消耗的樣品負(fù)責(zé),。實(shí)驗(yàn)者應(yīng)該在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前總是計(jì)算所需的樣品總量,。
• 實(shí)驗(yàn)者還應(yīng)該在開(kāi)始之前預(yù)測(cè)大致的濃度。如果預(yù)期值不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),，建議確定樣品的yi稀釋度,。
• 如果您使用的樣品類型未在手冊(cè)中指出，則應(yīng)在開(kāi)始實(shí)際實(shí)驗(yàn)之前進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)以確保試劑盒的有效性,。
• 建議不要使用化學(xué)裂解緩沖液來(lái)制備組織或細(xì)胞提取樣品,，因?yàn)樗赡軙?huì)由于裂解緩沖液的含量而導(dǎo)致意外的反應(yīng)和結(jié)果。
• 由于其他來(lái)源的抗原與我們?cè)噭┖兄惺褂玫目贵w之間可能存在錯(cuò)配,，因此不建議使用其他制造商生產(chǎn)的天然或重組蛋白,，因?yàn)槲覀兊脑噭┖锌赡軣o(wú)法識(shí)別它們。
• 我們的試劑盒可能無(wú)法檢測(cè)到細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的樣品,，因?yàn)樗鼈兒苋菀资艿郊?xì)胞活力,，細(xì)胞數(shù)量和/或取樣時(shí)間等因素的影響。
• 建議將未經(jīng)長(zhǎng)期儲(chǔ)存的新鮮樣品與我們的試劑盒一起使用,。如果樣品長(zhǎng)時(shí)間未冷凍保存,，可能會(huì)發(fā)生蛋白質(zhì)降解和變性，導(dǎo)致結(jié)果相互矛盾或不正確,。

分析程序

用于夾心ELISA試劑盒

1. 確定稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，空白樣品和樣品的孔,。為標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備7口井,，為空白準(zhǔn)備1口井。每種稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品（讀取試劑制備）,，空白和樣品加入100μL到適當(dāng)?shù)目字?。用Plate密封劑蓋住。在37 o C 孵育2小時(shí),。
2. 從每個(gè)井中取出液體,，不要洗,。
3. 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)試劑A工作溶液（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。用Plate密封劑覆蓋后,，在37 o C 孵育1小時(shí),。
4. 吸出溶液，用噴槍,，多通道移液器,，歧管分配器或自動(dòng)洗衣機(jī)在每個(gè)孔中用350μL1×洗滌液洗滌，靜置1~2分鐘,。通過(guò)將板輕敲到吸水紙上,，*從所有孔中除去剩余的液體。*洗凈3次,。后一次洗滌后,，通過(guò)抽吸或傾析除去任何剩余的洗滌緩沖液。翻轉(zhuǎn)平板并將其吸附在吸水紙上,。
5. 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)試劑B工作溶液（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）,。用Plate密封劑覆蓋后，在37 o C 孵育1小時(shí),。
6. 如步驟4中所述,，重復(fù)抽吸/洗滌過(guò)程總共5次。
7. 每孔加入90μL底物溶液,。蓋上新的Plate密封劑,。在37 o C 孵育15-25分鐘（不要超過(guò)30分鐘）。避光,。加入底物溶液后液體會(huì)變藍(lán),。
8. 每孔加入50μL終止液。加入Stop溶液后液體會(huì)變黃,。通過(guò)敲擊板的側(cè)面來(lái)混合液體,。如果顏色變化不均勻，請(qǐng)輕輕敲打板以確保充分混合,。
9. 去除板底部的任何水滴和指紋,，確認(rèn)液體表面沒(méi)有氣泡。運(yùn)行酶標(biāo)儀,，立即進(jìn)行450nm的測(cè)量,。

適用于競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒

1. 確定稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，空白樣品和樣品的孔,。為標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備7口井,，為空白準(zhǔn)備1口井。分別加入50μL標(biāo)準(zhǔn)稀釋液（讀取試劑制備）,，空白和樣品加入適當(dāng)?shù)目字?。然后立即向每個(gè)孔中加入50μL檢測(cè)試劑A（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）,。輕輕搖動(dòng)平板（建議使用微孔板振蕩器）。用Plate密封劑覆蓋,。在37 o C 孵育1小時(shí),。檢測(cè)試劑A可能會(huì)出現(xiàn)混濁。溫?zé)嶂潦覝夭⑤p輕混合直至溶液看起來(lái)均勻,。

