迪圖(上海)生物科技有限公司 淺談紫外檢測(cè)儀概述:
紫外檢測(cè)儀是液相色譜中的一種紫外裝置,儀器配上層析柱,恒流泵,,部分收集器等,即組成一完整的液相色譜分離分析裝置,,它是從現(xiàn)代生物學(xué)研究,,藥物測(cè)定、農(nóng)業(yè)科研,、化工,、食品及醫(yī)療單位對(duì)具有紫外吸收的樣品的作定量分析,本儀器主要元件器采用進(jìn)口,,光電培增管IP28型,性能穩(wěn)定,、靈敏度高等,。
紫外檢測(cè)儀主要技術(shù)指標(biāo):
1、核酸蛋白檢測(cè)儀波長(zhǎng):254nm,、280nm
2,、紫外檢測(cè)儀波長(zhǎng):220nm、254nm,、280nm,、340nm
3、樣品池,,容積100微升,,光程3毫米
4、量程范圍:0-100%T,、0-2A,、0-1A,、0-0.5A、0-0.2A,、0-0.1A,、0-0.05A
5、LED數(shù)字顯示
6,、儀器可連續(xù)工作一周
7,、電源:220VAC±10%50HZ
8、溫度:-5℃~35℃
紫外檢測(cè)儀工作原理:
儀器工作原理的依據(jù)是光吸收定律,。從光源發(fā)出的光經(jīng)狹縫,、濾光片、樣品池到光電培增管上,,使束由于樣品濃度不同所引起光強(qiáng)的變化轉(zhuǎn)換成光電流的變化,,此光電流經(jīng)放大器輸入到對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器,使透光率T轉(zhuǎn)成A輸出,,即A=1g — =εCL式中ε為待測(cè)樣品的克分子消光系統(tǒng),C為樣品濃度,,采用克分子/升單位,,L為光程,用厘米作單位,。根據(jù)上式就知測(cè)出了A,就知樣品濃度C,。若從放大器直接輸入記錄儀,,繪出的是樣品透光率T變化的圖譜,,若從對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入到記錄儀繪出的是樣品光密度A變化的圖譜。
紫外檢測(cè)儀儀器結(jié)構(gòu):
它由一組光源,,四塊干涉濾色片,,一塊聚光透鏡,一只樣品池,,一只光電倍增管,,一塊放大板和一塊對(duì)數(shù)板等組成,面板上有聚乙稀塑料管的進(jìn)樣口和出樣口,,A調(diào)零以及調(diào)節(jié)“光量"大小旋鈕(光量大小以箭頭表示),。還有光源指示燈、電源指示燈以及量程轉(zhuǎn)換旋鈕,。
光源主要提供220,、254,、280,、340毫微米分別作為檢測(cè)核酸,、蛋白、酶,、多肽的光源。
濾色器由220,、254,、280、340毫微米譜線外尚含有其它波長(zhǎng)的譜線,,通過(guò)各自所對(duì)應(yīng)的濾色片就把非譜線波長(zhǎng)以外的其它波長(zhǎng)濾去,,這保證了儀器的單色性。
核酸蛋白檢測(cè)儀除測(cè)254nm,、280nm外,,其它性均同紫外檢測(cè)儀。
樣品池由石英玻璃管拉制而成,,內(nèi)徑一般為3毫米左右,,容積不大于100微升,。
紫外檢測(cè)儀記錄儀
根據(jù)用戶簽訂合同而定,,目前我公司配備有XWD-100型長(zhǎng)型記錄儀,LM17-A,、LM14-104,、XWT-1044以及3057型臺(tái)式記錄儀。用時(shí)他細(xì)參閱隨要說(shuō)明書(shū),。
本公司儀器記錄儀有以下幾個(gè)要求:
1,、量程一定用10mv。
2,、走紙速度為每小時(shí)3cm,、6cm或12cm。
紫外檢測(cè)儀使用方法:
1,、首先將主機(jī)和記錄儀二部分電路接妥,然后把主機(jī)的電源插頭插入220V電源插座上,。
2,、出廠前波長(zhǎng)設(shè)定280nm,若所需其它波長(zhǎng),,只需在儀器右側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)轉(zhuǎn)換旋鈕撥到實(shí)驗(yàn)所需檔,。
3,、按下主機(jī)電源開(kāi)關(guān)指示燈亮,若做透光度100%T測(cè)試把旋鈕(即靈敏度)撥到T檔,。調(diào)節(jié)光量旋鈕,,LED數(shù)字顯板上也同時(shí)顯示該數(shù)字。
4,、若做光密度A測(cè)試,,把量程旋鈕(即靈敏度)撥到實(shí)驗(yàn)需T檔。調(diào)節(jié)光量旋鈕,,使LED數(shù)字面板顯示約為98左右附近即可,。儀器預(yù)熱1.5小時(shí)左右,當(dāng)基線穩(wěn)定后,,就對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)校,。
5、把層析柱下端塑料管與主機(jī)進(jìn)樣塑料管相連接,,出樣塑料管接到部分收集器或試管內(nèi),,此時(shí)樣品池內(nèi)有洗脫液通過(guò)。
6,、調(diào)節(jié)光量旋鈕,,量程旋鈕放置100%T檔,使LED數(shù)字顯示為100,,T撥到A檔,,使LED面板上讀數(shù)為0左右,若作透光度T測(cè)試,,就可在層析柱上加樣,,對(duì)樣品進(jìn)行分離分析。
7,、若做光密度A測(cè)試,,把量程旋鈕(即靈敏度)撥到所需光密度A,調(diào)節(jié)光量旋鈕,,使LED面板為0,。此時(shí)記錄儀回到零點(diǎn)附近(注:零點(diǎn)附近即可,在實(shí)驗(yàn)中可自來(lái)定),。
8,、如繪出圖譜峰值過(guò)小,把量程旋鈕(即敏度)撥到所需位置,。
9,、在測(cè)試過(guò)程中,“光量"均不再變動(dòng),。測(cè)試完畢,,并用蒸餾水清洗樣品池和管道,。
紫外檢測(cè)儀注意事項(xiàng)
1、汞燈的光強(qiáng)受溫度和電壓影響較大,,建議用戶最好能在恒溫室內(nèi)工作或者在冰庫(kù)里工作,。
2、T調(diào)零生產(chǎn)時(shí)機(jī)內(nèi)已校準(zhǔn),,當(dāng)更換光電培增管后,,需重新校準(zhǔn)。
3,、汞燈壽命可達(dá)數(shù)千小時(shí),,若發(fā)現(xiàn)記錄儀不能調(diào)到10mV,且基線一直往小的方向漂移要考慮換燈,。如汞燈不亮可再按一次電源開(kāi)關(guān),,汞燈就會(huì)即亮,光電培增管壽命在數(shù)千小時(shí)以上,。注意開(kāi)機(jī)工作時(shí)不得拿出樣品池架,,以免強(qiáng)光照射光電培增管造成損壞。汞燈發(fā)光區(qū)域和光電培增管光陰極窗口沾污時(shí),,可用干凈棉芯酒精擦拭干凈,。