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尼氏染色科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹
閱讀：86 發(fā)布時(shí)間：2024-10-11尼氏染色
尼氏染色發(fā)明于1892年,，是根據(jù)它的發(fā)明人德國科學(xué)家Franz Nissl命名的,。細(xì)胞的DNA和RNA帶負(fù)電荷，這是因?yàn)樗鼈兎謩e是脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸組成,。以脫氧核糖核苷為例,，它由堿基、脫氧核糖和磷酸構(gòu)成,。 其中的磷酸使DNA和RNA帶負(fù)電荷,、呈酸性。尼式染色正是利用了DNA,、RNA酸性的特征,，用堿性的染料(比如，甲酚紫,、甲苯胺藍(lán))去綁定DNA和RNA,，從而將細(xì)胞著色。尼氏染色的部位主要是DNA聚集的細(xì)胞核,，內(nèi)質(zhì)網(wǎng),，特別是粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，其上的核糖體包含的核糖體RNA占細(xì)胞RNA總量的80%以上。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也因?yàn)槭悄崾先旧@著的染色位點(diǎn)而被稱為尼氏體,。
技術(shù)原理
神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個(gè)具有皺褶核膜的大細(xì)胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個(gè)明顯的核仁,。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒,，即能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點(diǎn)狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆?？梢杂煤芏嗳旧珌盹@示如中性紅,、亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等,。染色的變異,、pH和分化的時(shí)間使一些染色既可以僅突出尼氏物質(zhì)，也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì),。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體,，但其形狀、數(shù)量,、分布位置常常不同,。尼氏體也存在于樹突中，但不在于軸突和胞體的軸丘,。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化,，尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)合成的重要部位，當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后,，胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少,。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍(lán),、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色,。
實(shí)驗(yàn)流程
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：
注意事項(xiàng)：
1、切片若為石蠟切片,，要在二甲苯中先脫蠟,。
2、焦油紫或硫堇的染色時(shí)間也是根據(jù)染液配制時(shí)間的新舊,、切片厚度和環(huán)境溫度靈活掌握,。
3、應(yīng)該在顯微鏡下觀察分色程度,，使尼氏小體呈深色而背底基本無色為最佳,。如分色不夠，可以退回酒精再次分色,。如分色過度,，也可退回再染。
4、尼氏染色應(yīng)充分脫水,，否則容易褪色,。
5、HE染色方法雖然也能觀察到胞質(zhì)中嗜堿性顆粒,，但結(jié)構(gòu)不甚清晰,，神經(jīng)元的軸突、樹突難以辨認(rèn),。在尼氏染色中尼氏體清晰可辨,，而且很容易區(qū)分軸突和樹突。尼氏染色中尼氏體受染后呈塊狀（形如虎斑）或顆粒狀,，核周圍尼氏體顆粒較大,，近邊緣處較小而細(xì)長，如在生理情況下,，尼氏體大而數(shù)量多,，反映神經(jīng)細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的功能較強(qiáng)，在神經(jīng)元受損時(shí),，尼氏體的數(shù)量可減少甚至消失,。