1. 吸出溶液,，用噴槍，多通道移液器,，歧管分配器或自動(dòng)洗滌器向每個(gè)孔中加入350μL1×洗滌液,，靜置1-2分鐘。通過(guò)將板輕敲到吸水紙上,，*從所有孔中除去剩余的液體,。*洗凈3次。后一次洗滌后,，通過(guò)抽吸或傾析除去任何剩余的洗滌緩沖液,。翻轉(zhuǎn)印版并將其貼在吸水紙上。
2. 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)試劑B工作溶液（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）,。用Plate密封劑覆蓋后,，在37 o C 孵育1小時(shí)。
3. 在步驟2中重復(fù)抽吸/洗滌過(guò)程總共5次,。
4. 每孔加入90μL底物溶液,。蓋上新的Plate密封劑。在37 o C 孵育15-25分鐘（不要超過(guò)30分鐘）,。避光,。加入底物溶液后液體會(huì)變藍(lán)。
5. 每孔加入50μL終止液,。加入Stop溶液后液體會(huì)變黃,。通過(guò)敲擊板的側(cè)面來(lái)混合液體。如果顏色變化不均勻,，請(qǐng)輕輕敲打板以確保充分混合,。
6. 去除板底部的任何水滴和指紋，確認(rèn)液體表面沒(méi)有氣泡,。運(yùn)行酶標(biāo)儀,，立即進(jìn)行450nm的測(cè)量。

注意：

1. 分析準(zhǔn)備：為每個(gè)實(shí)驗(yàn)保留適當(dāng)數(shù)量的孔,，并從微孔板中移除額外的孔。剩余的井應(yīng)重新密封,，并保存在-20 o C的傳統(tǒng)套件中,，4 o C的即用型套件,。  
2. 樣品或試劑添加：請(qǐng)使用新制備的標(biāo)準(zhǔn)品。小心地將樣品加入孔中并輕輕混合以避免起泡,。不要觸摸井壁,。對(duì)于該程序中的每個(gè)步驟，將試劑或樣品添加到測(cè)定板的總分配時(shí)間不應(yīng)超過(guò)10分鐘,。這將確保每個(gè)移液步驟的相等的經(jīng)過(guò)時(shí)間,，而不會(huì)中斷。建議復(fù)制所有標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,，但不要求,。為避免交叉污染，在添加標(biāo)準(zhǔn)品,，樣品和試劑之間更換移液器吸頭,。此外，對(duì)每種試劑使用分離的儲(chǔ)庫(kù),。
3. 孵育：為了確保準(zhǔn)確的結(jié)果,，需要在孵育步驟中適當(dāng)粘附板密封劑。在孵化步驟之間不允許孔長(zhǎng)時(shí)間未被覆蓋,。一旦將試劑添加到孔條中,，在測(cè)定過(guò)程中不要讓條帶干燥。必須控制孵育時(shí)間和溫度,。
4. 洗滌：洗滌程序至關(guān)重要,。在每個(gè)步驟中*去除液體對(duì)于試劑盒的良好性能是*的。后一次清洗后,，通過(guò)抽吸或傾析除去任何殘留的清洗液,，并去除板底部的任何水滴或指紋。洗滌不足將導(dǎo)致精度差和吸光度讀數(shù)錯(cuò)誤升高,。
5. 控制反應(yīng)時(shí)間：觀察加入TMB底物后的顏色變化（例如每10分鐘觀察一次）,，如果顏色太深，則提前加入終止溶液以避免過(guò)強(qiáng)的反應(yīng),，這將導(dǎo)致吸光度讀數(shù)不準(zhǔn)確,。
6. TMB底物  很容易被污染。保護(hù)它免受光線和物理污染,。 
7. 環(huán)境濕度可能對(duì)從試劑盒獲得的結(jié)果產(chǎn)生影響,。如果您工廠的濕度低于60％，建議使用加濕器,。

測(cè)試原理

用于夾心ELISA試劑盒

該試劑盒中提供的微量滴定板預(yù)先涂有對(duì)靶抗原特異的抗體,。然后將標(biāo)準(zhǔn)品或樣品加入適當(dāng)?shù)奈⒘康味ò蹇字校脤?duì)靶抗原特異的生物素綴合的抗體制劑,。接下來(lái),，將與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）綴合的抗生物素蛋白加入每個(gè)微孔板孔中并孵育,。在添加TMB底物溶液后，僅含有靶抗原,，生物素綴合的抗體和酶綴合的抗生物素蛋白的孔將顯示顏色變化,。通過(guò)添加硫酸溶液終止酶 - 底物反應(yīng)，并且在450nm±10nm的波長(zhǎng)下通過(guò)分光光度法測(cè)量顏色變化,。然后通過(guò)比較樣品的OD與標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣品中靶抗原的濃度,。

