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當(dāng)前位置:迪圖(上海)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>如何選擇BTX轉(zhuǎn)基因儀
1,、確定目標(biāo)對象:也就是你所有轉(zhuǎn)的目的物是什么東西,?
細(xì)胞系和細(xì)胞類型
細(xì)胞類型包括人類,、哺乳動物、細(xì)菌,、植物,、藻類、霉菌,、寄生蟲等
細(xì)胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato,,Trypanosome,E coli等
2,、其次確定目的
目的包括:轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)化 電整合 電插入 活體/卵的應(yīng)用 核移植和克隆 細(xì)胞融合
然后根據(jù)這些來確定該選擇什么類型的儀器,。
1、 某位老師使用化學(xué)法轉(zhuǎn)化大腸桿菌E.coli,。他希望構(gòu)建cDNA文庫,,但是不能得到好的轉(zhuǎn)化效率。他以后還想做哺乳動物細(xì)胞,。如何來選擇儀器:
選擇方案:ECM 399將是較好的選擇,,這儀器用來轉(zhuǎn)化E.coli效果十分理想,同時操作簡單。如果有足夠的預(yù)算,,可以選擇ECM 630, 這樣更符合他現(xiàn)在和將來的需求,。
2、某位老師想要進行一些雞胚的研究工作,,他們希望轉(zhuǎn)染雞的眼睛,,以便研究視覺膜的發(fā)育過程。他對卵的基因傳遞有一些了解,。
選擇方案:完成這個轉(zhuǎn)染過程需要 ECM 830和活體電極Genetrodes,。由于目標(biāo)區(qū)域很小,他需要小的長的genetrode,。方波適合動物體的活體轉(zhuǎn)基因,,同時針形的電極是卵的轉(zhuǎn)基因的選。
3,、遺傳研究中心希望開展某種疾病的基因治療,,首先從小動物例如小鼠,以后要在狗,、豬等動物體開展,。客戶希望用基因槍的方法,。但是覺得條件不易控制,。
選擇方案:基因槍不是理想的活體轉(zhuǎn)基因的方法?;驑屓菀讉Σ溉閯游锏慕M織,,同時條件可控性差,DNA的轉(zhuǎn)移效果不理想,。推薦使用ECM 830 和2 Needle Array 用于小動物研究,,對于大的動物研究的話還需配 caliper electrode。
4,、Dr. Mendle使用agrobacteria來轉(zhuǎn)化煙草的原生質(zhì)體,。他在尋找快速在完整的植株上完成轉(zhuǎn)基因的方法。此時如何選擇,?
選擇方案:ECM 630和特殊電極,。電極的選擇需要根據(jù)植物轉(zhuǎn)基因的部位。一般有三種電極可以選擇Tweezertrode,、 Caliper Electrode,、 Needle Arrays.根據(jù)他所轉(zhuǎn)的植物體大小,硬度等進行
5,、Dr. Hofmann正使用脂質(zhì)體方法轉(zhuǎn)染原代神經(jīng)細(xì)胞,,但是結(jié)果差強人意,,僅得到1%的轉(zhuǎn)染效率。但是他不希望使用電轉(zhuǎn),,因為怕殺死細(xì)胞,。這些希望不能被胰蛋白酶消化(會引起其他變化)所以他不能使用樣品杯。給怎么辦,。
選擇方案:推薦使用ECM 830 和petri dish 電極或者epizap電極,。這樣可以用溫和的方法完成原位轉(zhuǎn)基因。
6,、 Dr. Bloom希望你給他推薦一款融合儀,。他過去使用化學(xué)的方法來進行的。怎么來推薦,。
選擇方案:如果費用允許,, ECM 2001是的選擇。它提供交流波能排列細(xì)胞,,可以完成所有的細(xì)胞融合試驗,。如果費用不足的話,ECM830也可以完成核移植的工作,,在融合時需要將兩個細(xì)胞進行排列,,或者細(xì)胞的濃度足夠大。
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