在生化制備中常用的方法有： 1. 反復凍溶法 原理：因突然冷凍,，細胞內冰晶的形成及胞內外溶劑濃度的突然改變而破壞細胞。 方法：將待破碎的細胞在-20度以下冰凍,，室溫融解,，反復幾次，由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,，使細胞結構破碎,。 特點：此法適用于組織細胞，多用于動物性材料,，對微生物細胞作用較差,。
2. 急熱驟冷法 將材料投入沸水中，維持85-90分鐘,，至水浴中急速冷卻,，此法可用于細菌及病材料。
3. 超聲波處理 用一定功率的超聲波處理細胞懸液,，使細胞急劇震蕩破裂,，此法多適用于微生物材料，用大腸桿菌制備各種酶,，常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,，頻高于15～20KHz的超聲波在高強度聲能輸入下可以進行細胞破碎。其破碎機理：可能與空化現象引起的沖擊波和剪切力有關,。超聲破碎的效率與聲頻,、聲能、處理時間,、細胞濃度及種類型等因素有關,。 行細胞破碎。其破碎機理：可能與空化現象引起的沖擊波和剪切力有關,。超聲破碎的效率與聲頻,、聲能,、處理時間、細胞濃度及種類型等因素有關,。 特點：操作簡單,，重復性較好，節(jié)省時間,；多用于微生物和組織細胞的破碎,。 存在問題：超聲波破碎在實驗室規(guī)模應用較普遍，處理少量樣品時操作簡便,，液量損失少,，但是超聲波產生的化學自由基團能使某些敏感性活性物質變性失活。而且大容量裝置聲能傳遞,，散熱均有困難,，應采取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用,?？栈饔檬羌毎茐牡闹苯釉颍瑫r會產生活性氧,，所以要加一些巰基保護劑,。
