ALSTEM是一家位于灣區(qū)的早期生物技術(shù)公司,，擁有快速擴展的產(chǎn)品和服務(wù)組合,，為生物制藥和學術(shù)機構(gòu)提供服務(wù),。受到加利福尼亞干細胞研究承諾的啟發(fā),，ALSTEM于2012年由具有iPS細胞重編程和基因組編輯技術(shù)專業(yè)知識的科學家創(chuàng)立,。

hTERT Cell Immortalization Kit: #CILV02

hTERT細胞永生化試劑盒：＃CILV02

描述

*，原代細胞僅在培養(yǎng)中經(jīng)歷預(yù)定的和有限數(shù)量的細胞分裂,。在有限的群體倍增（其數(shù)量因物種,，細胞類型和培養(yǎng)條件而異）之后,，原代細胞進入一種狀態(tài)，即所謂的復(fù)制衰老,，它們不再分裂,。為了超越衰老，存在幾種使培養(yǎng)中的哺乳動物細胞永生化的方法,。近發(fā)現(xiàn)的細胞永生化方法是通過端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶蛋白（TERT）的表達,。它對受端粒長度影響大的細胞特別有用，包??括許多人類細胞類型,。這種蛋白質(zhì)通常在大多數(shù)體細胞中沉默,。當外源引入hTERT時，這些細胞能夠通過維持足夠的端粒長度來避免復(fù)制性衰老,。

• 概觀

用含有hTERT的重組慢病毒感染細胞，用嘌呤霉素篩選產(chǎn)生自己的永生化細胞

• 程序

1. 將靶細胞以1-2×10 ^5個細胞/孔的密度鋪在6孔板的一個孔中,。
2. 第二天,，將濃縮的重組慢病毒在37℃水浴中解凍，并在解凍時立即將其從浴中取出,。
3. 在4μlTransPlus試劑（ALSTEM,，目錄號V050）存在下，用4-20μl/孔上清液感染6孔板中的靶細胞,。
   注意：TransPlus試劑是一種聚陽離子,，可中和電荷相互作用，從而增加假病毒衣殼與細胞膜之間的結(jié)合,。
4. 第二天,，去除病毒上清液并將適當?shù)?生長培養(yǎng)基加入細胞中并在37℃下孵育。
5. 孵育72小時后,，將細胞繼代培養(yǎng)到2×100mm培養(yǎng)皿中并加入適量的嘌呤霉素以穩(wěn)定細胞系產(chǎn)生,。
6. 選擇后10-15天，挑選克隆進行擴增,，篩選陽性克隆,。
   注意：解凍后，我們建議不要將上清液再次冷凍以備將來使用,，因為病毒滴度會顯著下降

上海起發(fā)實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務(wù)商

1：強大的進口輻射能力,，血清,、抗體、耗材,、大部分限制進口品等,。

2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營超過700多品牌,，基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材,。

3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨,。

4：富有競爭良好的信譽,，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)?？蛻舭ㄇ迦A,、北大、交大,、復(fù)旦、中山等100多所高校,，ROCHE,，阿斯利康、國藥,、fisher等知藥企,。

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc,；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理,。

7：我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發(fā)，歡迎合作,。