高效液相色譜儀的結構構造和原理應用
液相色譜是一類分離與分析技術,,其特點是以液體作為流動相,,固定相可以有多種形式,,如紙,、薄板和填充床等,。在色譜技術發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,,根據(jù)固定相的形式產生了各自的命名,,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜,。
高效液相色譜儀的構造
高效液相色譜系統(tǒng)主要由流動相儲液瓶,、輸液泵、進樣器,、色譜柱,、檢測器和記錄儀組成,其整體組成類似于氣相色譜,,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整,。高效液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),進樣系統(tǒng)要求進樣便利,、切換嚴密,。同時,由于液體流動相黏度遠遠高于氣體,為了減低柱壓,,高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,,長度也遠小于氣相色譜柱。
基本原理
高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,,HPLC),,是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上,于20世紀60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因為較小的填充顆粒具有高柱效,,但會引起高阻力,,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜,。
使用高效液相色譜時,,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,,后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質,。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛地應用于化學和生化分析中,。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質的差別,,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,,適于分析高沸點不易揮發(fā),、分子量大、不同極性的有機化合物,。