PCR技術是一種分子生物學技術,，用于在幾個數(shù)量級上擴展一段DNA的一個或幾個拷貝，復制數(shù)千到數(shù)百萬個DNA序列,。作為一種廉價但可靠的方法,，能夠重復復制DNA的聚焦片段。ABI公司的PCR儀器在行業(yè)內受到普遍的歡迎。今天小編 Veriti 梯度PCR儀為例就為您簡單介紹一下具體的操作方法,。

步驟：

1,、打開PCR儀的熱蓋，插入0.2ml的樣品管,，蓋好熱蓋；

2,、打開PCR儀的電源,，儀器程序開始初始化，需等待幾分鐘,；

3,、初始化完成后，顯示主菜單,；

4,、點“Browse/New Methods”，進入PCR程序列表,；

5,、可以直接點一個PCR程序，選擇“Start Run”運行,；點右邊的符號,，可以選擇不同的文件夾。如要新建一個PCR程序,，點“New”,，出現(xiàn)PCR程序；

6,、添加一段程序：點中上方的“Stage”位置,，該位置變紅；再點“Add”,，軟件將加入一段新的程序,；

7、修改循環(huán)數(shù),、溫度,、時間：點中循環(huán)次數(shù)、溫度或時間位置,，下方出現(xiàn)數(shù)字鍵,。依次點數(shù)字鍵，出現(xiàn)合適數(shù)字后,，點“Done”確定,；

8、增加一個步驟：點“Step”位置，該位置變紅,；再點“Add”,，軟件將加入一個新的步驟；

9,、刪除一個步驟：點“Step”位置,，在點“Delete”，軟件將該步驟刪除,；

10,、建立梯度模式：點中一個步驟，再點“Option”鍵,；

11,、點“VeriFlex step”，出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口,；

輸入6個梯度溫度,，溫度下方的“1－2”是指對應的1、2兩行加熱孔,，全部輸好后,，點“Done”確定。注意：相鄰的兩個梯度溫度之差較為大不能*過5℃,！

12,、建立漸變模式：

1）點中一個步驟，再點“Option”鍵,；

2）點“Auto Delta”,，出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口；

點“Staring Cycle”,，輸入起始循環(huán)數(shù),；點“Delta Temperature”，輸入溫度變化值,；點“Delta Time”,，輸入時間變化值。漸變模式適用于touchdown PCR,，可以提高PCR反應的特異性,。例：輸入起始循環(huán)數(shù)為2，溫度變化值為＋0.5℃,，時間變化值為＋5s,，則表示從第2個循環(huán)開始，每循環(huán)一次升溫0.5℃,，時間增加5s,。
13,、增加暫停步驟：

1）點中一個步驟，再點“Option”鍵,；

2）點“Pause”,；

輸入暫停的起始位置，暫停間隔和暫停時間,，點“Done”確定,。上圖表示每隔10個循環(huán)暫停10s，在10個循環(huán)的第1個循環(huán)之前暫停,。

14,、編輯PCR程序完成后，點“Save”保存;

點“Run Method”,，輸入PCR程序名稱；點,，選擇保存PCR程序的文件夾（如果要保存在USB文件夾中,，需要先插U盤）。再輸入反應體積和熱蓋溫度（這兩項在運行程序時可以修改）,。點“SaveδExit”確定,；
15、回到PCR程序列表界面,，選擇新建的PCR程序,；

16、點“Start Run”,，出現(xiàn)運行參數(shù)設置窗口,；

17、儀器運行選中的PCR程序,，顯示運行監(jiān)視窗口,；

18、暫停運行：
點“Pause Run”,，儀器暫停,，出現(xiàn)暫停選項欄；

“Remaining Time”顯示暫停剩余時間,，“Elapse Time”顯示已暫停時間,。
如果需要修改暫停時間，點,，輸入時間值,，點“Done”確定；點“Resume Run”,，結束暫停,，繼續(xù)運行PCR程序,。
19、終止運行：點“Stop”可以終止整個PCR程序,；
20,、反應報告：
PCR程序結束后，儀器會自動生成反應報告,，顯示當次反應的各項指數(shù),。該報告可以保存和打印,；

21,、PCR反應結束后，打開熱蓋,，取出樣品,，關閉儀器電源。并開蓋放置,，使熱蓋和加熱模塊正常降溫,。

以上就是ABI VeritiPCR儀的操作步驟，希望對各位有所幫助,。如果您有任疑問,，歡迎您咨詢上海巴玖，期待給您一個滿意的回復,。