分子生物學實驗室區(qū)域的劃分

時間：2021/1/29閱讀：1864

一,、核酸檢測實驗室應劃分為五個獨立的工作區(qū),。五個工作區(qū)應按照從清潔、半污染到污染的順序排列,。各區(qū)內的試劑和耗材不能再進入任何“上游”區(qū)域,。

（1）試劑配置和貯存區(qū)：本區(qū)的功能是實驗相關試劑（如核算提取液、乙醇等）的配置和貯存（包括商業(yè)化的試劑,，如PCR反應緩沖液,、Taq聚合酶和dNTPs等）。用于PCR擴增的試劑建議分裝后保存,。

（2）樣品制備區(qū)：本區(qū)的功能為待檢樣品的保存,、核酸的提取、貯存等,。進行RNA檢測的實驗室,，在此區(qū)域內應辟出專門的RNA操作區(qū)，或安裝一臺Ⅱ級生物安全柜或外排風式的排風櫥來替代,。

（3）PCR反應配制區(qū)：本區(qū)的功能為配制,、分裝PCR主反應混合液以及加入核酸模板。對于使用巢式PCR進行檢測的實驗室,，建議在此區(qū)安裝一臺Ⅱ級生物安全柜或外排風式的排風櫥,，，頭一輪的擴增產物添加至第二輪的主反應混合液的操作可在此區(qū)進行,。

（4）擴增區(qū)：核酸擴增,。加了DNA或RNA等模板的反應管應蓋好管蓋后才拿到本區(qū)。

（5）擴增產物分析區(qū)：本區(qū)的功能為擴增片段的測定,。本區(qū)是主要的擴增產物污染來源,，應注意避免通過本區(qū)的物品將擴增產物帶出,。對于使用定量PCR進行檢測的實驗室，此產物分析區(qū)可以省略,。

二,、以上各區(qū)域擁有明確的標記。進入各工作區(qū)域應盡量按單一方向進行,，即試劑配制和貯存區(qū),、樣品制備區(qū)、PCR反應配制區(qū),、擴增區(qū)和擴增產物分析區(qū),。

三、每個工作區(qū)域內都應有專項使用的設備,，包括加樣設備,，如移液器、吸頭等,。適當時,，可以用顏色或其他方式對不同區(qū)域內的實驗用品加以區(qū)分，并避免不同工作區(qū)域內的設備和實驗用品混用,。

四、適宜時,，實驗室內可配置便攜式紫外消毒裝置,，用于各工作區(qū)域內的實驗表面、臺面,、地面等的紫外消毒,。

五、定期對擴增產物分析用1mol/L的鹽酸擦拭臺面,，以防擴增產物的污染,。用過的電泳凝膠和電泳緩沖液要集中處理。

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