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核酸蛋白  全能檢測

如果你還不知道熒光定量PCR儀可以用來做蛋白檢測和分析，

那你就是“奧特曼”啦,！

如果你正好在開展蛋白尤其是膜蛋白相關(guān)的科研工作,，

那么恭喜你，

你又可以多一個(gè)好使的研究工具啦,！

它就是新一代全光譜熒光定量PCR儀

qTOWERiris系列

全光譜檢測,，拓展蛋白應(yīng)用

qTOWERiris突破性地將檢測光譜范圍拓寬到了波長更短的紫外光區(qū)域，覆蓋從近紫外UVA到近紅外NIR的全光譜范圍,，波長從360nm到730nm,。這一革新性的變化，大大擴(kuò)展了熒光定量PCR儀的應(yīng)用場景,。

1,、 近紫外光區(qū)域的核酸檢測應(yīng)用，為做核酸多重檢測的用戶提供了更多的選擇,，比如可以檢測ATTO390,、ATTO425核酸標(biāo)記熒光染料的信號；

2,、 蛋白檢測方面的應(yīng)用,，比如說可以利用蛋白熔解曲線分析功能，開展CPM,、ANS等熒光染料標(biāo)記的蛋白熱穩(wěn)定性檢測,、蛋白與配體互作研究,、蛋白結(jié)晶和儲存體系優(yōu)化等；

在蛋白相關(guān)研究中,，膜蛋白以其強(qiáng)大的功能性和生物學(xué)活性,，成為非常重要的研究靶點(diǎn)，如細(xì)胞的增殖和分化,、能量轉(zhuǎn)換,、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)運(yùn)輸?shù)?，都與膜蛋白息息相關(guān),，而且估計(jì)有60%左右的藥物作用都與膜蛋白有關(guān)。

由于在膜蛋白樣品制備過程中,，需要用到一定濃度的表面活性劑,，來使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態(tài)下膜蛋白結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性，因此膜蛋白樣品溶液中往往含有較多的表面活性劑,。如果用普通的熒光染料如SYPRO Orange去標(biāo)記膜蛋白,，因其溶解性不好、背景噪音高而達(dá)不到好的檢測效果,此時(shí)如果換成CPM熒光染料（C24H22N2O4）就能很好地實(shí)現(xiàn)膜蛋白熔解曲線檢測和分析,。

CPM的激發(fā)光Ex為384nm,，檢測光Em為470nm，在近紫外區(qū)域,，那么問題來了,，普通的熒光定量PCR儀，激發(fā)光譜往往從450nm左右的藍(lán)光區(qū)域開始,，沒有辦法實(shí)現(xiàn)CPM的檢測,。而耶拿公司的qTOWERiris的紫外通道，檢測光譜正好匹配CPM染料,，很好地滿足了CPM標(biāo)記的膜蛋白的高靈敏度檢測,。

除了CPM熒光染料，ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）也是一種常用的蛋白標(biāo)記熒光染料,，和蛋白的結(jié)合性好,，本底低。ANS的激發(fā)光Ex為380nm,，檢測光Em為470nm,，也正是位于qTOWERiris紫外通道的檢測范圍。因此,，qTOWERiris能為開展蛋白研究的用戶提供非常方便的熔解曲線分析,，進(jìn)而快速獲得蛋白熱穩(wěn)定性、蛋白和小分子互作、蛋白結(jié)晶條件優(yōu)化等方面的信息,。

     圖1. 蛋白熔解曲線原始信號圖

?qTOWERiris還能為您帶來可靠的檢測結(jié)果和人性化的使用體驗(yàn),。

溫控精準(zhǔn)，重復(fù)性好

延續(xù)了耶拿PCR儀經(jīng)典的鍍金純銀樣品槽和快準(zhǔn)穩(wěn)的高速PCR技術(shù),，最大升溫速率可達(dá)8℃/s,，溫度準(zhǔn)確性±0.1℃，精準(zhǔn)的溫控是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確熔解曲線分析的重要前提,，再結(jié)合先進(jìn)的光學(xué)檢測系統(tǒng),，不存在樣品間的邊緣效應(yīng)，提供更好的檢測重復(fù)性,。