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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

complementtechA120 說(shuō)明書

時(shí)間:2017-9-18閱讀:1293

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 Complement Technology正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理,, Complement Technology在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶帶來(lái)的產(chǎn)品,,的服務(wù),,簽約 Complement Technology就是為了給廣大科研客戶帶來(lái)更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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Complement Technology前身是Advanced Research 技術(shù)公司,ART公司成立于1993年,,是一家有著20多年補(bǔ)體研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的生物制品公司,,為用戶提供zui高質(zhì)量的補(bǔ)體類產(chǎn)品及其它生物試劑產(chǎn)品。公司領(lǐng)導(dǎo)均是有數(shù)十年在科研機(jī)構(gòu)從事補(bǔ)體領(lǐng)域研究的科學(xué)家,,確保了公司產(chǎn)品的地位和*品質(zhì),。

 

公司主要產(chǎn)品系列:

一、高純補(bǔ)體蛋白產(chǎn)品系列

該產(chǎn)品系列包括多種高度純化的補(bǔ)體蛋白產(chǎn)品,,包括C1,、C1q、C1q (40% Glycerol),、C1r Enzyme,、C1s ProenzymeC1s Enzyme,、C1 Esterase Inhibitor,、C2 C3 C3,、C3a ,、C3a desArgC3b ,、iC3b,、C3cC3d ,、C4,、C4(concentrated),、C4aC4a desArg,、C4b,、C4bC5,、C,、CC desArg,、C5b,6,、C6C7,、C8,、C9SC5b-9 Complex,、Factor B ,、Factor DFactor H,、Factor H (conc.)Factor I,、Factor P,、Cobra Venom FactorFactor Ba,、Factor Bb,。

二、過(guò)敏毒素產(chǎn)品系列

該系列產(chǎn)品包括C3a,、C3a desArg,、C4aC4a desArg,、C,、CC desArg,。

 

三,、特定因子清除的血清產(chǎn)品

該系列產(chǎn)品包括多種通過(guò)免疫親和色譜清除補(bǔ)體因子的血清產(chǎn)品,具體包括以下補(bǔ)體清除的血清:C1q-Dpl,、C2-Dpl,、C3-DplC4-Deficient Guinea Pig,、C4-Dpl ,、C5-Dpl ,、C6-DplC7-Dpl,、C8-Dpl,、C9-DplFactor B-Dpl,、Factor D-Dpl ,、Factor H-DplFactor I-Dpl,、Factor P-Dpl,、C3/C4 Inactivated SerumC1q/Factor D-Dpl ,。

四,、補(bǔ)體相關(guān)抗體產(chǎn)品系列

該系列產(chǎn)品為抗補(bǔ)體蛋白的多款抗體產(chǎn)品,適用于多個(gè)免疫學(xué)及補(bǔ)體研究領(lǐng)域,。具體包括Goat Anti-Human C1q,、Goat Anti-Human C2Goat Anti-Human C3 ,、Rabbit Anti-Human C3a,、Goat Anti-Human C4Rabbit Anti-Human C4a,、Goat Anti-Human C5,、Rabbit Anti-Human rCGoat Anti-Human C6,、Goat Anti-Human C7,、Goat Anti-Human C8Goat Anti-Human C9,、Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG),、Goat Anti-Human Factor B Goat Anti-Human Factor D,、Goat Anti-Human Factor H,、Goat Anti-Human Factor IGoat Anti-Human Factor P,、Goat Anti-Human C1-INH ,、Rabbit Anti-Human Vitronectin

五,、血清產(chǎn)品系列

該產(chǎn)品系列包括正常的人,、小型豬、大鼠,、小鼠血清產(chǎn)品,。

六,、補(bǔ)體檢測(cè)相關(guān)試劑

該系列產(chǎn)品為多種常用的補(bǔ)體研究緩沖液及紅細(xì)胞產(chǎn)品:包括GVB緩沖液(含鈣鎂離子或不含鈣鎂離子)、GVBE緩沖液 ( EDTA),、SGVB緩沖液(低離子強(qiáng)度/葡萄糖),、VBS緩沖液 (含鈣鎂離子)EA (Ab-sensitized sheep E),、Es (sheep E),、Er (rabbit E)Zymosan (預(yù)活化酵母聚糖) ,、MgEGTA緩沖液和MCAR緩沖液,。

