1,、確定目標(biāo)對(duì)象:也就是你所有轉(zhuǎn)的目的物是什么東西?
細(xì)胞系和細(xì)胞類型
細(xì)胞類型包括人類,、哺乳動(dòng)物,、細(xì)菌、植物、藻類,、霉菌,、寄生蟲等
細(xì)胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato,Trypanosome,,E coli等
2,、其次確定目的
目的包括:轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)化 電整合 電插入 活體/卵的應(yīng)用 核移植和克隆 細(xì)胞融合
然后根據(jù)這些來確定該選擇什么類型的儀器。
1,、 某位老師使用化學(xué)法轉(zhuǎn)化大腸桿菌E.coli,。他希望構(gòu)建cDNA文庫,但是不能得到好的轉(zhuǎn)化效率,。他以后還想做哺乳動(dòng)物細(xì)胞,。如何來選擇儀器:
選擇方案:ECM 399將是較好的選擇,這儀器用來轉(zhuǎn)化E.coli效果十分理想,,同時(shí)操作簡(jiǎn)單,。如果有足夠的預(yù)算,可以選擇ECM 630, 這樣更符合他現(xiàn)在和將來的需求,。
2,、某位老師想要進(jìn)行一些雞胚的研究工作,他們希望轉(zhuǎn)染雞的眼睛,,以便研究視覺膜的發(fā)育過程,。他對(duì)卵的基因傳遞有一些了解。
選擇方案:完成這個(gè)轉(zhuǎn)染過程需要 ECM 830和活體電極Genetrodes,。由于目標(biāo)區(qū)域很小,,他需要小的長(zhǎng)的genetrode。方波適合動(dòng)物體的活體轉(zhuǎn)基因,,同時(shí)針形的電極是卵的轉(zhuǎn)基因的選,。
3、遺傳研究中心希望開展某種疾病的基因治療,,首先從小動(dòng)物例如小鼠,,以后要在狗、豬等動(dòng)物體開展,??蛻粝M没驑尩姆椒ā5怯X得條件不易控制,。
選擇方案:基因槍不是理想的活體轉(zhuǎn)基因的方法,。基因槍容易傷害哺乳動(dòng)物的組織,,同時(shí)條件可控性差,,DNA的轉(zhuǎn)移效果不理想,。推薦使用ECM 830 和2 Needle Array 用于小動(dòng)物研究,對(duì)于大的動(dòng)物研究的話還需配 caliper electrode,。
4,、Dr. Mendle使用agrobacteria來轉(zhuǎn)化煙草的原生質(zhì)體。他在尋找快速在完整的植株上完成轉(zhuǎn)基因的方法,。此時(shí)如何選擇,?
選擇方案:ECM 630和特殊電極。電極的選擇需要根據(jù)植物轉(zhuǎn)基因的部位,。一般有三種電極可以選擇Tweezertrode、 Caliper Electrode,、 Needle Arrays.根據(jù)他所轉(zhuǎn)的植物體大小,,硬度等進(jìn)行

5、Dr. Hofmann正使用脂質(zhì)體方法轉(zhuǎn)染原代神經(jīng)細(xì)胞,,但是結(jié)果差強(qiáng)人意,,僅得到1%的轉(zhuǎn)染效率。但是他不希望使用電轉(zhuǎn),,因?yàn)榕職⑺兰?xì)胞,。這些希望不能被胰蛋白酶消化(會(huì)引起其他變化)所以他不能使用樣品杯。給怎么辦,。
選擇方案:推薦使用ECM 830 和petri dish 電極或者epizap電極,。這樣可以用溫和的方法完成原位轉(zhuǎn)基因。
6,、 Dr. Bloom希望你給他推薦一款融合儀,。他過去使用化學(xué)的方法來進(jìn)行的。怎么來推薦,。
選擇方案:如果費(fèi)用允許,, ECM 2001是的選擇。它提供交流波能排列細(xì)胞,,可以完成所有的細(xì)胞融合試驗(yàn),。如果費(fèi)用不足的話,ECM830也可以完成核移植的工作,,在融合時(shí)需要將兩個(gè)細(xì)胞進(jìn)行排列,,或者細(xì)胞的濃度足夠大。