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電泳槽部件組裝操作方法

時間:2017/5/8閱讀:5363
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電泳槽清洗部件

電泳槽部件組裝前要*清洗干凈,。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑*清洗干凈,。清洗后的玻璃板應放在玻璃板支架上晾干水后方能使用,。

A組裝電泳槽

1、將四只固定螺桿插進一只貯液框(半上槽)的相應孔洞中,,然后將貯液框仰放在桌上,。

左手拿凹型槽橡膠模框,,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側(cè)邊緣插到橡膠??騼?nèi) (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。

將帶有玻璃的橡膠??蜃臃旁谘龇诺馁A液槽框架上,,其下緣必須對齊貯液槽框下緣。

雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機玻璃框中央,。

裝上四只螺母,擰緊螺絲,。注意擰緊螺絲時用力應均勻,,用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。

將電泳槽垂直豎起,,放在桌上,,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰),帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽),,在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙,。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡,。待瓊脂*凝固后才能灌膠,。

也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠??蛑苯臃湃氩壑?,對稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊,。

B灌膠

先灌分離膠,,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。

用細頭滴管吸取膠液,,沿長,、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產(chǎn)生氣泡,,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),,不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,,輕輕加少許水,,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔,。

為防止漏膠,,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,,但蒸餾水不能*過短玻璃板上緣,。

膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折射率不同的亮區(qū)。

C加樣

松開連接上,、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,,放掉槽內(nèi)的蒸餾水,待水流完后,,再夾緊夾子,。

雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,,將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面),。

在上、下貯液槽中加入緩,;中液,,液體高度應*過上貯液槽短玻璃板上緣。

用微量注射器吸取一定量的樣品加到長,、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(nèi)(注意加樣動作要輕,,針頭不能碰壞膠面),。

D電泳

一貯液槽導線與電泳儀的負極相連,下貯液槽導線與電泳儀的正極相連,。檢查線路無誤,,方可按照所要求的電壓電流進行電泳。

E取出膠板

電泳結(jié)束,,旋松螺母,,取出膠框,剝出玻璃板,,在兩塊玻璃板下角空隙內(nèi),,用刀片背面輕輕撬動,即可將膠面與一塊玻璃板分開,,將有膠板的玻璃板平放在桌上,,雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起,放在大培養(yǎng)皿中染色,,膠板經(jīng)漂洗,、脫色后即可看到清晰的分離條帶

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