 

名稱:       C5 Protein          

目錄號(hào):      A120

尺寸:          250μg/瓶

濃度:           1.0 mg / mL (見實(shí)際濃度分析證書)

形式:                          冷凍液體

活性:                      >正常人血清標(biāo)準(zhǔn)> 80%。

純度:                         > 95%,,通過(guò)SDS-PAGE

緩沖液:                        10mM磷酸鈉,,145mM NaCl,pH7.2

消光 Coeff進(jìn)行,。        阿 280 納米=  1.03以1.0毫克/毫升

分子量:     190,000 Da(2鏈)

防腐劑:              無(wú),,0.22μm過(guò)濾

存儲(chǔ):                      -70 Ò C或以下。避免凍融,。 

資源:                       正常 人血清(通過(guò)認(rèn)證測(cè)試顯示為陰性

用于 HBsAg,,HTLV-I / II,STS,,以及針對(duì)HCV,,HIV-1和HIV-II的抗體)。

注意事項(xiàng):               使用正常的注意事項(xiàng)處理人體血液制品,。

起源:                        在制造美國(guó)。

一般說(shuō)明

天然人C5是含有兩個(gè)二硫鍵的鏈的天然糖基化(1.6%)多肽,。C5對(duì)于形成膜攻擊復(fù)合物(MAC)是必需的,,并且被所有三種補(bǔ)體激活途徑激活。補(bǔ)體活化的每個(gè)途徑產(chǎn)生與靶表面結(jié)合的蛋白水解酶復(fù)合物(C3 / C5轉(zhuǎn)化酶)(Ross,,GD(1986)),。這些酶在C5的較大的α鏈中切割肽鍵,釋放的過(guò)敏毒素 C(74個(gè)氨基酸)并活化C5b,。這是C5b-9復(fù)合物組裝中*的蛋白水解步驟,。C5b是不穩(wěn)定的,但是它保持與活化復(fù)合物短暫的時(shí)間(約2分鐘)結(jié)合,,在此期間,,它將從單獨(dú)的C6與周圍的流體結(jié)合形成C5b6 ,或者它衰變和聚集,,并且不再能夠形成MAC,。的體C5b ,,6復(fù)合物也可以保持結(jié)合于C3 / C5轉(zhuǎn)化酶的單一的C7其中結(jié)合公開了一個(gè)膜結(jié)合區(qū)和C5b,6,7-可部分插入到雙脂質(zhì)靶細(xì)胞的層,。到目前為止,,復(fù)合物可以從靶細(xì)胞擴(kuò)散并進(jìn)入附近細(xì)胞的膜。這被稱為旁觀者裂解或“反應(yīng)性裂解”,,可能是病理學(xué)的重要來(lái)源,。每個(gè)C5b-7復(fù)合物可以結(jié)合一個(gè)C8蛋白質(zhì)分子,這導(dǎo)致復(fù)合物更牢固地插入到膜中,。該復(fù)合物結(jié)合C9并且每個(gè)結(jié)合的C9可以結(jié)合另外的C9起始形成含有多達(dá)18個(gè)C9分子的環(huán)結(jié)構(gòu)(Podack,,ER(1984))。與一個(gè)或多個(gè)C9的C5b-9復(fù)合物被稱為補(bǔ)體的膜攻擊復(fù)合物(MAC),。不是所有的C5b-8復(fù)合物都有完整的C9環(huán),,平均每個(gè)C5b-8復(fù)合物只有三個(gè)C9。C9完成的蛋白質(zhì)環(huán)形成電子顯微照片上看到的孔,,并導(dǎo)致代謝物和小蛋白質(zhì)從細(xì)胞中泄漏以及水進(jìn)入細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),。如果足夠數(shù)量插入細(xì)胞膜,則由于滲透壓而流入細(xì)胞的水會(huì)破裂細(xì)胞膜,,從而釋放靶細(xì)胞(或旁觀者細(xì)胞)的全部?jī)?nèi)容物,。任一過(guò)程都可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡。原本以為這只需要每個(gè)細(xì)胞一個(gè)C5b-9復(fù)合體(簡(jiǎn)稱“一擊”理論)(Rommel FA和Mayer,,MM(1973)),,但這可能是不正確的,例如紅細(xì)胞需要大約850個(gè)C5b-9復(fù)合物,,如通過(guò)C7分子的數(shù)目所測(cè)量的,,用于裂解發(fā)生(Bauer,J,。等人(1979)),。通過(guò)CD59保護(hù)免受MAC的宿主細(xì)胞需要足夠數(shù)量的C5b-9至結(jié)合所有的CD59,然后再加上大約850個(gè)C5b-9,,由于其大小和由于這種細(xì)胞中存在多種防御機(jī)制,,有核細(xì)胞的裂解需要更多的C5b-9復(fù)合物。                                     

