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當(dāng)前位置：迪圖（上海）生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀工作原理解析圖
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀廣泛應(yīng)用于各級(jí)各類(lèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)、大學(xué)及研究所,、CDC,、檢驗(yàn)檢疫局、獸醫(yī)站,、食品企業(yè)及乳品廠(chǎng)等,。實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成,，用來(lái)監(jiān)測(cè)循環(huán)過(guò)程的熒光,。與實(shí)時(shí)設(shè)備相連的計(jì)算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù),。數(shù)據(jù)通過(guò)開(kāi)發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對(duì)于循環(huán)數(shù)的圖表,。原始數(shù)據(jù)收集后可以開(kāi)始分析,。實(shí)時(shí)設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正常化處理來(lái)彌補(bǔ)背景熒光的差異,。正常化后可以設(shè)定域值水平,，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平,。
實(shí)時(shí)熒光定量Pcr儀主要工作原理:
標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性,，低溫復(fù)性,，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律,，與模板DNA互補(bǔ)配對(duì)的Taqman探針被切斷,，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加,，被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長(zhǎng),，通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)與之對(duì)應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號(hào)強(qiáng)度，求得CT值,，同時(shí)利用數(shù)個(gè)已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照,，即可得出待測(cè)標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。
工作原理解析圖：
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