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電泳實(shí)驗(yàn)的危害與防護(hù)注意事項(xiàng)
1.DNA電泳與溴化乙錠
“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)型實(shí)驗(yàn)。“質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學(xué)校也是必開的綜合性實(shí)驗(yàn),。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實(shí)驗(yàn)都會(huì)用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對(duì)DNA進(jìn)行染色。EB是強(qiáng)誘變劑,，具有高致癌性，會(huì)在60～70 cc蒸發(fā),，所以在學(xué)生實(shí)驗(yàn)中要特別注意其安全使用,，嚴(yán)禁隨便丟棄。在實(shí)驗(yàn)中使用及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處理應(yīng)注意以下事項(xiàng),。
1.1 使用中注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)室涉及到EB的操作應(yīng)統(tǒng)一固定在實(shí)驗(yàn)室的某一角落,，稱量固體時(shí)要帶面罩和手套，使用含有EB的溶液務(wù)必帶上手套,。同時(shí)不要在膠太熱的時(shí)候加EB,，以防止因蒸發(fā)被吸入。接觸到EB的玻璃器皿應(yīng)集中放置并專門使用,，污染到EB的槍頭,、抹布、手套及EB染色跑完的膠,，回收至棕色的玻璃瓶中,，定期進(jìn)行焚燒處理舊。桌面或物體表面污染到EB時(shí),，可用活性碳進(jìn)行處理,。
1.2 廢EB溶液處理
(1)EB濃溶液（濃度大于0.5 mg/mI）的凈化處理
先將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5 mg/mI，加人1倍體積的5％次高錳酸鉀,，小心混勻后再加1倍體積的2.5 moL/L鹽酸,。小心混勻，于室溫放置數(shù)小時(shí),；加入l倍體積的2.5 mol/L氫氧化鈉,，小心混勻后可丟棄該溶液,，統(tǒng)一處理。
(2)EB稀溶液(濃度小于0.5 mg/mI)的凈化處理按1 mg/mL的量加入活性炭,，不時(shí)輕搖混勻,，室溫放置1 h；用濾紙過濾溶液,，丟棄濾液并將活性碳與濾紙密封后丟棄,，統(tǒng)一處理。
2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳與有毒,、有害物質(zhì)
聚丙烯酰胺凝膠電泳在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中是常用的實(shí)驗(yàn)手段,，涉及到蛋白質(zhì)分離純化及鑒定、蛋白質(zhì)分子量及等電點(diǎn)測(cè)定的實(shí)驗(yàn)都會(huì)使用到該電泳方法,，如“聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)”,、“SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量”、“聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦法測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)”等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),。在聚丙烯酰胺凝膠制備過程中用到以下有毒,、有害物質(zhì)：
2.1 丙烯酰胺
丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，同時(shí)還有生殖,、發(fā)育毒性,。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變化,。實(shí)驗(yàn)還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物,。丙烯酰胺可通過皮膚吸收及呼吸道進(jìn)入人體，且累積毒性,，不容易排毒,。因此，稱量固體丙烯酰胺粉末和處理它們的溶液時(shí)必須戴手套和口罩,。當(dāng)丙烯酰胺聚合為聚丙烯酰胺凝膠時(shí)則為無(wú)毒的,，但操作時(shí)仍要小心，凝膠內(nèi)可能有少量未聚合的丙烯酰胺,。
2.2 甲叉雙丙烯酰胺
甲叉雙丙烯酰胺是丙烯酰胺形成凝膠的交聯(lián)劑,，因有取代基丙烯酰胺，因此具有一定的毒性,，能輕微刺激眼睛,、皮膚和粘膜。稱量固體粉末和處理它們的溶液時(shí)需戴手套和口罩,，應(yīng)避免與人體長(zhǎng)時(shí)間直接接觸,，誤碰觸時(shí)應(yīng)用清水洗凈。
2.3 TEMED
TEMED是形成凝膠反應(yīng)所用的加速劑，也具有強(qiáng)神經(jīng)毒性,，應(yīng)防止誤吸,，操作時(shí)快速，存放時(shí)密封,。
2.4 過硫酸銨
過硫酸銨是丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺進(jìn)行化學(xué)聚合的引發(fā)劑,，對(duì)黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性,。吸人可致命,。操作時(shí)需戴合適的手套、安全眼鏡和面罩,，始終在通風(fēng)櫥里操作,，操作完后*洗手。
2.5 十二烷基硫酸鈉(SDS)
SDS是·種陰離子表面活性劑,，與蛋白形成復(fù)合物,，用于測(cè)定蛋白質(zhì)分子量。SDS有毒,，是一種刺激物,，能對(duì)眼睛造成嚴(yán)重?fù)p傷，可因吸入,、咽下或皮膚吸收而損害健康,。稱量及配溶液時(shí)不要吸人其粉末，需戴合適的手套,、面罩和護(hù)目鏡。
2.6 巰基乙醇
它在測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)用于處理樣品,，吸入,、攝人或經(jīng)皮膚吸收后會(huì)中毒。其中毒表現(xiàn)有紫紺,、嘔吐,、震顫、頭痛,、驚厥,、昏迷，甚至死亡,；對(duì)眼,、皮膚有強(qiáng)烈刺激性；對(duì)環(huán)境有危害,；對(duì)水體可造成污染,。應(yīng)在通風(fēng)櫥里操作，佩戴面罩，戴乳膠手套,。
3. RNA提取與有毒,、有害溶劑
“動(dòng)物肝臟RNA的制備和純度測(cè)定”是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課中必開的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，RNA的提取過程需要用到溶劑去除蛋白質(zhì),，這些溶劑對(duì)人體具有一定的毒性,。