詳細介紹
細胞力學細胞體積測定系統(tǒng),,實時跟蹤貼壁細胞的細胞體積,
細胞體積是細胞力學的一個關鍵參數(shù),,對理解細胞粘附相關過程和改進實驗方法具有重要意義
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Cell volume, ion pumps
STANDARD CULTURE LIMITATION
有幾種生理和病理學過程,,其中細胞經(jīng)歷體積變化。 但是,,沒有可靠的方法可用于實時準確地測量貼壁細胞的體積,。
細胞體積評估的好處
將細胞培養(yǎng)在光學透明的腔室中,該腔室可以準確地確定其隨時間的體積,,并可以并行跟蹤負責體積變化的生化過程,,例如激活離子泵。
例子
從相間期到Raji細胞有絲分裂的體積追蹤[2],。
(A)將細胞放置在由FITC-Dextran補充的培養(yǎng)基中,,其高度由立柱設定,其高度已校準到聚二甲基硅氧烷中,。 底部圖片:細胞在熒光圖像上不顯示熒光(比例尺為20 mm),。
(B)對應于(A)中虛線的熒光輪廓:熒光強度的大值和小值分別對應于腔室的大高度(背景)和零高度(支柱)。 右:這些值用于校準信號并計算細胞的光學厚度,。
(C)后,,通過積分整個細胞區(qū)域的總熒光強度獲得細胞體積。
(A)HeLa細胞的體積軌跡,。 在開始和結(jié)束時兩個體積超調(diào)對應于有絲分裂的瞬時體積增加,,di一個對應于母細胞,第二個對應于子細胞,。
(B)(A)中具有FXm的細胞的原始熒光圖像,。 比例尺50毫米
REFERENCES
[1] Zlotek-Zlotkiewicz, E. et al. (2015). Journal of Cell Biology, 211(4), 765–774.
[2] Cadart, C et al. (2017). Methods in Cell Biology, 139,103-120.
細胞被均勻地限制/壓縮在兩個亞微米分辨率的兩個平行表面之間,。不同的限制高度(例如1um – 300um),允許長期細胞培養(yǎng)和細胞增殖,,同時保持對封閉的控制
與高分辨率光學顯微鏡系統(tǒng)兼容,,可以處理足夠多的細胞以進行完整的基因表達分析,可與生物功能化的微結(jié)構化底物和/或不同的基質(zhì)(幾何形狀控制)結(jié)合使用
可以與凝膠結(jié)合(硬度控制),,兼容任何細胞培養(yǎng)底物(培養(yǎng)皿至96孔板).
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