摘要:
LUC已成為了解植物致病機(jī)制和信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)鍵工具,,UVP ChemStudio 695可滿足您所有的成像需求
熒光素酶互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)(Luciferase Complementation Assay簡(jiǎn)稱LUC,LCI,,SLC,,SFLC,LCA等)是一種以熒光素為底物來(lái)檢測(cè)熒光素酶活性的植物活體成像實(shí)驗(yàn),。實(shí)驗(yàn)中,,熒光素酶蛋白被切成N端和C端2個(gè)功能片段,即NLuc和CLuc,。在一個(gè)實(shí)驗(yàn)體系中,,待檢測(cè)的2個(gè)目標(biāo)蛋白分別與NLuc和CLuc融合,如果2個(gè)目標(biāo)蛋白相互作用,,則熒光素酶的NLuc和CLuc在空間上會(huì)足夠靠近并正確組裝,,從而發(fā)揮熒光素酶活性,氧化底物熒光素產(chǎn)生z強(qiáng)波長(zhǎng)在560nm左右的生物熒光,。
LUC實(shí)驗(yàn)流程如下:
LUC實(shí)驗(yàn)?zāi)壳耙殉蔀楦咝,?蒲兄参飳W(xué)熱點(diǎn)研究手段,主要用于植物蛋白互作研究,。通過(guò)觀察分析熒光素酶與底物之間的相互作用,,研究人員可以發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)。蛋白互作研究可用于植物學(xué)多個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域:如真菌,、細(xì)菌等的植物致病機(jī)制研究,,為植物保護(hù)提供有力支持;植物激素,、代謝信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)研究,,為研究植物的生長(zhǎng)、發(fā)育和抗寒,、抗旱,、耐鹽等抗逆機(jī)制提供有力的研究工具,。
中國(guó)科學(xué)院上海植物生理生態(tài)研究所林鴻宣院士研究團(tuán)隊(duì)在植物學(xué)領(lǐng)域頂級(jí)期刊《Molecular Plant》(影響因子26)發(fā)表重要研究成果,系統(tǒng)解析了α/β水解酶家族成員STH1基因在水稻鹽脅迫應(yīng)答與生殖發(fā)育協(xié)同調(diào)控中的分子機(jī)制,。該研究通過(guò)正向遺傳學(xué)方法從非洲稻(Oryza glaberrima)中成功克隆STH1基因,,并揭示其通過(guò)三個(gè)獨(dú)立且協(xié)同的分子功能模塊(膜脂代謝調(diào)控、蛋白穩(wěn)定性調(diào)控,、光周期信號(hào)整合)實(shí)現(xiàn)環(huán)境適應(yīng)與發(fā)育進(jìn)程的動(dòng)態(tài)平衡,。研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因(LUC)實(shí)驗(yàn)證實(shí),STH1通過(guò)直接激活Hd3a啟動(dòng)子活性正向調(diào)控水稻開(kāi)花進(jìn)程,,而鹽脅迫誘導(dǎo)的STH1表達(dá)抑制則導(dǎo)致開(kāi)花延遲,,使植株優(yōu)先將資源分配至脅迫防御系統(tǒng)。
值得注意的是,,德國(guó)耶拿公司UVP ChemStudio PLUS多功能成像系統(tǒng)憑借其高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)能力,,成功實(shí)現(xiàn)了煙草葉片中熒光素酶信號(hào)的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)捕捉,為解析STH1-Hd3a轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)證據(jù),。該研究不僅創(chuàng)制了耐鹽性提升67.14%的優(yōu)異等位變異種質(zhì),,更為作物抗逆與穩(wěn)產(chǎn)協(xié)同改良提供了理論依據(jù)。
德國(guó)耶拿UVP ChemStudio 695多功能成像儀可支持LUC實(shí)驗(yàn)的植物活體成像,,具有605萬(wàn)高分辨率相機(jī),,F(xiàn)0.95大孔徑鏡頭,高光電轉(zhuǎn)化率(78%),,低讀出噪音([email protected]),,低暗電流( 0.0007 e/p/s )及相對(duì)-60℃的制冷能力,結(jié)合矩陣式RGB三色LED,、氙燈和近紅外激光等高強(qiáng)度光源,,可為客戶帶來(lái)高清晰度,高靈敏度的成像體驗(yàn),!這款儀器不僅適用于熒光素酶互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)的植物活體成像,,亦可兼容常規(guī)如核酸膠、蛋白膠,、化學(xué)發(fā)光WB和熒光WB等成像實(shí)驗(yàn),,滿足您所有的成像需求!
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