適用于競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒

該測(cè)定采用競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶免疫測(cè)定技術(shù)。將靶抗原特異性的單克隆抗體預(yù)先包被在微孔板上,。在生物素標(biāo)記的靶抗原和未標(biāo)記的靶抗原（標(biāo)準(zhǔn)品或樣品）之間啟動(dòng)競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng),，其中預(yù)涂的抗體對(duì)靶抗原具有特異性。溫育后,，洗去未結(jié)合的綴合物,。接下來(lái)，將與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）綴合的抗生物素蛋白加入每個(gè)微孔板孔中并孵育,。結(jié)合的HRP綴合物的量是反向正比于樣品中的靶抗原的濃度,。加入底物溶液后，顯色的強(qiáng)度與樣品中靶抗原的濃度成比例,。

結(jié)果計(jì)算

用于夾心ELISA試劑盒

平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,，對(duì)照品和樣品的重復(fù)讀數(shù)，然后減去平均零標(biāo)準(zhǔn)光密度,。通過(guò)繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD和濃度構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并通過(guò)圖表上的點(diǎn)繪制zui佳擬合曲線，或在log-log圖紙上創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,，其中y軸上的目標(biāo)抗原濃度和吸光度x軸,。還建議使用繪圖軟件（例如，曲線專家1.30）,。如果樣品已稀釋,，則從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取的濃度必須乘以稀釋倍數(shù)。

適用于競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒

該測(cè)定采用競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶免疫測(cè)定技術(shù),，因此樣品中的靶抗原濃度與測(cè)定信號(hào)強(qiáng)度之間存在負(fù)相關(guān),。平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品和樣品的重復(fù)讀數(shù),。在對(duì)數(shù) - 對(duì)數(shù)或半對(duì)數(shù)圖紙上創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,，在y軸上記錄目標(biāo)抗原濃度，在x軸上記錄吸光度,。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)繪制zui佳擬合直線,，或者可以通過(guò)回歸分析確定。還建議使用繪圖軟件（例如，曲線專家1.30）,。如果樣品已稀釋,，則從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取的濃度必須乘以稀釋倍數(shù)。

靈敏度

該測(cè)定的靈敏度或檢測(cè)下限（LLD）被定義為可以與零區(qū)分的低蛋白質(zhì)濃度,。通過(guò)將兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差加到二十個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)的平均光密度值并計(jì)算相應(yīng)的濃度來(lái)確定。

夾心ELISA試劑盒的典型數(shù)據(jù)

為了使計(jì)算更容易,，我們繪制標(biāo)準(zhǔn)的OD值（X軸）與標(biāo)準(zhǔn)的已知濃度（Y軸）,，盡管濃度是自變量，OD值是因變量,。然而,，標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值可以根據(jù)測(cè)定性能的條件（例如操作者，移液技術(shù),，洗滌技術(shù)或溫度效應(yīng)）而變化,，建議繪制數(shù)據(jù)的對(duì)數(shù)以建立每個(gè)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。有關(guān)典型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，請(qǐng)參閱套件中包含的手冊(cè),。

確定所有套件精度的一般方法如下所述?？筛鶕?jù)要求提供個(gè)人批量套件的規(guī)格,。

• 測(cè)定內(nèi)精密度（測(cè)定內(nèi)的度）：分別在一個(gè)平板上測(cè)試3個(gè)具有低，中和高水平指數(shù)的樣品20次,。
• 批間精密度（測(cè)定之間的度）：在3個(gè)不同的板上測(cè)試3個(gè)具有低,，中和高水平的樣品的指數(shù)，每個(gè)板中重復(fù)8次,。
• CV（％）= SD /平均值（X）100
  • 分析內(nèi)：CV <10％
  • Inter-Assay：CV <12％

穩(wěn)定性

我們的ELISA試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率,。在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下，我們的試劑盒的失效率在失效日期內(nèi)通常低于5％,。

為盡量減少外部對(duì)我們套件性能的影響,，應(yīng)始終控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。需要特別注意的因素包括：室溫,，空氣濕度和培養(yǎng)箱溫度,。還強(qiáng)烈建議整個(gè)測(cè)定由相同的實(shí)驗(yàn)者從開(kāi)始到結(jié)束進(jìn)行。