物理特性與結(jié)構(gòu)

分子量:  190,000 Da,,由兩個(gè)二硫鍵連接,。α鏈為115,000Da,β鏈為75,000Da,。α和β鏈通過(guò)二硫鍵連接,。C5 的pI為4.7?5.5。     

由C3 / C5轉(zhuǎn)化酶切割C5 從α鏈的N末端釋放C(74個(gè)氨基酸片段,,8268Da脫糖基化,,10,400 + 1000個(gè)糖基化),。C5b片段(181,000Da)與C6結(jié)合以引發(fā)膜攻擊復(fù)合物的自發(fā)組裝。   

 CAS號(hào):  80295-53-0

功能

參見上面的一般說(shuō)明,。

測(cè)定

C5的zui簡(jiǎn)單的測(cè)定法是使用C5耗盡的人血清,,并測(cè)量作為添加的測(cè)試樣品或標(biāo)準(zhǔn)純化C5的濃度的函數(shù)的EA(經(jīng)典途徑)或Er(替代途徑)的裂解。每個(gè)*的應(yīng)用程序可能需要確定適當(dāng)?shù)臈l件,。然而,,典型的測(cè)定法將涉及在濕冰上混合25μL含有GVB ++稀釋的C5-Dpl,含有C5的樣品以含有1至10ng C5,,以及足夠的GVB ++使體積達(dá)到300μL,。zui后應(yīng)添加以GVB ++稀釋的EA(200μL中的3×10 7個(gè)細(xì)胞)。純化的C5或正常人血清(NHS)可用作C5的來(lái)源,。將反應(yīng)混合物在37℃溫育30分鐘ö C和1 毫升加入冷GVBE的,。然后將反應(yīng)混合并離心以將未裂解的細(xì)胞旋轉(zhuǎn)下來(lái)。然后在415nm處分析上清液中釋放的血紅蛋白,,并與不含C5的空白對(duì)照(背景裂解對(duì)照),,并用275μL水代替GVB ++和25μLC5-Dpl(100%裂解對(duì)照)孵育細(xì)胞。            

 已經(jīng)使用預(yù)先裝載有C1(EAC1細(xì)胞)的EA或經(jīng)預(yù)處理的經(jīng)典途徑C5轉(zhuǎn)化酶(EAC1423細(xì)胞)描述了許多其它測(cè)定法,。  然而,,所有這些測(cè)定都需要使用多種純化的補(bǔ)體成分或更難以準(zhǔn)備的試劑(Dodds,AW和Sim,,RB(1997); Morgan,,BP(2000); Tack,BF等(1981) ),。

應(yīng)用

參見上面的一般說(shuō)明,。

體內(nèi)

C5的正常血清濃度為75μg/ mL (正常范圍為55?113μg/ mL)。  合成的主要部位是肝臟,,但C5也在肺(由II型肺泡細(xì)胞),,脾,腸,,單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中制成 。刺激許多其他補(bǔ)體蛋白增加生物合成的細(xì)胞因子不影響C5表達(dá)水平,。C5不是急性期蛋白,。   

規(guī)

