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當前位置:迪圖(上海)生物科技有限公司>>技術文章>>電泳實驗的危害與防護注意事項
1.DNA電泳與溴化乙錠
“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗,。“質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗,。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色,。EB是強誘變劑,具有高致癌性,,會在60~70 cc蒸發(fā),,所以在學生實驗中要特別注意其安全使用,嚴禁隨便丟棄,。在實驗中使用及實驗結(jié)束后處理應注意以下事項,。
1.1 使用中注意事項
實驗室涉及到EB的操作應統(tǒng)一固定在實驗室的某一角落,稱量固體時要帶面罩和手套,,使用含有EB的溶液務必帶上手套,。同時不要在膠太熱的時候加EB,以防止因蒸發(fā)被吸入,。接觸到EB的玻璃器皿應集中放置并專門使用,,污染到EB的槍頭、抹布,、手套及EB染色跑完的膠,,回收至棕色的玻璃瓶中,定期進行焚燒處理舊,。桌面或物體表面污染到EB時,,可用活性碳進行處理。
1.2 廢EB溶液處理
(1)EB濃溶液(濃度大于0.5 mg/mI)的凈化處理
先將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5 mg/mI,,加人1倍體積的5%次高錳酸鉀,,小心混勻后再加1倍體積的2.5 moL/L鹽酸。小心混勻,,于室溫放置數(shù)小時,;加入l倍體積的2.5 mol/L氫氧化鈉,小心混勻后可丟棄該溶液,,統(tǒng)一處理,。
(2)EB稀溶液(濃度小于0.5 mg/mI)的凈化處理按1 mg/mL的量加入活性炭,不時輕搖混勻,,室溫放置1 h,;用濾紙過濾溶液,丟棄濾液并將活性碳與濾紙密封后丟棄,,統(tǒng)一處理,。
2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳與有毒、有害物質(zhì)
聚丙烯酰胺凝膠電泳在生物化學實驗中是常用的實驗手段,涉及到蛋白質(zhì)分離純化及鑒定,、蛋白質(zhì)分子量及等電點測定的實驗都會使用到該電泳方法,,如“聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)”、“SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)的相對分子量”,、“聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦法測定蛋白質(zhì)等電點”等基礎實驗,。在聚丙烯酰胺凝膠制備過程中用到以下有毒、有害物質(zhì):
2.1 丙烯酰胺
丙烯酰胺具有很強的神經(jīng)毒性,,同時還有生殖,、發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學習,、記憶和其他認知功能部位的退行性變化,。實驗還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物。丙烯酰胺可通過皮膚吸收及呼吸道進入人體,,且累積毒性,,不容易排毒。因此,,稱量固體丙烯酰胺粉末和處理它們的溶液時必須戴手套和口罩,。當丙烯酰胺聚合為聚丙烯酰胺凝膠時則為無毒的,但操作時仍要小心,,凝膠內(nèi)可能有少量未聚合的丙烯酰胺,。
2.2 甲叉雙丙烯酰胺
甲叉雙丙烯酰胺是丙烯酰胺形成凝膠的交聯(lián)劑,因有取代基丙烯酰胺,,因此具有一定的毒性,,能輕微刺激眼睛、皮膚和粘膜,。稱量固體粉末和處理它們的溶液時需戴手套和口罩,應避免與人體長時間直接接觸,,誤碰觸時應用清水洗凈,。
2.3 TEMED
TEMED是形成凝膠反應所用的加速劑,也具有強神經(jīng)毒性,,應防止誤吸,,操作時快速,存放時密封,。
2.4 過硫酸銨
過硫酸銨是丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺進行化學聚合的引發(fā)劑,,對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性,。吸人可致命,。操作時需戴合適的手套、安全眼鏡和面罩,始終在通風櫥里操作,,操作完后*洗手,。
2.5 十二烷基硫酸鈉(SDS)
SDS是·種陰離子表面活性劑,與蛋白形成復合物,,用于測定蛋白質(zhì)分子量,。SDS有毒,是一種刺激物,,能對眼睛造成嚴重損傷,,可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康,。稱量及配溶液時不要吸人其粉末,,需戴合適的手套、面罩和護目鏡,。
2.6 巰基乙醇
它在測定蛋白質(zhì)分子量時用于處理樣品,,吸入、攝人或經(jīng)皮膚吸收后會中毒,。其中毒表現(xiàn)有紫紺,、嘔吐、震顫,、頭痛,、驚厥、昏迷,,甚至死亡,;對眼、皮膚有強烈刺激性,;對環(huán)境有危害,;對水體可造成污染。應在通風櫥里操作,,佩戴面罩,,戴乳膠手套。
3. RNA提取與有毒,、有害溶劑
“動物肝臟RNA的制備和純度測定”是生物化學實驗課中必開的基礎實驗,,RNA的提取過程需要用到溶劑去除蛋白質(zhì),這些溶劑對人體具有一定的毒性,。
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