細(xì)胞收縮力測定系統(tǒng)Cell contractility assay,，包括細(xì)胞微柱陣列,，和細(xì)胞收縮力測試多孔板，細(xì)胞收縮力測試24孔板,，細(xì)胞收縮力測試96孔板,細(xì)胞收縮力測試384孔板

一,、提供細(xì)胞收縮力測試系統(tǒng)---細(xì)胞牽引力顯微鏡

歐美進(jìn)口設(shè)備和技術(shù)保證！

微柱培養(yǎng)陣列及其特點(diǎn)：

●每張陣列尺寸為3.2 x 3.2 mm,，含10 x 18個(gè)觀測點(diǎn),，每個(gè)觀測點(diǎn)有170個(gè)按六邊形排列的微柱

●微柱直徑5 μm,，高15 μm,，中心間距為12 μm

●微柱彈力范圍1-3 nN（有其他需求可定制）

●標(biāo)準(zhǔn)涂層是纖維連接蛋白或膠原蛋白I

●細(xì)胞外基質(zhì)（EDM）蛋白包可按找需求定制

軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細(xì)胞圖片中提取細(xì)胞力學(xué)參數(shù)（力/微柱、微柱坐標(biāo),、微柱形變,、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等）（圖3）,。分析結(jié)果可保存為Excel表格,，便于后續(xù)處理,。

圖3

二,、提供細(xì)胞收縮力測試系統(tǒng)--微柱陣列

細(xì)胞收縮力測定
量化細(xì)胞在基質(zhì)上施加的力

微柱

讀出
牽引力和細(xì)胞皮質(zhì)收縮測量，具有底物剛度控制的遷移分析

標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)限制
將細(xì)胞鋪板在含有熒光珠的彈性凝膠上,。 通過定量嵌入彈性凝膠中的熒光珠的位移來測量細(xì)胞力,，然后將其轉(zhuǎn)化為力。 然而,，當(dāng)力通過該連續(xù)的彈性基底傳播時(shí),，該系統(tǒng)引起限制，從而使收縮性測量的特異性降低,。

細(xì)胞收縮性評估
使用被稱為由微柱組成的微力感應(yīng)陣列的基板,，可以在從微柱頂點(diǎn)位移推導(dǎo)出力的位置獨(dú)立發(fā)揮作用,。

可以測量高達(dá)數(shù)十納米的撓度,，從而實(shí)現(xiàn)可靠的力測量，約為1nN。

EXAMPLES

cell micropillars

Fibroblasts in micropillars substrate [1]

Fibroblasts on µFSA substrate [2]

(A) Actin filaments of fibroblasts

(B) Actin filaments merged with image of µFSA substrate coated with fibronectin (Red)

REFERENCES

[1] Trichet, L. et al. (2012). Proceedings of the National Academy of Sciences, 109(18), 6933-6938.

[2] Gupta, M. et al. (2015). Methods in cell biology, 125, 89-308. 

二,、細(xì)胞收縮力高通量檢測多孔板-24、96,、384孔板：

圖1：原理圖：

1.1）細(xì)胞收縮力測試24孔板

1.2）細(xì)胞收縮力測試96孔板

1.3）細(xì)胞收縮力測試384孔板

該可高通量檢測細(xì)胞收縮力的多孔板是軟膜底嵌有熒光微圖案的*微孔板,，上面有100,000多個(gè)均勻分布的X或+形的具有粘性蛋白質(zhì)微圖案，細(xì)胞沉降并附著在其上,，嵌入板中的X具有彈性,，因此每當(dāng)細(xì)胞收縮時(shí)它們就會收縮。 X帶有分子標(biāo)記,，可以發(fā)出熒光,，從而可以成像和量化縮小的形狀。

可以成像和定量,，因此研究人員可以將X或十字架的變形與單個(gè)細(xì)胞或成千上萬個(gè)細(xì)胞的一定量的力相關(guān)聯(lián),。該技術(shù)還為研究人員提供了查看單個(gè)細(xì)胞鈣反應(yīng)以及它們與細(xì)胞強(qiáng)度之間的關(guān)系的能力。

該技術(shù)也可以用于藥物發(fā)現(xiàn),。研究人員可以快速,，輕松地測試不同的治療分子,，以了解它們?nèi)绾斡绊懠?xì)胞力以及是否可以糾正任何潛在的力問題,。

在具有可控剛度的彈性薄膜中嵌入用戶設(shè)計(jì)的粘合劑和熒光微圖案，形成非常密集但均勻的陣列(> 120微米/每平方毫米),。100000個(gè)患者來源的單細(xì)胞(地從疾病起源的人體組織中獲得)獨(dú)立地定位并粘附在微圖案上(每個(gè)微圖案一個(gè)細(xì)胞),，它們對該微圖案施加牽引力并明顯改變其形狀，從而能夠在*的吞吐量下對細(xì)胞收縮性進(jìn)行直觀的基于圖像的評估,。

1)熒光彈性可收縮表面的微圖案化
—在具有可控剛度的彈性薄膜中嵌入用戶設(shè)計(jì)的粘合劑和熒光微圖案,，形成非常密集但均勻的陣列(> 120微米/每平方毫米)。100000個(gè)患者來源的單細(xì)胞(地從疾病起源的人體組織中獲得)獨(dú)立地定位并粘附在微圖案上(每個(gè)微圖案一個(gè)細(xì)胞),，它們對該微圖案施加牽引力并明顯改變其形狀,，從而能夠在*的吞吐量下對細(xì)胞收縮性進(jìn)行直觀的基于圖像的評估。

 2)基于圖像的受控單細(xì)胞收縮性的動力學(xué)可視化
—例如,，384孔板內(nèi)的每個(gè)附著細(xì)胞的微圖案在延長的時(shí)間內(nèi)以精細(xì)的時(shí)間分辨率被獨(dú)立監(jiān)控,，以直接觀察收縮行為的全部范圍,，從緊張性收縮到誘導(dǎo)性收縮或松弛,，以及任一效應(yīng)的作用窗口。選擇“x”形微圖案以小化細(xì)胞-基底接觸面積,，同時(shí)大化細(xì)胞擴(kuò)散面積,，從而在不同位置產(chǎn)生放大和集中的力。由于每個(gè)微圖案都與其他微圖案機(jī)械分離，粘附的細(xì)胞不會將應(yīng)變傳遞給相鄰的微圖案,，從而確保對群體中每個(gè)單個(gè)細(xì)胞的收縮力進(jìn)行可靠的評估,。

3)單細(xì)胞收縮性的自動化和直觀的圖像分析
—基于該方法的檢測產(chǎn)生直觀、明確的收縮信號——提供直接的圖像分析,，以從成像群體中的每個(gè)單細(xì)胞獲得定量和可靠的數(shù)據(jù),。

可以同時(shí)獲取1000多個(gè)均勻圖案的單細(xì)胞的強(qiáng)大的收縮性數(shù)據(jù)，并與96-和384孔板格式無縫地集成,，以促進(jìn)大規(guī)模的藥物篩選