微生物無菌檢測操作規(guī)程如下：

　　

　　1,、無菌室應配備無菌操作間和緩沖間,。無菌操作間潔凈度達到10000級。室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%,。超凈臺的潔凈度應達到100級,。

　　

　　2、無菌室應保持清潔,，嚴禁雜物,，防止污染。

　　

　　3,、嚴格防止所有滅菌設備和培養(yǎng)基受到污染,，被污染者應停止使用。

　　

　　4,、無菌室應配備工作濃度的消毒劑,，如5%甲酚溶液、70%酒精,、0.1%溴潔爾敏溶液等,。

　　

　　5、無菌室應定期用適當的消毒劑進行消毒清潔,，確保無菌室的潔凈度符合要求,。

　　

　　6、所有需要帶入無菌室的儀器,、器具,、盤子等物品,，應包扎嚴實,，并采用適當的方法進行滅菌。

　　

　　7,、進入無菌室前,，工作人員必須用肥皂或消毒液洗手，然后在緩沖間更換專用工作服,、鞋帽,、口罩和手套（或用70%乙醇再次擦手）。

　　

　　8,、使用無菌室前,，必須打開無菌室紫外線燈照射滅菌30分鐘以上，同時打開超凈臺進行吹氣,。手術后應及時清理無菌室,，并用紫外線燈消毒20分鐘。

　　

　　9,、微生物無菌檢測前,，試品外包裝應保持完好，不得打開，以防污染,。檢查前,，用70%酒精棉球對外表面進行消毒。

　　

　　10,、每次操作時應做陰性對照,，檢查無菌操作的可靠性。

　　

　　11,、吸菌液時,，必須用耳球吸。不要用嘴直接接觸吸管,。

　　

　　12,、微生物無菌檢測前后，接種針必須進行火焰燃燒消毒,，待培養(yǎng)物冷卻后才能接種。

　　

　　13,、吸管、試管,、培養(yǎng)皿等帶有菌液的器皿,，用含5%來蘇爾溶液的消毒桶浸泡消毒,，24小時后取出清洗。若菌液灑在桌面或地面上,，應立即用5%石炭酸溶液或3%來蘇爾溶液將其傾倒在污染處至少30分鐘后再進行處理,。工作服、帽子被菌液污染時,，應立即脫下，高壓蒸汽滅菌后清洗,。

　　

　　15,、所有帶有活菌的物品必須經過消毒后才能在水龍頭下清洗。嚴禁污染下水道,。每個月應在無菌室檢查菌落數。打開超凈工作臺后,，取數個內徑為90mm的無菌培養(yǎng)皿，注入約15ml溶化并冷卻至約45℃無菌操作的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,，放入30～35℃培養(yǎng)箱中48凝固后數小時，取3～5塊板分別放在工作位置的左,、中、右,。開蓋暴露30分鐘后,，放入30～35℃培養(yǎng)箱中48小時,，取出檢查,。100級潔凈區(qū)平板雜菌平均數不得超過1個菌落,，10000級潔凈室平均菌數不得超過3個菌落,。超過限值時,，對無菌室進行*消毒,，直至重復檢查符合要求。