 許多蛋白質(zhì)和其他血漿成分對(duì)C5b-9復(fù)合物的溶解活性具有抑制作用。  大多數(shù)可以在C5b-7 期  后與形成復(fù)合物相互作用如果含有C5b的復(fù)合物不能插入膜中,,它們可能自我聚集或結(jié)合到zui普遍的S蛋白的調(diào)節(jié)蛋白,。  S蛋白(也稱為玻連蛋白)是一種80,000Da血漿蛋白,與不能插入靶細(xì)胞膜的C5b-9復(fù)合物結(jié)合,。這減少對(duì)附近宿主細(xì)胞的損害,。許多其他血清組分抑制或部分地由體C5b-9抑制裂解和這些包括SP40 ,,40(也被稱為簇和載脂蛋白 J)和許多血漿脂蛋白復(fù)合物(LDL,HDL等),。   

沒(méi)有C5b 失活劑對(duì)于C3b或C4bBP和因子I對(duì)于C4b起到像H和I的因子的作用,。  也就是說(shuō),C5b不是 通過(guò)任何已知的系統(tǒng)蛋白水解轉(zhuǎn)化成iC5b形式的,。

宿主細(xì)胞通過(guò)各種機(jī)制保護(hù)自己免受C5b-9的侵害,。膜蛋白DAF,MCP和CR1抑制C3 / C5轉(zhuǎn)化酶的形成,,防止MAC形成,。CD59,也被稱為“同源限制因子”和“ 保護(hù)素 ”,,是 細(xì)胞膜的 18,000至20,000Da普遍存在的組分,,其在結(jié)合并抑制 C5b-8和C5b-9復(fù)合物的溶解電位方面非常有效。CD59的物種特異性不是的,,許多哺乳動(dòng)物CD59確實(shí)抑制或部分抑制其他物種的MAC,。觀察到的特異性似乎是由于一種動(dòng)物的C8與另一種動(dòng)物的CD59之間的不相容性。像DAF一樣,,CD59含有一個(gè)GPI錨(一個(gè)插入到細(xì)胞的膽脂層的翻譯后添加的脂質(zhì)尾巴),。疾病PNH由附著GPI尾部的酶的喪失引起,從而剝奪細(xì)胞使C3 / C5轉(zhuǎn)化酶失活的能力和使C5b-9失活的能力,。這導(dǎo)致對(duì)長(zhǎng)壽命血細(xì)胞如紅細(xì)胞和血小板的補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷和zui終的裂解,。             

 在大多數(shù)由IL-1,IL-6,,TNF-α和LPS合成C5的細(xì)胞中C5的生物合成被上調(diào),。

遺傳學(xué)

人染色體位置9q 32-34。登錄號(hào)M57729,。小鼠染色體2. 登錄號(hào)J05234,。人類基因組結(jié)構(gòu):該基因跨越79 kb與41個(gè)外顯子。     

不足之處

由于在實(shí)驗(yàn)室近交小鼠的育種期間的早期步驟中損失,,大量常見的小鼠品系缺乏C5,。  六個(gè)C5缺陷株是常見的A / HeJ,AKR / J,,DBA / 2J,,NZB / B1NJ,SWR / J和B10.D2 / oSnJ,。  由于在cDNA的5'末端附近存在兩個(gè)堿基對(duì)缺失,,所有缺少C5 。  顯然,生存不依賴于C5或形成MAC的能力,,然而,,這些小鼠已顯示出許多免疫系統(tǒng)異常,并且通常更易感染許多感染性疾病,。類似地,,已經(jīng)報(bào)道了幾個(gè)C5缺陷家族。C5缺乏的人類具有嚴(yán)重受損的殺菌和趨化活性,。反復(fù)感染是常見的,,奈瑟氏球菌屬物種是一個(gè)特別嚴(yán)重的問(wèn)題。     

疾病

  見上述缺陷,。

注意事項(xiàng)/毒性/危險(xiǎn)

這種蛋白質(zhì)從人血漿中純化,,因此必須使用適合于處理任何血液衍生產(chǎn)品的預(yù)防措施,即使通過(guò)認(rèn)證測(cè)試證明該來(lái)源對(duì)于HBsAg,,HTLV-I / II,,STS和HCV抗體是陰性的, HIV-1和HIV-II,。       

僅供研究使用,。

不適用于人或藥物使用。

 

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