實(shí)時(shí)變形性流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)
實(shí)時(shí)變形性流式細(xì)胞術(shù)(real-time deformability cytometry,,RT-DC),利用腫瘤細(xì)胞等細(xì)胞的內(nèi)在特性——變形能力,,對無標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞分析,,這種無標(biāo)記的分析方法為流式細(xì)胞分析增加了新的可能


該系統(tǒng)利用力和光來描述細(xì)胞的新技術(shù),可以流式細(xì)胞儀的速度檢測單細(xì)胞形態(tài)和流變學(xué)性質(zhì),。細(xì)胞被泵入一個(gè)微流體芯片中,,同時(shí)對細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)拍照、分析和存儲(chǔ)數(shù)據(jù),。此外,,還可以對細(xì)胞施加非破壞性的力,以研究細(xì)胞對應(yīng)力做出的特異性應(yīng)答,,并將其作為細(xì)胞的無標(biāo)記,、內(nèi)源性生物標(biāo)志物。
在宏觀尺度上,,可以很直觀地檢測力學(xué)反應(yīng),。為了確定果實(shí)是否成熟,可輕輕地?cái)D壓果實(shí),,其形變程度依賴于手指施加的力和果實(shí)的性質(zhì),。類似地,測量單個(gè)細(xì)胞時(shí)產(chǎn)生的反應(yīng)依賴于細(xì)胞骨架,、細(xì)胞核,、細(xì)胞膜和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu).
流體動(dòng)力使細(xì)胞變形:當(dāng)細(xì)胞流經(jīng)很窄的流道時(shí),,周圍的液體產(chǎn)生力使其變形。這些力源自于流體內(nèi)部的摩擦力,,使越靠近壁面處的流動(dòng)速度越低,。流道中的細(xì)胞處于這種速度場中,暴露于速度梯度中,,從而受到一個(gè)對其施加輕微擠壓力的力場的作用,。高速成像揭示了細(xì)胞產(chǎn)生的形變,是細(xì)胞剛度的指標(biāo),。
高速成像細(xì)胞儀,,通過高通量測量形變來確定細(xì)胞的力學(xué)性質(zhì)。它可用作倒置顯微鏡的擴(kuò)展模塊,,配備特定的硬件和軟件后可方便靈活地測量細(xì)胞力學(xué)性質(zhì),。 我們的初始服務(wù)包括運(yùn)輸、安裝,、培訓(xùn)和*實(shí)驗(yàn)所需的所有耗材,。
由于細(xì)胞太小,分析單個(gè)細(xì)胞的機(jī)械力特性是很困難的,。之前的分析方法技術(shù)含量高,、操作復(fù)雜、分析量小,、檢測速度慢,,主要用在研究領(lǐng)域。RT-DC對細(xì)胞骨架的改變很敏感,,可以區(qū)分細(xì)胞周期階段,,跟蹤干細(xì)胞分化,根據(jù)機(jī)械力指紋在全血中鑒定細(xì)胞種類,,RT-DC比之前的機(jī)械力分析技術(shù)快一萬倍,,每秒可分析超過100個(gè)細(xì)胞。這種無標(biāo)記的分析方法為流式細(xì)胞分析添加了新的維度,,有著廣闊的應(yīng)用前景,。
機(jī)械力分型是一種無需標(biāo)記就可以定量細(xì)胞功能性改變的方法,在臨床診斷和預(yù)后判斷等方面有著很大的應(yīng)用潛力,。這是人們找到合適的對大量細(xì)胞進(jìn)行快速的機(jī)械力篩選的方法,。
應(yīng)用
檢測細(xì)胞骨架改變:
通過力學(xué)分析可以量化細(xì)胞骨架的變化。使用松胞素D抑制微絲會(huì)導(dǎo)致較大的形變,,降低HL60細(xì)胞的剛度,。下圖為處理與未處理細(xì)胞的疊加圖。