分析程序摘要

用于夾心ELISA試劑盒

1. 準(zhǔn)備所有試劑,，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品;
2. 每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,。在37 o C 孵育2小時(shí);
3. 吸出并加入100μL制備的檢測(cè)試劑A（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。在37 o C 孵育1小時(shí);
4. 吸3次洗凈;
5. 加入100μL制備的檢測(cè)試劑B（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）,。在37 o C 孵育1小時(shí);
6. 吸取并洗滌5次;
7. 加入90μL底物溶液,。在37 o C 孵育15-25分鐘;
8. 加入50μL終止液。立即讀取450nm。

適用于競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒

1. 準(zhǔn)備所有試劑,，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品;
2. 每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,。然后立即加入50μL制備的檢測(cè)試劑A（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。搖晃和混合,。在37oC孵育1小時(shí);
3. 吸3次洗凈;
4. 加入100μL制備的檢測(cè)試劑B（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）,。在37oC孵育1小時(shí);
5. 吸取并洗滌5次;
6. 加入90μL底物溶液。在37oC孵育15-25分鐘;
7. 加入50μL終止液,。立即讀取450nm,。

重要的提示

1. 受現(xiàn)有條件和科學(xué)技術(shù)的限制，不可能對(duì)供應(yīng)商提供的原材料進(jìn)行全面的鑒定和分析測(cè)試,。因此,，可能存在一些定性和/或技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。
2. 終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果將與產(chǎn)品的有效性,，終用戶的操作技能和實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),。請(qǐng)確保有足夠的樣本可以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。
3. 不同批次的試劑盒在檢測(cè)范圍,，靈敏度和顯色時(shí)間上可能略有不同,。請(qǐng)*按照套件中包含的使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。電子版僅供參考,。
4. 不要將試劑從一個(gè)試劑盒中混合或替換為另一個(gè)試劑盒,。僅使用制造商提供的試劑。
5. 在儲(chǔ)存和孵育期間保護(hù)所有試劑免受強(qiáng)光照射,。所有試劑瓶蓋應(yīng)緊密關(guān)閉,，以防止液體蒸發(fā)和微生物污染。
6. 當(dāng)次打開(kāi)板時(shí),，孔中可能存在霧狀物質(zhì),。它對(duì)終的測(cè)定結(jié)果沒(méi)有任何影響。在需要之前,，不要從儲(chǔ)存袋中取出微量滴定板,。
7. 試劑準(zhǔn)備和裝載過(guò)程中的程序不正確，以及讀板器的參數(shù)設(shè)置不正確可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。在450±10nm波長(zhǎng)下帶寬為10nm或更小且光密度范圍為0-3OD或更大的微孔板讀數(shù)器可用于吸光度測(cè)量,。請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)并在實(shí)驗(yàn)前調(diào)整儀器。
8. 即使是同一個(gè)實(shí)驗(yàn)者也可能從兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)中獲得不同的結(jié)果,。為了獲得更好的可重復(fù)結(jié)果,，應(yīng)該控制測(cè)定中每個(gè)步驟的操作。此外,，建議在每批次的一般測(cè)定之前進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn),。
9. 每個(gè)套件都經(jīng)過(guò)了幾次嚴(yán)格的質(zhì)量控制測(cè)試。但是，由于某些意外的運(yùn)輸條件或不同的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,，終用戶的結(jié)果可能與我們的內(nèi)部數(shù)據(jù)不一致,。不同批次的試劑盒之間的測(cè)定內(nèi)差異也可能來(lái)自上述因素。
10. 來(lái)自不同制造商的相同產(chǎn)品的套件可能會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果,，因?yàn)槲覀儧](méi)有將我們的產(chǎn)品與其他制造商進(jìn)行比較,。
11. 該試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品以及抗體制備中使用的抗原通常是重組蛋白質(zhì)。不同表達(dá)的序列,，表達(dá)系統(tǒng)和/或純化方法可用于制備重組蛋白,。在我們的試劑盒中，抗體和抗體對(duì)的篩選技術(shù)也存在差異,。因此，我們無(wú)法保證我們的試劑盒能夠檢測(cè)其他公司生產(chǎn)的重組蛋白,。我們不建議使用Reddot Biotech ELISA試劑盒檢測(cè)其他重組蛋白,。
12. 有效期：12個(gè)月。
13. 說(shuō)明書(shū)也適用于48T套件,，但48T套件中的所有試劑都減少了一半,。

預(yù)防

提供與該試劑盒一起使用的終止溶液是酸溶液。使用此試劑時(shí),，請(qǐng)佩戴眼睛,，手，臉和衣物,。

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

1：強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力,，血清、抗體,、耗材,、大部分限制進(jìn)口品等。

2：產(chǎn)品種類齊全,，經(jīng)營(yíng)超過(guò)700多品牌,，基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。

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